MAB5266
Anticuerpo anti-neurofilamento de 200 kDa, clon N52
clone N52, Chemicon®, from mouse
Sinónimos:
Anti-CMT2CC, Anti-NFH
About This Item
Productos recomendados
origen biológico
mouse
Nivel de calidad
100
300
forma del anticuerpo
purified immunoglobulin
tipo de anticuerpo
primary antibodies
clon
N52, monoclonal
reactividad de especies
human, mouse, monkey, rat, pig
fabricante / nombre comercial
Chemicon®
técnicas
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
isotipo
IgG1
Nº de acceso NCBI
Nº de acceso UniProt
Condiciones de envío
wet ice
modificación del objetivo postraduccional
unmodified
Información sobre el gen
human ... NEFH(4744)
mouse ... Nefh(380684)
pig ... Nefh(100156492)
rat ... Nefh(24587)
rhesus monkey ... Nefh(717705)
Descripción general
Especificidad
Inmunógeno
Aplicación
Neurociencia
Inmunohistoquímica: 5-10 μg/ml
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
Inmunohistoquímica: El anticuerpo N52 reacciona con un fragmento del brazo lateral NF-200 que se encuentra en el extremo del dominio MPR KSP y que contiene el sitio de fosforilación de consenso cdk-5, sin embargo, esta reactividad se elimina si el fragmento NF-200 es fosforilado por cdk-5 {Guidato et al, 1996}. Por lo tanto, para una tinción y reactividad más completas, incluidas las transferencias werstern, se sugiere que las muestras se traten con fosfatasa alcalina antes de la tinción de anticuerpos. Se sugiere el siguiente protocolo de tratamiento:
Protocolo Preparación de las disoluciones:
I. TBS: Tris-HCl, 0,1 mol/l; NaCl, 0,1 mol/l′ pH 8,0.
II. Mezcle la fosfatasa alcalina, 1 mg/ml con 1 mol/l de ZnSO4, 1mol/l MgCl2 y 1mmol/l PMSF; y disuelva en TBS.
NOTA: Es necesario dializar la fosfatasa alcalina contra la disolución I antes de su uso.
Procedimiento:
Los cortes congelados de las muestras de tejido congeladas por choque se secan al aire y luego se fijan con acetona durante 10 minutos a -20°C. Se deja evaporar el exceso de acetona a temperatura ambiente. Incube los cortes en las disoluciones II durante 4 horas a +30 °C y lávelos en TBS 3 veces durante 5 minutos cada una. Los cortes de control negativo se incuban en la disolución II sin fosfatasa alcalina. Tratamiento adicional como siguiente:
- Cubra la preparación con 10-20 μl de disolución de anticuerpos e incube durante 1 hora en una cámara húmeda.
- Sumerja el portaobjetos en TBS y lávelo en TBS 3 veces durante 5 minutos cada una.
- Cubra la preparación con 10-20 μl de una disolución de anticuerpo Ig anti-ratón, marcado con isotiocianato de fluorosceína, e incube en una cámara húmeda a 37°C durante 1 hora.
- Lave el portaobjetos en TBS 3 veces durante 5 minutos cada una.
Neurofilamentos y metabolismo neuronal
Marcadores neuronales y gliales
Forma física
Almacenamiento y estabilidad
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Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
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