MABE954

Anticorps anti-phospho ARN Pol II (Ser5), clone 1H4B6

clone 1H4B6, from rat

• Synonyme(s) : DNA-directed RNA polymerase II subunit RPB1, RNA polymerase II subunit B1, DNA-directed RNA polymerase II subunit A, DNA-directed RNA polymerase III largest subunit, RNA-directed RNA polymerase II subunit RPB1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 1H4B6, monoclonal
• Species reactivity: canine, mouse, rat, human, monkey
• Application: ChIP, ELISA, ICC, WB
• Citations: 7

Propriétés

• biological source: rat
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 1H4B6, monoclonal
• species reactivity: canine, mouse, rat, human, monkey
• technique(s): ChIP: suitable (ChIP-seq), ELISA: suitable, immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• NCBI accession no.: NP_000928
• UniProt accession no.: P24928
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pSer5)
• Gene Information: human ... POLR2A(5430)

Description

General description

L'ARN polymérase II (ARNPII, RNAPII ou Pol II) est une enzyme à multiples sous-unités, responsable de la transcription de l'ADN en ARN à partir des gènes codant pour les protéines. L'initiation de la transcription nécessite le recrutement de l'ensemble de la machinerie de transcription au niveau d'un promoteur via une sollicitation par des activateurs et des facteurs de remodelage de la chromatine. L'ARNPII peut coordonner 10 à 14 sous-unités. Ce complexe interagit avec les régions promotrices des gènes et tout un éventail d'éléments et de facteurs de transcription. Le domaine de liaison à l'ADN de la polymérase est constitué d'une rainure où TFIIB oriente l'ADN en vue de son déroulement et de sa transcription. Avec l'approfondissement de l'étude du complexe de transcription de l'ARN polymérase II (ARNpII), de nombreux chercheurs sont intéressés par les immunoblots pour détecter l'ARNPII dans diverses préparations protéiques et fractions de colonne. L'ARNPII des cellules HeLa contient 10 sous-unités, la plus grande possédant un motif répétitif heptapeptidique (PTSPSYS) au niveau du domaine C-terminal (CTD). Durant la transcription, cette grande sous-unité passe alternativement d'une forme non phosphorylée (RNAPIIA) à une forme hyperphosphorylée (RNAPIIO) et vice versa. L'ARNPII s'associe avec le complexe de transcription basal et devient phosphorylée sous sa forme RNAPIIO, avant la synthèse de la première liaison phosphodiester. La chronologie de ces événements suggère que cette phosphorylation pourrait servir de point de régulation, et l'identification des composants du complexe de transcription avec une activité CTD kinase suscite un intérêt considérable.

~217 kDa (poids observé).

Immunogen

Peptide linéaire conjugué à de la KLH correspondant à la protéine ARN Pol II humaine phosphorylée au niveau du résidu Ser5.

Application

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la phospho-ARN Pol II (Ser5) dans 10 µg d'extrait nucléaire de cellules HeLa.

Western Blotting : Un lot représentatif a permis de détecter la phospho-ARN Pol II (Ser5) dans 10 µg de lysat de cellules HeLa (Odawara, J., et al. (2011). BMC Genomics. 12:516.).

Analyse par immunoprécipitation de la chromatine : Un lot représentatif d'un laboratoire indépendant a permis d'immunoprécipiter la phospho-ARN Pol II (Ser5) dans du lysat de cellules HeLa (Odawara, J., et al. (2011). BMC Genomics. 12:516.; Maehara, K., et al. (2013). Nucleic Acids Res. 41(1):54-62.).

Analyse par immunoprécipitation de la chromatine : Un lot représentatif d'un laboratoire indépendant a permis d'immunoprécipiter la phospho-ARN Pol II (Ser5) dans du lysat de cellules HeLa (Odawara, J., et al. (2011). BMC Genomics. 12:516.; Maehara, K., et al. (2013). Nucleic Acids Res. 41(1):54-62.).

Analyse ELISA : Un lot représentatif d'un laboratoire indépendant a permis de détecter la phospho ARN Pol II (Ser5) dans un panel de protéines du type ARN Pol II (Ser5) modifiées et non modifiées (Prof. Taro Tachibana, Cell Engineering Corporation).

Analyse par immunocytochimie : Une dilution au 1/500e d'un lot représentatif provenant d'un laboratoire indépendant a permis de détecter la phospho-ARN Pol II (Ser5) dans des cellules HeLa (Prof. Taro Tachibana, Cell Engineering Corporation).

Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire

L'utilisation de cet anticorps anti-phospho ARN Pol II (Ser5), clone 1H4B6, a été validée en western blotting, ChIP-seq, ICC, ELISA et ChIP pour la détection de la phospho ARN Pol II (Ser5).

Sous-domaine de recherche
Facteurs de transcription

Physical form

Format : Produit purifié

IgG2bκ monoclonale de rat purifiée dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (à pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié sur protéine G.

Preparation Note

Stable pendant 1 an entre 2 et 8 °C à partir de la date de réception.

Analysis Note

Produit évalué par western blotting sur du lysat de cellules HeLa.

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la phospho ARN Pol II (Ser5) dans 10 µg de lysat de cellules HeLa.

Other Notes

Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.

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