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D9542

DAPI

for nucleic acid staining

DAPI

Synonym(e):

4′,6-Diamidin-2-phenylindol -dihydrochlorid, 2-(4-Amidinophenyl)-6-indolcarbamidin -dihydrochlorid, DAPI -dihydrochlorid

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Über diesen Artikel

Empirische Formel (Hill-System):
C16H15N5 · 2HCl
CAS-Nummer:
Molekulargewicht:
350.25
UNSPSC Code:
12352200
NACRES:
NA.52
PubChem Substance ID:
EC Number:
249-186-7
Beilstein/REAXYS Number:
4894417
MDL number:

16,40 €


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grade

Molecular Biology

Quality Segment

assay

≥98% (HPLC)

form

powder

technique(s)

transfection: suitable

solubility

H2O: 20 mg/mL, PBS: insoluble

ε (extinction coefficient)

30 at 263 nm in H2O at 1 mM

fluorescence

λex 340 nm; λem 488 nm (nur DAPI), λex 364 nm; λem 454 nm (DAPI-DNA-Komplex)

suitability

suitable for fluorescence

storage temp.

2-8°C

SMILES string

Cl.Cl.NC(=N)c1ccc(cc1)-c2cc3ccc(cc3[nH]2)C(N)=N

InChI

1S/C16H15N5.2ClH/c17-15(18)10-3-1-9(2-4-10)13-7-11-5-6-12(16(19)20)8-14(11)21-13;;/h1-8,21H,(H3,17,18)(H3,19,20);2*1H

InChI key

FPNZBYLXNYPRLR-UHFFFAOYSA-N

General description

DAPI (4′,6-Diamidino-2-phenylindoldihydrochlorid) ist ein zelldurchdringender, fluoreszierender Farbstoff, der an DNA bindet.
Möglicherweise ist Wärme oder eine Ultraschallbehandlung erforderlich. Bei Lagerung bei Raumtemperatur oder bei 4 °C im Dunkeln sollten die Lösungen 2 bis 3 Wochen lang stabil sein.

Application

DAPI ist um ein Vielfaches empfindlicher als Ethidiumbromid zur DNA-Färbung in Agarosegelen. Es kann für sogenanntes Photo-Footprinting von DNA verwendet werden, zum Nachweis gebundener Sonden in Blotting-Anwendungen durch gezielte Visualisierung des doppelsträngigen Komplexes, als auch um Änderungen in der DNA zu untersuchen und um den DNA-Gehalt während der Apoptose mittels Durchflusszytometrie zu bestimmen. DAPI-Färbung ist eine sensitive und spezifische Nachweismethode für Mykoplasmen.
DAPI ist um ein Vielfaches sensitiver als Ethidiumbromid für die Färbung von DNA in Agarosegelen.
Geeignet für
  • DNA-Färbung in Agarosegelen
  • Analyse von DNA-Veränderungen während der Apoptose
  • Nachweis von Mykoplasmen
  • Photo-Footprinting von DNA
  • Immunfluoreszenzfärbung von Zellen

DAPI wird verwendet:
  • zur schnellen Überwachung von mikrobiologischen Kontaminationen[1]
  • bei der Chromosomenbänderungstechnik[2]
  • zum Nachweis von apoptotischen Zellen[3]
  • bei der Fluoreszenzmikroskopie zum Nachverfolgen der DisA (DNA-Integritäts-Scan-Protein)-Bewegung auf Bacillus subtilis-DNA[4]
  • zum Färben von ausgereiften Pollenkörnern (0,5 mg/ml)[5]

Biochem/physiol Actions

Cell permeable fluorescent minor groove-binding probe for DNA. Binds to the minor groove of double-stranded DNA (preferentially to AT rich DNA), forming a stable complex which fluoresces approximately 20 times greater than DAPI alone.

