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Sondas con marcaje doble

Las sondas con marcaje doble son el tipo de sonda más habitual para la qPCR y a menudo se las denomina sondas de hidrólisis.

Elija sondas de marcaje doble para:

  • Validación de micromatrices
  • Multiplicación de genes diana/pocas muestras
  • Detección de patógenos
  • Multiplexado
  • Cuantificación de la concentración vírica
  • Análisis de la expresión génica.
  • Determinación de copias génicas

Perfecto para validar las atenuaciones siRNA y shRNA MISSION®.

Entre las ventajas del uso de sondas de marcaje doble se cuentan:

  • Simplicidad del diseño para la especificidad de la secuencia
  • Amplia disponibilidad de combinaciones de reportero/extinguidor (quencher)
  • Aumento de la sensibilidad

Añada ácido nucleico bloqueado a su sonda para:

  • Aumentar la estabilidad térmica y la especificidad de la hibridación
  • Mayor precisión en la detección de SNP, la discriminación de alelos y la cuantificación o detección in vitro
  • Diseños de sondas más fáciles y sensibles para secuencias diana problemáticas 

Cómo funcionan las sondas con marcaje doble

Una sonda con marcaje doble es un oligonucleótido monocatenario marcado con dos colorantes diferentes. Un colorante reportero se sitúa en el extremo 5' y una molécula extinguidora (quencher) se sitúa en el extremo 3' La molécula extinguidora inhibe la emisión de fluorescencia natural del reportero mediante transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET). En la siguiente ilustración se muestra el mecanismo. 

Cómo funcionan las sondas con marcaje doble

La polimerasa alarga el cebador y la sonda se une a la plantilla específica de ADN. La hidrólisis libera el reportero del híbrido sonda/diana, lo que provoca un aumento de la fluorescencia. La señal de fluorescencia medida es directamente proporcional a la cantidad de ADN diana.

Las características del producto son:

  • Cantidades: 1, 3, 5 y 10 DO
  • Purificación: HPLC
  • Longitudes de las secuencias de 15 a 40 bases
  • Control de calidad: espectrometría de masas 100 %
  • Formato: Se suministra seco en tubos ámbar
  • Formatos personalizados a su disposición (normalización, placas especiales, etc.)

Nuestras sondas se proporcionan en un formato que simplifica su planificación experimental.

Producción garantizada

Producción de
DO garantizada
Número aprox.
de  nmoles
Número aprox.
de µg
Número aprox.
de reacciones*
1432800
312962 400
5201604 000
10403208 000
*La estimación está basada en 4 nmoles o 32 µg para 1 DO y 200 nM en 25 µl de reacción (5,0 pmol/reacción). La estimación está basada en una longitud promedio de secuencia de 25 bases.

Tabla de propiedades espectrales

ColoranteMáx.
EX (nm)
Máx.
EM (nm)
Quencher
compatible
6-FAM™495520BHQ™-1, TAMRA™
JOE™529555BHQ™-1, TAMRA™
TET™521536BHQ™-1, TAMRA™
Cal Fluor® Gold 5401522544BHQ™-1
HEX™2535556BHQ™-1, TAMRA™
Cal Fluor® Orange 5602 538
559BHQ™-1
TAMRA™557583BHQ™-2
Cianina 3549566BHQ™-2
Quasar®5703548566BHQ™-2
Cal Fluor® Red 5904569591BHQ™-2
ROX™586610BHQ™-2
TxRd (Sulforhodamine 101-X)597616BHQ™-2
Cianina 5646669BHQ™-3
Quasar® 6705647670BHQ™-3
Cianina 5,5675694BHQ™-3

1Alternativa JOE/TET
2Alternativa VIC®
3Alternativa Cianina 3
4Alternativa TAMRA™
5Alternativa Cianina 5

Calendario de envío

Cantidad (DO)13510
Sondas con marcaje doble con colorantes estándar3-5 días3-5 días3-5 días3-5 días
Sondas de ácido nucleico bloqueadas con marcaje doble con colorantes estándar7 días7 días7 días7 días
Sondas con marcaje doble con colorantes post-síntesis,
con/sin ácido nucleico bloqueado
7-10 días7-10 días7-10 días7-10 días
* Los tiempos de entrega pueden ser más largos debido al tránsito internacional, retrasos en el despacho de aduanas, etc. Los proyectos grandes se colocarán en un calendario de entrega basado en las necesidades del proyecto.
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