Las sondas con marcaje doble son el tipo de sonda más habitual para la qPCR y a menudo se las denomina sondas de hidrólisis.
Elija sondas de marcaje doble para:
- Validación de micromatrices
- Multiplicación de genes diana/pocas muestras
- Detección de patógenos
- Multiplexado
- Cuantificación de la concentración vírica
- Análisis de la expresión génica.
- Determinación de copias génicas
Perfecto para validar las atenuaciones siRNA y shRNA MISSION®.
Entre las ventajas del uso de sondas de marcaje doble se cuentan:
- Simplicidad del diseño para la especificidad de la secuencia
- Amplia disponibilidad de combinaciones de reportero/extinguidor (quencher)
- Aumento de la sensibilidad
Añada ácido nucleico bloqueado a su sonda para:
- Aumentar la estabilidad térmica y la especificidad de la hibridación
- Mayor precisión en la detección de SNP, la discriminación de alelos y la cuantificación o detección in vitro
- Diseños de sondas más fáciles y sensibles para secuencias diana problemáticas
Cómo funcionan las sondas con marcaje doble
Una sonda con marcaje doble es un oligonucleótido monocatenario marcado con dos colorantes diferentes. Un colorante reportero se sitúa en el extremo 5' y una molécula extinguidora (quencher) se sitúa en el extremo 3' La molécula extinguidora inhibe la emisión de fluorescencia natural del reportero mediante transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET). En la siguiente ilustración se muestra el mecanismo.

La polimerasa alarga el cebador y la sonda se une a la plantilla específica de ADN. La hidrólisis libera el reportero del híbrido sonda/diana, lo que provoca un aumento de la fluorescencia. La señal de fluorescencia medida es directamente proporcional a la cantidad de ADN diana.
Las características del producto son:
- Cantidades: 1, 3, 5 y 10 DO
- Purificación: HPLC
- Longitudes de las secuencias de 15 a 40 bases
- Control de calidad: espectrometría de masas 100 %
- Formato: Se suministra seco en tubos ámbar
- Formatos personalizados a su disposición (normalización, placas especiales, etc.)
Nuestras sondas se proporcionan en un formato que simplifica su planificación experimental.
Producción garantizada | |||
---|---|---|---|
Producción de DO garantizada | Número aprox. de nmoles | Número aprox. de µg | Número aprox. de reacciones* |
1 | 4 | 32 | 800 |
3 | 12 | 96 | 2 400 |
5 | 20 | 160 | 4 000 |
10 | 40 | 320 | 8 000 |
Tabla de propiedades espectrales | |||
---|---|---|---|
Colorante | Máx. EX (nm) | Máx. EM (nm) | Quencher compatible |
6-FAM™ | 495 | 520 | BHQ™-1, TAMRA™ |
JOE™ | 529 | 555 | BHQ™-1, TAMRA™ |
TET™ | 521 | 536 | BHQ™-1, TAMRA™ |
Cal Fluor® Gold 5401 | 522 | 544 | BHQ™-1 |
HEX™2 | 535 | 556 | BHQ™-1, TAMRA™ |
Cal Fluor® Orange 5602 | 538 | 559 | BHQ™-1 |
TAMRA™ | 557 | 583 | BHQ™-2 |
Cianina 3 | 549 | 566 | BHQ™-2 |
Quasar®5703 | 548 | 566 | BHQ™-2 |
Cal Fluor® Red 5904 | 569 | 591 | BHQ™-2 |
ROX™ | 586 | 610 | BHQ™-2 |
TxRd (Sulforhodamine 101-X) | 597 | 616 | BHQ™-2 |
Cianina 5 | 646 | 669 | BHQ™-3 |
Quasar® 6705 | 647 | 670 | BHQ™-3 |
Cianina 5,5 | 675 | 694 | BHQ™-3 |
1Alternativa JOE/TET
2Alternativa VIC®
3Alternativa Cianina 3
4Alternativa TAMRA™
5Alternativa Cianina 5
Calendario de envío | ||||
---|---|---|---|---|
Cantidad (DO) | 1 | 3 | 5 | 10 |
Sondas con marcaje doble con colorantes estándar | 3-5 días | 3-5 días | 3-5 días | 3-5 días |
Sondas de ácido nucleico bloqueadas con marcaje doble con colorantes estándar | 7 días | 7 días | 7 días | 7 días |
Sondas con marcaje doble con colorantes post-síntesis, con/sin ácido nucleico bloqueado | 7-10 días | 7-10 días | 7-10 días | 7-10 días |
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