208771

Calpain-Substrat III, fluorogen

A fluorogenic FRET peptide with a substrate sequence that is optimized for calpain-1 and -2.

• Synonym(e): Calpain-Substrat III, fluorogen, (DABCYL)-TPLK~SPPPSPR-(EDANS)
• Empirische Formel (Hill-System): C₈₀H₁₁₄N₂₀O₁₈S
• Molekulargewicht: 1675.95
• UNSPSC-Code: 12352200
• NACRES: NA.77

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Assay: ≥98% (HPLC)
• Form: lyophilized solid
• Hersteller/Markenname: Calbiochem^®
• Lagerbedingungen: OK to freeze; protect from light
• Farbe: red
• Löslichkeit: water: 1 mg/mL; DMSO: 5 mg/mL
• Fluoreszenz: λ_ex 320 nm; λ_em 480 nm
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Ein fluorogenes FRET-Peptid mit einer Substratsequenz, die für Calpain-1 und -2 optimiert wurde, auf der Grundlage von 106 bekannten Spaltungsstellen. Durch Säugetier-Calpaine wird es mit deutlich höherer Effizienz gespalten (k_cat/K_m x 10^-2 (M^-1s^-1) = 69,8, 38,5, 20,0, 6,81, 3,58, 0,05 und <0,05 für Calpain-2, Trypsin, Papain, Calpain-B, Calpain-A, Chymotrypsin bzw. Cathepsin-B) und ist anderen häufig verwendeten Calpain-Substraten wie LY-AMC und α-Spektrin-Spaltungsstellen-basiertes Substrat kinetisch überlegen. Es wurde erfolgreich eingesetzt, um die Calpain-Aktivität in ganzen Drosophila-S2-Zellen (der zelluläre Einbau wurde durch ein Lipofektionsmittel erzielt) und in COS-7-Zelllysat zu überwachen.

Ein fluorogenes FRET-Peptid mit einer Substratsequenz, die für Calpain-1 und -2 optimiert wurde, auf der Grundlage von 106 bekannten Spaltungsstellen. Durch Säugetier-Calpaine wird es mit höherer Effizienz gespalten (k_cat/K_m x 10^-2 (M^-1s^-1) = 69,8, 38,5, 20,0, 6,81, 3,58, 0,05 und <0,05 für Calpain-2, Trypsin, Papain, Calpain-B, Calpain-A, Chymotrypsin bzw. Cathepsin-B). Es ist anderen häufig verwendeten Calpain-Substraten wie LY-AMC (Katalognr. 208731) und α-Spektrin-Spaltungsstellen-basiertes Substrat (Katalognr. 208748) kinetisch überlegen. Es wurde erfolgreich eingesetzt, um die Calpain-Aktivität in intakten Drosophila-S2-Zellen (der zelluläre Einbau wurde durch ein Lipofektionsmittel erzielt) und in COS-7-Zelllysat zu überwachen.

Biochem./physiol. Wirkung

Primärziel
Substratsequenz, die für Calpain-1 und -2 optimiert wurde

Produkt konkurriert nicht mit ATP.

Reversibel: nein

Zellpermeabel: nein

kcat/Km x 10-2 (M-1s-1) = 69,8, 38,5, 20,0, 6,81, 3,58, 0,05 und <0,05 für Calpain-2, Trypsin, Papain, Calpain-B, Calpain-A, Chymotrypsin bzw. Cathepsin-B

Verpackung

Verpackt unter inertem Gas

Warnhinweis

Toxizität: Reizstoff (B)

Sequenz

DABCYL-Thr-Pro-Leu-Lys~Ser-Pro-Pro-Pro-Ser-Pro-Arg-EDANS

Physikalische Form

Wird als Trifluoracetat-Salz geliefert.

Rekonstituierung

Nach der Rekonstitution in Aliquote aufteilen und einfrieren (-20 °C). Stammlösungen sind bei -20 °C bis zu 3 Monate haltbar.

Sonstige Hinweise

Tompa, P., et al. 2004. J. Biol. Chem.279, 20775.

Rechtliche Hinweise

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable