G003762

HPLC Analysis of Piroxicam and 2-Aminopyridine in Urine on Discovery^® HS F5 after SPE using Discovery^® DSC-MCAX

application for SPE, application for HPLC

Eigenschaften

• Methode(n): HPLC: suitable; solid phase extraction (SPE): suitable
• Testparameter: sample preparation: SPE (Solid Phase Extraction); sample/matrix: human urine spiked with piroxicam (4 μg/mL) and 2-aminopyridine (10 μg/mL); SPE tube/cartridge: Discovery DSC-MCAX, 100 mg/3 mL (52783-U); condition: 1 mL methanol; 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; sample addition: 1 mL; washing: 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; 1 mL methanol; elution: 1 mL 5% ammonium hydroxide in methanol; eluate post-treatment: evaporate to dryness with nitrogen at room temperature, reconstitute in 1 mL mobile phase; column: Discovery HS F5, 15 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (567516-U); mobile phase: [A] 10 mM potassium phosphate, pH 6: [B] acetonitrile (85:15, A:B); flow rate: 2 mL/min; column temp.: 25 °C; detector: UV, 220 nm; injection: 10 μL
• Eignung: application for HPLC; application for SPE
• Anwendung(en): clinical

Beschreibung

Anwendung

Vorbehandlung der Probe:
Piroxicam und 2-Aminopyridin (der polare Metabolit des Piroxicam) wurde bis zum Gehalt von 4 bzw. 10 μg/mL zu Urinproben (Mensch) gegeben. Die Urinprobe wurde 1:1 mit 10 mM Kaliumphosphatlösung, pH 3, verdünnt.

Konditionieren der SPE-Kartusche mit 1 mL Methanol und 1 mL 10 mM Kaliumphosphatlösung, pH 3
Aufgabe von 1 mL der verdünnten versetzten Urinprobe
Waschen mit 1 mL 10 mM Kaliumphosphatlösung, pH 3, und 1 mL Methanol
Eluieren mit 1 mL 5% Ammoniumhydroxid in Methanol
Eindampfen bis zur Trockne mit N₂ bei Raumtemperatur
Aufnehmen in 1 mL der mobilen Phase

Wiederholen der obigen Methode mit zwei Misch-Modus-Kationentauscher-Phasen mit äquivalentem Bettgewicht/Hardware der Konkurrenz

Rechtliche Hinweise

Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany