TAQ-RO

Taq ADN polymérase, 5 U/μl

optimum pH ~9.0 (20 °C), optimum reaction temp. 72 °C

• Synonyme(s) : allongement d'amorce, amplification d'adn, pcr, polymérase, pcr, allongement d'amorce, amplification d'ADN
• Numéro de classification (Commission des enzymes): 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Code UNSPSC : 41106300

Propriétés

• Source biologique: bacterial (Thermus aquaticus)
• Niveau de qualité: 100
• Produit recombinant: expressed in E. coli
• Qualité: Molecular Biology
• Forme: liquid
• Utilisation: sufficient for ≤1,000 reactions (11146173001); sufficient for ≤10,000 reactions (11435094001); sufficient for ≤2,000 reactions (11418432001); sufficient for ≤5,000 reactions (11596594001); sufficient for ≤200 reactions (11146165001)
• Activité spécifique: 5 U/μL
• Poids mol.: 95 kDa
• Conditionnement: pkg of 1,000 U (11418432001 [4 x 250 U]); pkg of 2,500 U (11596594001 [10 x 250 U]); pkg of 5,000 U (11435094001 [20 x 250 U]); pkg of 100 U (11146165001); pkg of 500 U (11146173001 [1 x 500 U])
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Paramètres: 72 °C optimum reaction temp.
• Technique(s): DNA sequencing: suitable; PCR: suitable
• Couleur: colorless
• pH optimal: ~9.0 (20 °C)
• Solubilité: water: miscible
• Adéquation: suitable for molecular biology
• Numéro d'accès NCBI: AAA27507
• Numéro d'accès UniProt: P19821
• Application(s): genomic analysis; life science and biopharma
• Activité étrangère: Nicking activity 30 units, none detected; Ribonuclease 30 units, none detected; Unspecific endonucleases 30 units, none detected
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

L'ADN Taq polymérase est une ADN polymérase 5′→3′ à haute capacité de traitement dépourvue d'activité exonucléase 3′→5′. Elle est constituée d'une chaîne polypeptidique unique d'un poids moléculaire de 95 kDa environ.
L'ADN Taq polymérase a été isolée à l'origine à partir de l'eubactérie thermophile Thermus aquaticus BM, une souche dépourvue de l'endonucléase de restriction Taq I. L'enzyme a été clonée dans E. coli.

Application

L'ADN Taq polymérase peut être utilisée dans les PCR simples de routine. L'ADN Taq polymérase de Roche Applied Science respecte des critères de pureté et de qualité rigoureux. Cette préparation d'ADN Taq polymérase recombinante peut être appliquée en :

• PCR
• RT-PCR
• qPCR
• D'autres réactions d'élongation d'amorce, comme le séquençage et le marquage

Caractéristiques et avantages

Des résultats fiables et reproductibles :
Une grande uniformité d'un lot à l'autre.
Pas besoin de tester chaque lot :
L'ADN Taq polymérase est testée de manière rigoureuse.
Empêche les contaminations croisées en PCR :
L'incorporation de dUTP associée à l'uracile-ADN glycosylase permet d'éviter les contaminations croisées en PCR.

Conditionnement

1 kit constitué de 2 éléments

Qualité

Les analyses de routine se font avec des amplicons de taille intermédiaire et un taux de GC de 50 %. Cette ADN Taq polymérase ne présente aucune caractéristique de correction ou de démarrage à chaud. Son activité est maximale à +75 °C et pH 9.
Absence d'endonucléase de restriction :
Cette enzyme, isolée à l'origine à partir de T. aquaticus BM, ne présente aucune activité endonucléase de restriction Taq I. Chaque lot est testé par PCR avec de l'ADNλ. Chaque lot est également testé afin de confirmer l'absence d'exonucléases et d'endonucléases, ainsi que l'absence d'activité de coupure conformément aux procédures de contrôle qualité actuellement en vigueur.

Définition de l'unité

Une unité d'ADN Taq polymérase est définie comme la quantité d'enzyme pouvant incorporer 10 nmol de désoxyribonucléosides triphosphates totaux dans de l'ADN précipitable en milieu acide en 60 min à +65 °C dans les conditions d'essai indiquées ci-dessus.

Analyse de l'unité : Tampon d'incubation :
Tris/HCl 67 mM ; pH 8,3/25 °C, MgCl₂ 5 mM, mercaptoéthanol 10 mM, polydocanol 0,2 %, gélatine 0,2 mg/ml, dATP, dGTP et dTTP 0,2 mM chacun, et dCTP 0,1 mM.

Procédure d'incubation :
Incubation de M13mp9ss, de l'amorce M13 (17mer) et de 1 μCi de (α^-32P) dCTP avec des dilutions adaptées d'ADN Taq polymérase dans 50 μl de tampon d'incubation à +65 °C pendant 60 minutes. La quantité de dNTP incorporés est déterminée par précipitation à l'acide trichloracétique.

Activité volumique : 5 U/μl

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

L'utilisation de ce produit est protégée par des revendications de brevets américains et des revendications de brevets équivalentes en dehors des États-Unis. L'achat de ce produit inclut une immunité limitée et non transférable contre les poursuites dans le cadre des revendications des brevets susmentionnés pour l'utilisation de cette seule quantité de produit pour les propres recherches internes de l'acheteur. Aucun droit en vertu d'une autre revendication de brevet, aucun droit d'appliquer un procédé breveté et aucun droit d'assurer des services commerciaux de quelque nature que ce soit, notamment, mais sans caractère limitatif, la communication des résultats des activités de l'acheteur contre rémunération ou toute autre considération commerciale, n'est reconnu expressément, implicitement ou par préclusion. Ce produit est réservé à la recherche. Les utilisations à des fins de diagnostic protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l'octroi d'une autre licence par Roche. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences, contacter le directeur des licences : Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, États-Unis.

Composants de kit seuls

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Informations sur la sécurité

• Mentions de danger: H412
• Conseils de prudence: P273 - P501
• Classification des risques: Aquatic Chronic 3
• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 2
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash