17-622
ChiPAb+ trimetil-histona H3 (Lys27): Conjunto de anticuerpo y cebador validado para CHIP
from rabbit, purified by using Protein A
Sinónimos:
Chip Antibody and primer set, H3K27me3 ChIP, H3K27me3, Histone H3 (tri methyl K27), Histone H3K27me3, Histone H3K27me3 ChIP
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Acerca de este artículo
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.32
eCl@ss:
32160702
Clone:
polyclonal
Species reactivity:
human, mouse
Application:
ChIP, WB
Citations:
196
Servicio técnico
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Permítanos ayudarlebiological source
rabbit
Quality Segment
clone
polyclonal
purified by
using Protein A
species reactivity
human, mouse
manufacturer/tradename
ChIPAb+, Upstate®
technique(s)
ChIP: suitable, western blot: suitable
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
dry ice
Gene Information
human ... H3F3B(3021)
General description
17 kDa
La metilación de las histonas puede ocurrir en dos residuos diferentes: arginina o lisina. La metilación de la histona puede estar asociada con la activación o la represión de la transcripción, dependiendo del residuo metilado. La lisina 27 de la histona H3 puede estar mono, di o trimetilada (histona H3 monometil Lys27, histona H3 dimetil Lys27 o histona H3 trimetil Lys27) por diferentes histona metiltransferasas como la EZH2 o la NSD3. La metilación de este residuo se asocia principalmente con la represión de la transcripción.
Todos los anticuerpos ChiPAb+ se validan individualmente para precipitación de la cromatina, en cada lote
en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en el contexto de su cromatina.
Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP. El conjunto de ChiPAb+ trimetil-histona H3 (Lys27) incluye el anticuerpo anti-trimetil-histona H3 (Lys27), un anticuerpo de control negativo (IgG de conejo purificada) y cebadores para qPCR que amplifican una región de 139 pb del satélite alfa humano. Los anticuerpos anti-trimetil-histona H3 (Lys27) y controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la trimetil-histona H3 (Lys27).
en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en el contexto de su cromatina.
Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP. El conjunto de ChiPAb+ trimetil-histona H3 (Lys27) incluye el anticuerpo anti-trimetil-histona H3 (Lys27), un anticuerpo de control negativo (IgG de conejo purificada) y cebadores para qPCR que amplifican una región de 139 pb del satélite alfa humano. Los anticuerpos anti-trimetil-histona H3 (Lys27) y controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la trimetil-histona H3 (Lys27).
Immunogen
Epítopo: Trimetil Lys27
Péptido sintético 2X-ramificado, conjugado con KLH que contiene la secuencia ...AR(me3K)SAP... en la que me3K corresponde a la trimetil-lisina en el resto 27 de la histona H3 humana.
Application
Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear
Epigenética y función nuclear
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo anti-trimetilhistona H3 (Lys27) purificado o IgG de conejo normal y el kit Magna ChIP
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP
Análisis mediante Western Blot:
La histona H3 recombinante (carril 2) y los extractos ácidos de las células HeLa (carril 1) se resolvieron por electroforesis, se transfirieron a nitrocelulosa y se probaron con una dilución 1:5000 de anti-trimetil histona H3 Lys27 (0,4 μg/ml).
Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de cabra anti- conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (consulte las figuras).
La cromatina tratada con ultrasonidos a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo anti-trimetilhistona H3 (Lys27) purificado o IgG de conejo normal y el kit Magna ChIP
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP
Análisis mediante Western Blot:
La histona H3 recombinante (carril 2) y los extractos ácidos de las células HeLa (carril 1) se resolvieron por electroforesis, se transfirieron a nitrocelulosa y se probaron con una dilución 1:5000 de anti-trimetil histona H3 Lys27 (0,4 μg/ml).
Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de cabra anti- conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (consulte las figuras).
Juego de anticuerpos y cebadores validados para ChIP de trimetil-histona H3 (Lys27), que incluye el anticuerpo de calidad ChIP y cebadores de PCR de control específicos utilizados para la inmunoprecipitación de cromatina de H3K27Me3.
Subcategoría de investigación
Histonas
Histonas
Biochem/physiol Actions
Se prevé amplia reactividad cruzada entre especies.
trimetil-histona H3 (Lys27).
Packaging
25 ensayos por kit, ~4μl por inmunoprecipitación de la cromatina.
Physical form
Anti-trimetil-histona H3 (Lys27) (IgG policlonal de conejo). Un vial que contiene 100 μg de IgG purificada en proteína A en tampón de 100 μl que contiene Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 0,15 M con azida sódica al 0,05 %. Líquido a -20°C.
IgG normal de conejo. Un vial que contiene 125 μg de IgG purificada de conejo en 125 μl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,1 %. Almacenar a -20°C.
Cebadores para CHIP de satélite alfa humano. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
IgG normal de conejo. Un vial que contiene 125 μg de IgG purificada de conejo en 125 μl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,1 %. Almacenar a -20°C.
Cebadores para CHIP de satélite alfa humano. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
Preparation Note
1 año a -20°C desde la fecha de envío.
Analysis Note
Control
1 vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
INV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
1 vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador de control específico para el satélite alfa humano. Conservar a -20°C.
DIR: CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
INV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina preparada a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo purificado o IgG normal de conejo y el kit Magna ChIP® A (Nº de ref. 17-610). El enriquecimiento satisfactorio de fragmentos de ADN asociados a la trimetil-histona H3
(Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores para ChIP del satélite alfa humano (consulte las figuras).
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP
La cromatina preparada a partir de 2x106 células HeLa se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μg de anticuerpo purificado o IgG normal de conejo y el kit Magna ChIP® A (Nº de ref. 17-610). El enriquecimiento satisfactorio de fragmentos de ADN asociados a la trimetil-histona H3
(Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores para ChIP del satélite alfa humano (consulte las figuras).
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP
Other Notes
Anti-trimetil histona H3(Lys27) policlonal, 1 vial
Suero policlonal de conejo de control, 1 vial
Conjunto de cebadores del satélite alfa humano, 1 vial
Suero policlonal de conejo de control, 1 vial
Conjunto de cebadores del satélite alfa humano, 1 vial
Legal Information
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.
Clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
Punto de inflamación (°F)
Not applicable
Punto de inflamación (°C)
Not applicable
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