HPPIKRO

Kit de aislamiento de plásmidos High Pure

Roche, pkg of 50 purifications (11754777001), pkg of 250 purifications (11754785001)

• UNSPSC Code: 41105500
• NACRES: NA.54

Propiedades

• manufacturer/tradename: Roche
• packaging: pkg of 250 purifications (11754785001), pkg of 50 purifications (11754777001)

Descripción

General description

Aislamiento de rendimiento bajo a medio, a miniescala de plásmidos.

El kit de aislamiento de plásmidos de gran pureza aisla el ADN plasmídico purificado en pequeñas cantidades utilizando el método de lisis alcalina, un método habitual que genera ADN plasmídico muy purificado de E. coli, sin contaminación de ARN.

Los ácidos nucleicos se unen a la superficie de la lana de fibra de vidrio en presencia de una sal caotrópica (HCl de guanidina). Esto permite al tubo de filtración High Pure inmovilizar específicamente los ácidos nucleicos (ADN y ARN) mientras carezcan de contaminantes.

Capacidad: Los tubos de filtro High Pure Spin tienen capacidad para un volumen de muestra de hasta 700 μl.
Muestra: 0,5 - 4,0 ml de cultivo de E. coli (recogido a una densidad de 1,5 - 5,0 A ₆₀₀ unidades/ml)

Application

El kit de aislamiento de plásmidos High Pure permite preparar hasta 15 μg de ADN plasmídico purificado de los cultivos bacterianos, que puede utilizarse directamente en la mayoría de las aplicaciones de biología molecular:

• PCR
• Secuenciación
• Clonación
• Transcripción in vitro
• Digestión con enzimas de restricción
• Marcaje aleatorio de cebadores

Features and Benefits

• Purifica rápidamente hasta 24 muestras de plásmidos en <30 minutos.
• Minimiza la pérdida de ADN utilizando un kit que elimina los contaminantes sin precipitación ni otras etapas de manipulación que pueden degradar el ADN.
• Mejora la fiabilidad y la reproducibilidad en las aplicaciones consecutivas con un kit que elimina el ARN y otras impurezas que hacen que el ADN plasmídico se comporte de una manera impredecible.
• Elimina el uso de compuestos orgánicos peligrosos como el cloruro de cesio, el fenol, el cloroformo y el bromuro de etidio.

Preparation Note

El kit se basa en la lisis alcalina para liberar el ADN plasmídico de las bacterias. La RNasa elimina todo el ARN del lisado. Todos los restos celulares y el ADN genómico atrapado se retiran mediante centrifugación, el sobrenadante restante se mezcla con una sal caotrópica y se aplica a la lana de fibra de vidrio en un tubo de filtración High Pure Spin. En las condiciones de amortiguación utilizadas en el procedimiento, el plásmido se une a la lana de fibra de vidrio, mientras que las sustancias contaminantes (sales, proteínas y otros contaminantes) no se unen. Breves etapas de lavado y centrifugado eliminan fácilmente esos contaminantes. Una vez purificados, los plásmidos pueden eluir fácilmente en un volumen pequeño de tampón bajo en sal o de agua.

Analysis Note

El plásmido pUC19 (4.5 μg) se purifica a partir de una suspensión de 1,5 ml de E. coli JM₈₃, que se cultivó en medio LB con ampicilina durante 16 horas, a una densidad celular de 5 A ₆₀₀ unidades/ml. 1 μg del ADN plasmídico purificado se incuba durante 1 hora a +37°C con 5 unidades de endonucleasa de restricción Eco RI y luego se analiza mediante electroforesis en gel de agarosa. El ADN plasmídico aislado es igual de sensible a la digestión con la endonucleasa de restricción que el ADN plasmídico aislado mediante centrifugación en gradiente de densidad de CsCl.

Other Notes

Tecnología High Pure y kits de adsorción de sílice

• Tampón de suspensión
• RNasa A, polvo seco
• Tampón para lisis
• Tampón de unión
• Tampón de lavado I
• Tampón de lavado II
• Tampón de elución
• Tubos de filtro High Pure Spin, que contienen lana de fibra de vidrio
• Tubos de recogida

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información de seguridad

• signalword: Danger
• wgk: WGK 1
• pictograms: GHS05,GHS07,GHS08
• hcodes: H302 + H332,H314,H334
• pcodes: P261 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Acute Tox. 4 - Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1 Inhalation
• Clase de almacenamiento: 8B - Non-combustible corrosive hazardous materials
• flash_point_f: does not flashNot applicable
• flash_point_c: does not flashNot applicable