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Protéinase K from Tritirachium album

Highly active serine protease that exhibits broad cleavage specificity on native and denatured proteins and is widely used in the purification of DNA and RNA.

• Synonyme(s) : Endopeptidase K
• Numéro CAS: 39450-01-6
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.85
• Numéro CE : 3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00132129
• eCl@ss: 32160410

Propriétés

• Quality Segment: 400
• form: solid
• mol wt: 28.93 kDa
• manufacturer/tradename: Novagen^®
• storage condition: OK to freeze
• technique(s): DNA extraction: suitable
• shipped in: wet ice
• storage temp.: 2-8°C

Description

General description

Proteinase K is a highly active 28,904-Daserine protease isolated from the fungusTritirachium album. The enzyme exhibitsbroad cleavage specificity on native anddenatured proteins and is widely used in thepurification of DNA and RNA. Its activityis increased in the presence of denaturantssuch as SDS (1%) and elevated temperature(50-60°C). The recommended workingconcentration is 50-100 µg/ml for proteinremoval and enzyme inactivation, and up to2 mg/ml for tissue treatment. The Proteinase K,Lyophilized powder can be prepared as a20 mg/ml stock solution in water and storedin aliquots at -20°C. The enzyme is alsoavailable as a ready-to-use concentrated stocksolution (600 mAU/ml) that is convenientfor routine use in most applications. 1 mgof Proteinase K is the equivalent of 30 mAU(AU = Anson unit). The Novagen ProteinaseK products are free of detectable DNase andRNase

Application

Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.

Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
S′est avéré utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo.
Détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
Traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps.
Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).

Biochem/physiol Actions

La protéinase K est une sérine protéase très stable et hautement réactive. Des études de cristallographie et de structure moléculaires ont indiqué que cette enzyme appartient à la famille des subtilisines, présentant une triade catalytique au site actif (Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴). Elle est stable dans un vaste éventail d′environnements : pH, sels de tampon, détergents (SDS) et température. En présence de 0,1 à 0,5 % de SDS, la protéinase K reste active et peut digérer diverses protéines et nucléases dans les préparations d′ADN, sans compromettre l′intégrité de l′ADN isolé.

Other Notes

One AU (AU = Anson unit) is defined as the amount of enzyme that liberates 1.0 µmol (181 µg) of tyrosine from casein per minute at pH 7.5 at 37°C.

Legal Information

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxicity: Harmful (C)

Informations sur la sécurité

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable