This product is a partially purified, heterogeneous lyticase preparation derived from Arthrobacter luteus. It is not a defined enzyme cocktail, but rather an enzyme mixture containing lyticase activity. The molecular weight of Lyticase is not determined.
L2524
Lyticase from Arthrobacter luteus
lyophilized powder, ≥2,000 units/mg protein, Protein ≥20 % by biuret
Synonyme(s) :
Enzyme de lyse, Lyticase bactérienne
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| Taille/Référence | Disponibilité | Prix |
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A propos de cet article
Specific activity:
≥2,000 units/mg protein
Biological source:
bacterial (Arthrobacter luteus)
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bacterial (Arthrobacter luteus)
Quality Segment
form
lyophilized powder
specific activity
≥2,000 units/mg protein
composition
Protein, ≥20% biuret
technique(s)
cell based assay: suitable
input
plant, fungi and insect sample(s)
suitability
suitable for cell lysis
application(s)
diagnostic assay manufacturing
storage temp.
−20°C
Application
La lyticase issue d'Arthrobacter luteus a servi à lyser la paroi cellulaire de champignons afin d'en isoler l'ADN.
La lyticase issue d'Arthrobacter luteus a été utilisée :
- pour retirer la paroi de cellules et les transformer en sphéroplastes.
- comme constituant d'une solution de digestion pour incuber des cellules de levure et digérer leurs parois.
- dans l'hydrolyse enzymatique d'un précipité de mycélium pour préparer des protoplastes.
Biochem/physiol Actions
Les cellules de levure sont difficiles à altérer car leur paroi peut former des spores résistantes ou des capsules. L'ADN peut être extrait des levures à l'aide d'enzymes de lyse comme la lyticase pour induire la formation de sphéroplastes partiels. Ces sphéroplastes sont ensuite lysés pour libérer l'ADN. La lyticase est la solution privilégiée pour digérer la paroi cellulaire des levures et générer des sphéroplastes à partir des champignons en vue de leur transformation. Elle présente des activités β-(1→3)-glucane laminaripentaohydrolase, β-(1→3)-glucanase, protéase et mannanase. La lyticase est employée avec les cellules de levures appartenant notamment aux genres Candida, Debaryomyces, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Eremothecium et Schwanniomyces.
La lyticase est une enzyme fréquemment utilisée dans la recherche sur les champignons, en particulier pour identifier les espèces par des techniques basées sur l'amplification en chaîne par polymérase (PCR). Elle a la capacité de casser les liaisons β (1→3) et β (1→4) entre les motifs de glucose. Le lysozyme sert d'indicateur de la réponse de l'hôte médiée par les macrophages, est corrélé à la mort des globules blancs et présente un fort taux de rotation. Des taux élevés de lysozyme sérique ont été observés dans différentes pathologies inflammatoires chroniques, dans la maladie inflammatoire chronique de l'intestin, ainsi que dans des troubles hématologiques et rénaux. Le lysozyme de type c issu de blanc d'œuf de poule est couramment employé comme modèle pour étudier la structure et la fonction des protéines. La muramidase présente essentiellement une activité bactéricide contre les bactéries à Gram positif. La méthode décrite dans le bulletin pour déterminer les masses moléculaires par chromatographie par filtration sur gel est une version modifiée des techniques existantes figurant dans la littérature. Les étalons protéiques inclus dans ce kit peuvent être compatibles avec d'autres systèmes chromatographiques comme la chromatographie liquide haute performance (HPLC). Cependant, certains systèmes tampons sont susceptibles d'affecter les volumes d'élution de l'albumine et de l'anhydrase carbonique. Les protéines de ce kit ont une masse moléculaire de 29 kDa 699 kDa.
La lyticase hydrolyse le poly-β(1→3)-glucose, notamment le glucane de la paroi cellulaire des levures.
Physical form
Poudre lyophilisée partiellement purifiée contenant des sels de tampon phosphate et des stabilisants
Other Notes
Pour en savoir plus sur les enzymes utilisées dans l′analyse des glucides complexes, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
Produit réservé aux activités de recherche et développement. Non destiné à l'usage dans des médicaments, produits de ménage ou à d'autres fins. Se reporter à la fiche de données de sécurité pour des informations concernant les risques et pratiques de manipulation sans danger.
Une unité produit une ΔA800 de 0,001 par minute à pH 7,5 et 25 °C, en utilisant comme substrat une suspension de levure dans un mélange réactionnel de 3 ml.
