PMEF-N
Fibroblastes embryonnaires primaires de souris EmbryoMax®
Synonyme(s) :
NEO-MEFs, Neo MEF Feeder Cells, Neo Mouse Feeder Cells, Neomycin Restistant PMEFs
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A propos de cet article
UNSPSC Code:
41106509
NACRES:
NA.75
eCl@ss:
32011203
Biological source:
mouse
Service technique
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Laissez-nous vous aiderbiological source
mouse
Quality Segment
manufacturer/tradename
Specialty Media, EmbryoMax®
technique(s)
cell culture | stem cell: suitable
input
sample type induced pluripotent stem cell(s)
sample type primary embryotic fibroblasts (PMEFs)
sample type: mouse embryonic stem cell(s)
shipped in
liquid nitrogen
storage temp.
-140 to -196°C
General description
Avec la gamme EmbryoMax, les chercheurs disposent d'une solution de culture de cellules souches embryonnaires simple et efficace qui leur évite les longues étapes d'isolement et de préparation des cellules nourricières. Bon nombre de protocoles de culture de cellules souches embryonnaires nécessitent l'utilisation de fibroblastes embryonnaires primaires de souris (cellules PMEF). Dans ces protocoles, les cellules souches embryonnaires sont généralement cultivées sur une monocouche de cellules PMEF nourricières. Les cellules nourricières jouent deux rôles clés dans la culture de cellules souches : elles sécrètent plusieurs facteurs de croissance essentiels dans le milieu, contribuant à maintenir la pluripotence, et fournissent une matrice cellulaire pour la croissance des cellules souches embryonnaires.
Les fibroblastes embryonnaires primaires de souris, résistants à la néomycine, souche FVB, sont traités à la mitomycine C et servent de couche nourricière pour les cellules SE/SPi humaines et de souris. Les cellules MEF sont résistantes à la néomycine.
Mise en culture de cellules nourricières MEF
Procédure :
1. Avant de décongeler les cellules nourricières PMEF, enduire des plaques/fioles de solution de gélatine.
2. Décongeler rapidement un ou plusieurs flacons de PMEF dans un bain-marie à 37 °C puis les transférer dans un tube de 15 ml (contenant déjà 10 ml de milieu pour cellules nourricières PMEF tiède). Retourner doucement le tube et le centrifuger à 300 x g pendant 4 à 5 minutes.
3. Retirer le surnageant et remettre en suspension le culot de cellules dans du milieu pour cellules nourricières tiède.
4. Retirer des plaques/fioles la solution de gélatine, et diviser en aliquotes la suspension de cellules nourricières PMEF selon les densités recommandées dans le Tableau 4.1 du guide des protocoles pour cellules SE de souris.
5. Incuber les cellules nourricières PMEF à 37 °C avec 5 % de CO2. Utiliser les Figures 4A, B et C du guide des protocoles pour cellules SE de souris pour estimer la bonne densité et le
bon aspect des PMEF. Les plaques enduites de gélatine peuvent être utilisées pendant 12 à 14 jours.
Mise en culture de cellules nourricières MEF
Procédure :
1. Avant de décongeler les cellules nourricières PMEF, enduire des plaques/fioles de solution de gélatine.
2. Décongeler rapidement un ou plusieurs flacons de PMEF dans un bain-marie à 37 °C puis les transférer dans un tube de 15 ml (contenant déjà 10 ml de milieu pour cellules nourricières PMEF tiède). Retourner doucement le tube et le centrifuger à 300 x g pendant 4 à 5 minutes.
3. Retirer le surnageant et remettre en suspension le culot de cellules dans du milieu pour cellules nourricières tiède.
4. Retirer des plaques/fioles la solution de gélatine, et diviser en aliquotes la suspension de cellules nourricières PMEF selon les densités recommandées dans le Tableau 4.1 du guide des protocoles pour cellules SE de souris.
5. Incuber les cellules nourricières PMEF à 37 °C avec 5 % de CO2. Utiliser les Figures 4A, B et C du guide des protocoles pour cellules SE de souris pour estimer la bonne densité et le
bon aspect des PMEF. Les plaques enduites de gélatine peuvent être utilisées pendant 12 à 14 jours.
Biochem/physiol Actions
Fibroblastes embryonnaires primaires de souris
Packaging
5-6 x 106 chacun
Preparation Note
Après réception, les flacons doivent être conservés à -80 °C. Pour une durée de conservation supérieure à 6 mois, le flacon se conserve pendant 2 ans dans de l'azote liquide en phase gazeuse (s'assurer que le bouchon est hermétiquement fermé).
Legal Information
EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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Classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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does not flash
flash_point_c
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