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Clostridium histolyticum
sterility
non-sterile
form
lyophilized
collagenase activity
>0.15 U/mg lyophilizate
packaging
pkg of 100 mg (11088858001), pkg of 2.5 g (11088882001), pkg of 500 mg (11088866001)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
technique(s)
tissue processing: suitable
color
light brown
optimum pH
6.0-8.0
solubility
water: soluble
NCBI accession no.
application(s)
cell analysis
foreign activity
Clostripain 0.060 U/mg, Proteases 8 U/mg ( Azocoll), Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
storage temp.
2-8°C
General description
La colagenasa D se prepara a partir de cultivos de Clostridium histolyticum mediante filtración, precipitación de sulfato de amonio, diálisis y liofilización.
Application
La colagenasa de C. histolyticum se utiliza ampliamente para la desagregación de muchos tipos de tejidos (por ejemplo, pulmón, corazón, músculo, hueso, tejido adiposo, hígado, riñón, cartílago, glándula mamaria, placenta, vasos sanguíneos, cerebro, tumores) y para la preparación de suspensiones de células individuales para el establecimiento de sistemas de cultivo celular primario. Se recomienda la colagenasa D cuando son importantes la funcionalidad y la integridad de las proteínas de superficie celular.
La colagenasa de Clostridium de Roche se ha utilizado para preparar células de muchos tipos de tejido, como hepatocitos, adipocitos, islotes pancreáticos, células epiteliales, células musculares, células endoteliales, etc. Sin embargo, debe determinarse empíricamente la idoneidad de cada lote de la enzima para la ruptura de un tejido concreto.
La colagenasa de Clostridium de Roche se ha utilizado para preparar células de muchos tipos de tejido, como hepatocitos, adipocitos, islotes pancreáticos, células epiteliales, células musculares, células endoteliales, etc. Sin embargo, debe determinarse empíricamente la idoneidad de cada lote de la enzima para la ruptura de un tejido concreto.
Biochem/physiol Actions
La colagenasa degrada el colágeno nativo. La clostripaína, las enzimas tripsinoides y las proteasas neutras degradan también otras proteínas.
Features and Benefits
Contenido
Liofilizada, no estéril
Liofilizada, no estéril
Physical form
Liofilizada, no estéril.
Preparation Note
Activador: Ca2+
Concentración de trabajo: 0,5 – 2,5mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25°C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25°C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.
Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
La colagenasa no es inhibida por el suero.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de la tripsina (clara de huevo, soja)
Actividad enzimática:
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa D tiene una actividad colagenasa de normal a elevada y una baja actividad tríptica (normalmente <0,2 unidades/mg, BAEE como sustrato).
Concentración de trabajo: 0,5 – 2,5mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25°C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25°C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.
Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
La colagenasa no es inhibida por el suero.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de la tripsina (clara de huevo, soja)
Actividad enzimática:
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa D tiene una actividad colagenasa de normal a elevada y una baja actividad tríptica (normalmente <0,2 unidades/mg, BAEE como sustrato).
Manténgalo alejado de la luz.
Reconstitución en cualquier disolución salina equilibrada (por ejemplo, HBSS)
Other Notes
La colagenasa de Roche se valora en unidades Wünsch (1 μmol de producto formado por minuto a +25 °C con sustrato Wünsch).
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μl de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μl de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.
signalword
Danger
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Clase de almacenamiento
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
hcodes
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