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Cet article | |||
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| description lyophilized powder, ≥2,000 units/mg protein, Protein ≥20 % by biuret | description lyophilized powder, ≥200 units/mg solid | description free of DNA contaminants, suitable for Microbiome research, ≥2000 units/mg protein, lyophilized powder | description powder, ≥400 units/mg protein (Lowry) |
| technique(s) cell based assay: suitable | technique(s) cell based assay: suitable | technique(s) cell based assay: suitable | technique(s) - |
| biological source bacterial (Arthrobacter luteus) | biological source bacterial (Arthrobacter luteus) | biological source bacterial (Arthrobacter luteus) | biological source Bacillus sp. |
| specific activity ≥2,000 units/mg protein | specific activity ≥200 units/mg solid | specific activity ≥2000 units/mg protein | specific activity ≥400 units/mg protein (Lowry) |
| form lyophilized powder | form lyophilized powder | form lyophilized powder | form powder |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - |
| suitability suitable for cell lysis | suitability suitable for cell lysis | suitability suitable for cell lysis | suitability - |
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11 - Combustible Solids
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Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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Hi, is this an enzyme cocktail or is just liticase? Do u already determined the molecular weight/s of this product? If it is heterogeneusly produced, you should have the aa seq and MW could be calculated, right?
1 answer-
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Is this lyticase lyophilised powder(4.1 mg) (L2524) soluble in water. Because upon adding sterile nuclease free water(1 ml), i still can see some remains floating. what can i do? and what will be stability?
1 answer-
This product can be reconstituted in cold deionized water to about 500 units per mL. Activity may decline quickly; use a freshly prepared solution. Do not store stock solutions. A 10× stock is described (1 µg/µL) with lyticase, buffer pH 7.5, NaCl, glycerol, and water stored at –20 °C, but stability in this product at –20 °C has not been validated. If particulates remain after reconstitution, mix thoroughly. Prepare a fresh solution before use.
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Do you have any data on amount of endotoxins?
1 answer-
Unfortunately, this product has not been tested for the presence of endotoxin.
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How many milligrams is 10,000 units of Product L2524 Lyticase from Arthrobacter luteus?
1 answer-
The milligram quantity of this product will vary from lot to lot. The vial content is dependent upon the protein content and enzymatic activity. The minimum protein content will be 20% and the minimum activity will be 2000 units per milligram of protein. As an example, a batch that reports a protein content of 20% and an activity of 5000 units per milligram protein will have a vial content of 2 mg for the 10,000 unit package size. The protein content and activity are reported in the product Certificate of Analysis. Please see the link below to review a sample or lot specific Certificate:
https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/l2524#product-documentationHelpful?
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Is it purified downstream by affinity chromatography or is it just an ammonium sulfate precipitate?
1 answer-
This product is purified by conventional chromatography following the initial ammonium sulfate precipitation process.
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What is the molecular weight of this product?
1 answer-
The molecular weight of Lyticase has not been determined.
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What is the recommended working concentration of L2524, if a typical 10mg/ml concentration of L1412 is used?
1 answer-
There have been no tests conducted for product L2524 application on the fungus Aspergillus fumigatus. However, according to a citation in Vet Pathol, 2U/100 ul of fungal extraction has shown good results. The citation is titled "Panfungal Polymerase Chain Reaction for Identification of Fungal Pathogens in Formalin-Fixed Animal Tissues" and was published in July 2017. The DOI is 10.1177/0300985817698207, and the PMID is 28346123
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What is the molecular weight of this product?
1 answer-
The molecular weight of Lyticase is not determined.
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I see it is suggested to reconstitute Lyticase fresh. However, if that is not possible, can you store reconstituted Lyticase, L2524, at -20C? If so, for how long?
1 answer-
The solution stability of this product has not been determined. However, according to Cold Spring Harbor Protocols, lyticase may be stored up to 6 months at 4 deg. C when prepared in 10 mM Tris-CL containing 20% glycerol. This has not been validated. See the link below to this citation:
https://cshprotocols.cshlp.org/content/2017/2/pdb.rec090381.full?rss=1Helpful?
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How can I store Product L2524, Lyticase, once reconstituted?
1 answer-
When lyticase is reconstituted and stored, it may be stable for no more than 4-6 hours before serious loss of activity is observed. It is suggested that fresh solutions be prepared for use.
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