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Merck

DUO92101

Sigma-Aldrich

Duolink® Kit iniciador rojo in situ ratón o conejo

Sinónimos:

in situ Proximity Ligation Assay, Protein Protein Interaction Assay

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About This Item

UNSPSC Code:
41116158
NACRES:
NA.32
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product line

Duolink®

Quality Level

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®; Zeiss Filter set 31)

suitability

suitable for fluorescence

storage temp.

−20°C

Application

El ensayo de ligadura de proximidad (PLA®) Duolink® permite la detección endógena de interacciones proteicas, modificaciones postraduccionales y niveles de expresión de proteínas al nivel de molécula única en células y muestras de tejido fijas.

Siga el protocolo de fluorescencia in situ Duolink® para usar este producto También se dispone de un conjunto de instrucciones cortas.

Visite nuestro Centro de recursos de PLA Duolink® si desea información sobre cómo realizar un experimento Duolink®, las aplicaciones, la resolución de problemas y más.

Para realizar un experimento de PLA Duolink® in situ, necesitará dos anticuerpos primarios (validados para PLA, IHC, ICC o IF) que reconozcan dos epítopos específicos. Este kit iniciador suministra el resto de reactivos necesarios para 30 reacciones de PLA Duolink®, lo que incluye un par de sondas para PLA (anti-conejo PLUS y anti-ratón MINUS), reactivos de detección rojos, disoluciones tampón rojos y medio de montaje. Nótese que los anticuerpos primarios deben proceder de las mismas especies que las sondas para PLA Duolink®. El análisis se lleva a cabo utilizando un equipo de inmunofluorescencia estándar.

Especificidad
El kit iniciador rojo in situ Duolink® ratón/conejo requiere un anticuerpo primario de ratón y un anticuerpo primario de conejo. A menudo se utilizan reactivos de detección de fluorescencia roja con el filtro Texas Red®.

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios producidos en especies diferentes. Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonal o policlonal) en inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) convencionales para determinar las condiciones de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos Duolink® PLA in situ son adecuados para su utilización de células fijadas, células de cytospin, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formalina, incluidas en parafina (FFPE) o tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Cliente para acelerar sus proyectos Duolink®.

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Especificidad
El kit iniciador rojo in situ Duolink® ratón/conejo requiere un anticuerpo primario de ratón y un anticuerpo primario de conejo. Los reactivos de detección de fluorescencia roja suelen utilizarse con el filtro Texas Red® .

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios inducidos en diferentes especie Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonales o policlonales) en una prueba convencional de inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) para determinar las condiciones óptimas de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos para PLA Duolink® in situ son adecuados para su utilización en células fijadas, células de citoespín, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formol o incluidas en parafina (FFPE) o en tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

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El kit iniciador rojo in situ Duolink® se ha utilizado en los análisis de ligadura de proximidad.[1][2]

Features and Benefits

  • No se requiere sobreexpresión ni manipulación genética
  • Elevada especificidad (menos falsos positivos)
  • Sensibilidad de molécula única debido a amplificación por círculo rodante
  • Posible cuantificación relativa
  • No se precisa un equipo especial
  • Más rápida y sencilla que la FRET
  • Mayor precisión en comparación con la co-IP
  • Resultados listos para publicación

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

Los componentes del kit también están disponibles por separado

Referencia del producto
Descripción
SDS

  • DUO92002Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)SDS

  • DUO92004Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)SDS

  • DUO92008Duolink® In Situ Detection Reagents RedSDS

  • DUO82049Duolink® In Situ Wash Buffers, FluorescenceSDS

  • DUO82040Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPISDS

signalword

Danger

Hazard Classifications

Aquatic Chronic 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

Storage Class

8A - Combustible corrosive hazardous materials


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Certificados de análisis (COA)

Lot/Batch Number

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Targeting CPT1A-mediated fatty acid oxidation sensitizes nasopharyngeal carcinoma to radiation therapy.
Tan Z, et al.
Theranostics, 8(9), 2329-2329 (2018)
JNK associated leucine zipper protein functions as a docking platform for Polo like kinase 1 and regulation of the associating transcription factor Forkhead box protein K1.
Ramkumar P, et al.
The Journal of Biological Chemistry (2015)
New protein?protein interactions of mitochondrial connexin 43 in mouse heart.
Denuc A, et al.
Journal of Cellular and Molecular Medicine, 20(5), 794-803 (2016)
Ivan Duran et al.
Human molecular genetics, 24(7), 1918-1928 (2014-12-17)
Osteogenesis imperfecta (OI) is a genetic disorder that results in low bone mineral density and brittle bones. Most cases result from dominant mutations in the type I procollagen genes, but mutations in a growing number of genes have been identified
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately

Artículos

Conozca cómo funciona la tecnología de análisis de ligadura de proximidad y cómo el kit de control de interacción proteína-proteína puede confirmar la detección in situ de la dimerización EGFR-HER2 inducida por EGF.

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Duolink® proximity ligation assay used to study neuron interactions furthering neuroscience research.

Protocolos

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

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Questions

1–6 of 6 Questions  
  1. Does this kit contain antibody diluent and blocking solution? Or do you have to buy them separately?

    1 answer
    1. The kit contains antibody 1X diluent and 1X blocking solution, which can be found in the component DUO92002 and DUO92004.

      Helpful?

  2. Hello, Is this kit also suitable for flow cytometry-based analysis of the data?

    1 answer
    1. This kit is NOT suitable for flow cytometry. Please see our Duolink® flowPLA Mouse/Rabbit Starter Kits for flow cytometry: DUO94102 (Green), DUO94104 (Far Red), & DUO94105 (Violet).

      Helpful?

  3. Can the Duolink kits be used with a Mouse IgM antibody?

    1 answer
    1. Duolink kits may be compatible with a Mouse IgM antibody, provided that the antibody contains the light chain. The Anti-Mouse MINUS probe specifically interacts with mouse IgG (H+L) and the light chains associated with IgM. Therefore, if the Mouse IgM antibody includes the light chain, it should be suitable for use with the Duolink kits.

      Helpful?

  4. How many reactions can be done with this kit?

    1 answer
    1. The Duolink™ starter kit contains all the components necessary to analyze up to 30 reactions in one single order. Please see the link below to review the full protocol:
      https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/protocol/protein-biology/protein-and-nucleic-acid-interactions/duolink-fluorescence-user-manual#DuolinkPLAFluorescenceProtocol

      Helpful?

  5. I want to study the interaction of two cell surface proteins using PLA kit . My primaries are mouse and rabbit. Does the kit have the two secondary and also all the components that i would require to carry out the assay. Can you advice?

    1 answer
    1. The Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit - DUO92101 contains the Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG, and Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L) secondary antibodies and everything needed to conduct the PLA assay.

      Helpful?

  6. What is the expiry date of the kit contents?

    1 answer
    1. This product is not assigned an expiration date or recommended retest date. Products with no expiration date or recommended retest date should be routinely inspected by customers to ensure they perform as expected. These products are also subject to a one-year warranty from the date of shipment.

      For more information, you may access the "Product Dating Information" document under "ADDITIONAL USEFUL DOCUMENTS ABOUT OUR PRODUCTS" at the bottom of the Quality Services page with this link: https://www.sigmaaldrich.com/life-science/quality-and-regulatory-management/quality-services.

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