T8658

Trypsin Protease

Cleaves C-terminal of lysine and arginine residues, Suitable for Mass Spectrometry, from bovine pancreas

• Sinónimos: Porcine Trypsin, Trypsin for Mass Spectropetry
• Número CAS: 9002-07-7
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.56
• EC Number: 232-650-8
• MDL number: MFCD00082094
• Número CE: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)

Propiedades

• Nombre del producto: Tripsina from bovine pancreas, suitable for protein sequencing, lyophilized powder
• grade: Proteomics Grade
• Quality Segment: 200
• form: lyophilized powder
• mol wt: 23.8 kDa
• packaging: vial of 100 μg
• solubility: hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
• suitability: suitable for protein sequencing
• storage temp.: −20°C

Descripción

Application

Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.

• Trypsin from bovine pancreas has been used for in-gel digestion for MS (mass spectrometry) analysis.[1]
• It has been used for the digestion of albumin for size-exclusion chromatography.[2]
• It has been used for the digestion of HDL (high density lipoprotein) for LC-MS (liquid chromatography-mass spectrometry) analysis.[3]
• It has been used for limited proteolysis of IST1 (putative MAPK-activating protein PM28).

Biochem/physiol Actions

La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.

Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.

Preparation Note

This product is from pancreas sourced from New Zealand. It is soluble in 1 mM HCl at 1 mg/mL.

Other Notes

Una unidad BAEE producirá un A₂₅₃ de 0,001 por minuto a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato.

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Disclaimer

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca²⁺ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Información de seguridad

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• ppe: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves