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Acerca de este artículo
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Clone:
polyclonal
Species reactivity:
eukaryotes
Application:
IHC
Citations:
13
Servicio técnico
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Permítanos ayudarlebiological source
rabbit
Quality Segment
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
species reactivity
eukaryotes
manufacturer/tradename
Chemicon®
technique(s)
immunohistochemistry: suitable
shipped in
wet ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... GSS(2937)
Immunogen
Epítopo: detecta ambos GSH y GSSG
Glutatión-glutaraldehído
Application
Categoría de investigación
Neurociencia
Neurociencia
Este anticuerpo anti-glutatión detecta GSH y GSSG; está validado para utilizar en IH para la detección de glutatión.
Inmunohistoquímica utilizando métodos de inmunoro intensificado con plata o fluorescencia mejorada. Suele ser necesario tratamiento con reductores autofluorescentes cuando se utilizan fijadores de glutaraldehído. Las muestras deben fijarse con glutaraldehído al 0,2 % - 2,5 % para una detección óptima. Véanse las notas técnicas. Este anticuerpo también se ha utilizado, y se ha encontrado que funciona, con una fijación con glutaraldehído de cero a baja o paraformaldehído elevada (paraformaldehído al 4 % en tampón fosfato 0,1 M / fijador de sacarosa al 3 %). La concentración mínima de glutaraldehído para AB5010 es del 0,02 %. El rendimiento es bueno con cortes congelados, cortes obtenidos con un vibratomo y formatos de cultivo tisular, cuando se utilizan reactivos penetrantes como Triton X-100 al 0,3 % (sólo en tampón de bloqueo, el tampón de dilución de anticuerpos debe estar en TBS simple o PBS solamente).
Inmunoelectrotransferencia (Western blot) (Mawatari y Murakami, 2004).
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
Nota: El glutatión no es tolerante al osmio y, por lo tanto, no debe utilizarse para inmunohistoquímica con microscopio electrónico después de la inclusión.
Todos los procedimientos pueden realizarse a temperatura ambiente. Aunque no pueden predecirse las diluciones exactas para todas las aplicaciones, es poco probable que sean necesarias desviaciones de la concentración calibrada. La dilución X100 se calibra para optimizar la detección de los niveles de antígeno en un rango de 2 unidades logarítmicas. Se pueden emplear diluciones mayores o menores si se prevén concentraciones inusualmente elevadas (>20 mM) o bajas (<0,2 mM) de hapteno intracelular, o si existen nuevas condiciones en las muestras, como niveles bajos de glutaraldehído o protocolos de inclusión inusuales. Diluciones mayores probablemente darán como resultado una disminución de la intensidad máxima de la señal, mientras que las disoluciones más concentradas estrecharán el rango dinámico de detección.
NOTAS TÉCNICAS
El AB5010 está optimizado para utilizar con detección mediante inmunoro o fluorescencia. Se puede utilizar la visualización con métodos ligados a enzimas, pero normalmente estrechan el rango dinámico de detección. El uso de métodos de alta ganancia, como las tiramidas, requerirá que el usuario realice calibraciones independientes. Es posible su utilización con cortes congelados, pero no producirá imágenes óptimas, ya que las IgG penetrarán mal el tejido reticulado de aldehído y la mayoría de los aminoácidos están presentes a concentraciones tan elevadas que se produce el efecto prozona. No se recomienda su uso en montajes completos o cortes con vibratomo por razones similares.
Inmunoelectrotransferencia (Western blot) (Mawatari y Murakami, 2004).
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
Nota: El glutatión no es tolerante al osmio y, por lo tanto, no debe utilizarse para inmunohistoquímica con microscopio electrónico después de la inclusión.
Todos los procedimientos pueden realizarse a temperatura ambiente. Aunque no pueden predecirse las diluciones exactas para todas las aplicaciones, es poco probable que sean necesarias desviaciones de la concentración calibrada. La dilución X100 se calibra para optimizar la detección de los niveles de antígeno en un rango de 2 unidades logarítmicas. Se pueden emplear diluciones mayores o menores si se prevén concentraciones inusualmente elevadas (>20 mM) o bajas (<0,2 mM) de hapteno intracelular, o si existen nuevas condiciones en las muestras, como niveles bajos de glutaraldehído o protocolos de inclusión inusuales. Diluciones mayores probablemente darán como resultado una disminución de la intensidad máxima de la señal, mientras que las disoluciones más concentradas estrecharán el rango dinámico de detección.
NOTAS TÉCNICAS
El AB5010 está optimizado para utilizar con detección mediante inmunoro o fluorescencia. Se puede utilizar la visualización con métodos ligados a enzimas, pero normalmente estrechan el rango dinámico de detección. El uso de métodos de alta ganancia, como las tiramidas, requerirá que el usuario realice calibraciones independientes. Es posible su utilización con cortes congelados, pero no producirá imágenes óptimas, ya que las IgG penetrarán mal el tejido reticulado de aldehído y la mayoría de los aminoácidos están presentes a concentraciones tan elevadas que se produce el efecto prozona. No se recomienda su uso en montajes completos o cortes con vibratomo por razones similares.
Subcategoría de investigación
Estrés oxidativo
Estrés oxidativo
Biochem/physiol Actions
Glutatión. El anticuerpo se ha calibrado contra un espectro de antígenos para garantizar la selectividad del hapteno y la afinidad adecuada. Sin reactividad cruzada medible del tejido fijado con glutaraldehído (<1:1000) contra L-alanina, g-aminobutirato, 1-amino-4-guanidobutano (AGB), D/L-arginina, D/L-aspartato, L-citrulina, L-cisteína, D/L-glutamato, D/L-glutamina, glicina, L-lisina, L-ornitina, L-serina, taurina, L-treonina, L-triptófano, L-tirosina. No discrimina entre GSH y GSSG libres.
Packaging
suficiente para 2000 análisis
Physical form
Fracción de IgG en tampón fosfato 0,1 M estéril. Sin conservantes
Presentación: Purificada
Preparation Note
Mantener la reserva a 2-8°C en alícuotas sin diluir durante un máximo de 6 meses. Esta disolución de reserva es extremadamente estable en condiciones de uso normales y conservación habitual a 2-8°C. No vuelva a congelar esta disolución de reserva.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
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