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10236276001MBD00205.08741
DAPI 4′,6-Diamidine-2′-phenylindole dihydrochloride

Roche

10236276001

DAPI

grade

Molecular Biology

grade

-

grade

-

grade

-

technique(s)

transfection: suitable

technique(s)

-

technique(s)

DNA extraction: suitable, DNA sequencing: suitable, PCR: suitable

technique(s)

-

suitability

suitable for fluorescence

suitability

-

suitability

suitable for nucleic acid staining

suitability

-

fluorescence

λex 340 nm; λem 488 nm (nur DAPI), λex 364 nm; λem 454 nm (DAPI-DNA-Komplex)

fluorescence

λex 340 nm; λem 488 nm (nur DAPI), λex 364 nm; λem 454 nm (DAPI-DNA-Komplex)

fluorescence

λex 340 nm; λem 488 nm (nur DAPI), λex 364 nm; λem 454 nm (DAPI-DNA-Komplex)

fluorescence

λex ~359 nm, λem ~461 nm

solubility

H2O: 20 mg/mL, PBS: insoluble

solubility

-

solubility

-

solubility

-

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powder

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powder

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liquid

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liquid


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signalword

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Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1A - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

Lagerklasse

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

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Eyeshields, Gloves, type N95 (US)



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Fragen

1-10 von 13 Fragen  
  1. Can I dissolve 1mg in 50ul of H2O to adjust the concentration to 20mg/ml, then dilute it to 0.5ug/ml~5ug/ml and apply it to the cells?

    1 Antwort
    1. Ensuring that weighing instruments are calibrated is essential for accurate measurements. This approach should be acceptable for preparing the desired concentrations.

      Hilfreich?

  2. Can this product be used to stain bacteria (E.coli) chromosome?

    1 Antwort
    1. DAPI is suitable for staining bacterial chromosomes, including those of E. coli.

      Hilfreich?

  3. What is the working dilution of DAPI that should be used to stain the nuclei of human cells?

    1 Antwort
    1. Typical working concentration of DAPI used in most applications is 0.1μg/mL-10μg/mL. Please see the link below to review the product datasheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/774/984/d9564pis.pdf

      Please see the link below to review a sample protocol from Cold Spring Harbor:
      https://cshprotocols.cshlp.org/content/2011/1/pdb.prot5556.long

      Hilfreich?

  4. what kind of the water used to dissolve DAPI? and what's the temperature should be dissolve the water?

    1 Antwort
    1. This product is soluble at 20 mg/mL in water at ambient temperature. No specific water type or treatment is required. Deionized water is typically used for laboratory applications.

      Please see the link below to review the product data sheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/392/209/d9542pis.pdf

      Hilfreich?

  5. What is the suitable DAPI for immunofluorescence staining of free-floating rat brain sections?

    1 Antwort
    1. Several DAPI products are suitable for staining free-floating rat brain sections. The same DAPI used for staining mycoplasma, cultured cells, or other cell types can be used for this purpose. Any of the DAPI products listed on the website should be suitable for this use.

      Hilfreich?

  6. What is the suggested concentration for product D9542-1MG?

    1 Antwort
    1. The suggested concentration for product D9542-1MG, DAPI, is in the range of 0.5 to 5 ug/ml.

      Hilfreich?

  7. Can the stain concentration be used for staining fish scales and any animal cells for ICC?

    1 Antwort
    1. Yes, DAPI can be used to stain fish scale nuclei. While specific data regarding the concentration and duration for staining fish scale nuclei is not available, it is suggested to start with a working concentration of around 0.5 mg/ml and optimize the staining for each specific cell type, as different cells may uptake the dye at varying rates. It is also advisable to try staining at both higher and lower concentrations. For staining mammalian cells, lower concentrations are typically used.

      Hilfreich?

  8. 肝細胞を染める染色プロトコルを教えてください。

    1 Antwort
    1. Please see the link below to review the product datasheet, which includes basic protocols:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/392/209/d9542pis.pdf

      A protocol specifically for hepatocyte staining is not available. However, the publication shown at the link below may be helpful:
      https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5671579/

      Hilfreich?

  9. How should D9542, 4´,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI), be stored once in solution, and for how long would it be good?

    1 Antwort
    1. Solutions stored in the dark at room temperature have been stable for 2-3 weeks, but solutions exposed to light for the same time period have shown considerable degradation.  At 1 mg/mL, solutions are stable in the dark at 2-8 °C for several weeks.  For long-term storage, the solutions can be divided into aliquots and stored at -20 °C.

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  10. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 Antwort
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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