11426362001

Hexokinase (HK)

suspension, suitable for detection

• Synonym(e): HK, Hexokinase
• EC-Nummer: 2.7.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 12352204

Eigenschaften

• Form: suspension
• Qualitätsniveau: 100
• Spezifische Aktivität: ~450 units/mg protein (At 25 °C and pH 7.6 with D-glucose and ATP as the substrates.)
• Verpackung: pkg of 1 mL (1,500 U)
• Hersteller/Markenname: Roche
• pH-Bereich: 6.0-8.0
• Anwendung(en): detection
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

ATP:D-Hexose-6-phosphotransferase

Hexokinase besteht aus 486 Aminosäuren und hat eine Molekülmasse von 57.000 Da (SDS-PAGE) in Citrat-/Phosphatpuffer. Unter anderen Pufferbedingungen kann sie Dimere bilden.

Hexokinase existiert als drei Isozyme, nämlich Typ I, Typ II und Typ III, die sich in ihrer subzellulären Lokalisierung, ihren katalytischen und regulatorischen Eigenschaften unterscheiden. Das Isozym Typ I stellt eine katabolische Funktion bereit, die das Eintreten von Glucose in den glykolytischen Metabolismus zur Energieproduktion erleichtert. Enzyme der Typen II und III führen anabolische Funktionen aus, z. B. die Erzeugung von G6P zur Glykogensynthese oder den Metabolismus über den Phosphoglukonatweg zur Lipidsynthese. Die Isozyme Typ I und Typ II sind an Mitochondien gebunden. Das Isozym Typ III hat in verschiedenen Zelltypen eine perinukleäre Lokalisierung.

Anwendung

Hexokinase (HK) wird in Enzymassays und Chemilumineszenzassays eingesetzt. Sie wird außerdem zur Bestimmung der ATP-Konzentration eingesetzt.

Verwenden Sie Hexokinase zur Bestimmung von D-Glucose, D-Fructose und D-Sorbit in Lebensmitteln oder biologischen Forschungsproben. Hexokinase kann auch für den Gehalt von anderen Sacchariden, die zu Glucose oder Fructose umgewandelt werden können, eingesetzt werden und ist daher nützlich für den Gehalt vieler Glykoside.
Hexokinase wird für den enzymatischen Nachweis von Stickstoffmonoxid und zur Messung von ATP mittels Luminsezenzverfahren eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Hexokinase katalysiert die Umwandlung von Hexosen zu Hexose-6-phosphat auf ATP-abhängige Weise. Sie wird auch glykolytisches Enzym genannt, da sie den ersten Schritt des Glucosemetabolismus mit der Bildung von Glucose-6-phosphat (G6P) katalysiert. In Eukaryoten fungiert sie als Glucosesensor.

Qualität

Verunreinigungen: <0,002 % PGI, <0,0005 % G6P-DH und GR, jeweils, <0,001 % CK, MK, 6-PGDH, und ADH, jeweils, <0,05 % GIDH und Invertase (β-Fructosidase), jeweils, <30 μg/ml Glucose (enzymatisch)

Einheitendefinition

Assay: Zum Messen der Hexokinaseaktivität; 0,22 M Glucose in 0,1 M Triethanolaminpuffer, pH-Wert 7,6, 6,5 mM MgCl₂, 2,7 mM ATP, 0,83 mM NADP wird in Gegenwart von 1,7 U Glucose-6-phosphatdehydrogenase mit einer geeigneten Menge Hexokinase (10 bis 20 mU) bei +25 °C inkubiert (Gesamtvolumen: 3,0 ml). Die Enzymaktivität wird aus der Steigerung der Absorption bei 340 nm berechnet (= 6,3 [I × mmol/l^-1 × cm-1]) oder 365 nm ( = 3,5 [I × mmol/l^-1 × cm^-1]).

Physikalische Form

Suspension in 3,2 M Ammoniumsulfatlösung, pH-Wert etwa 6,5

Angaben zur Herstellung

Aktivator: Hexokinase erfordert Mg²⁺-Ionen (K_m = 2,6 mM) für die Aktivität. Auch Catecholamine steigern die Aktivität.
Stabilisatoren: Thiole

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash