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07-354

Sigma-Aldrich

Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper

serum, Upstate®

Synonym(e):

H3K18Ac, Histone H3 (acetyl K18)

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Biologische Quelle

rabbit

Qualitätsniveau

Antikörperform

serum

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

polyclonal

Speziesreaktivität

yeast, Saccharomyces cerevisiae, human

Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie)

vertebrates (most common)

Hersteller/Markenname

Upstate®

Methode(n)

ChIP: suitable (ChIP-seq)
dot blot: suitable
western blot: suitable

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

dry ice

Posttranslationale Modifikation Target

acetylation (Lys18)

Angaben zum Gen

human ... H3C1(8350)

Allgemeine Beschreibung

Histon H3 ist eines der 5 wichtigsten Histonproteine, die an der Struktur des Chromatins in eukaryotischen Zellen beteiligt sind. Bestehend aus einer kugelförmigen Hauptdomäne und einem langen N-terminalen Ende spielt H3 eine Rolle für die Struktur der Nukleosomen und somit der ′Perlenschnur′-Struktur der Chromatinfäden.



Die Acetylierung von Histon H3 findet unter dem Einfluss der Enzymfamilie der Histon-Acetyltransferasen (HAT) an verschiedenen Lysin-Positionen am Histon-Ende statt.

Spezifität

Erkennt an Lysin 18 acetyliertes Histon H3.

Immunogen

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid (GKAPRAcKQLASK-C), das den Aminosäuren 13–23 von Hefe-Histon H3 entspricht, das an Lysin18 acetyliert ist und für Konjugationszwecke ein hinzugefügtes C-terminales Cystein enthält.

Anwendung

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1x10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µl normalem Kaninchenserum oder 2 µl Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys18) und dem Magna ChIP A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Acetyl-Histon-H3(Lys18)-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit Kontrollprimern, die für die humane GAPDH-Promotor-Region spezifisch sind, als positive Stelle und β-Globin-Primer als negative Stelle bestätigt Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

ChIP-Sequenzierung:
Daten einer repräsentativen Charge. Die Chromatin-Immunpräzipitation wurde mit dem Magna ChIP HiSens-Kit (Katalognr. 17-10460), 2 μg Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper (Katalognr. 07-354), 20 µl Protein A/G-Beads und 1E6 vernetztem HeLa-Zellen-Chromatin durchgeführt, gefolgt von einer DNA-Aufreinigung mit magnetischen Beads. Aus Input- und ChIP-DNA-Proben wurden unter Verwendung von Standardprotokollen mit barcodierten Illumina-Adaptern Bibliotheken erstellt und auf dem Illumina HiSeq-Instrument analysiert. Ein Übermaß von zehn Millionen Reads von FastQ-Dateien wurden nach der Entfernung des TagDust-Tags (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/) mit Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) abgebildet. Peaks wurden mit MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/) identifiziert, wobei Peaks und Reads im UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) von BigWig und BED-Dateien als benutzerdefinierter Track dargestellt werden.

Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
Rekombinantes Histon H3 (Bahn 1, Katalognr. 14-494) und Säureextrakte aus mit Natriumbutyrat behandelten (Bahn 2) und unbehandelten (Bahn 3) HeLa-Zellen (Katalognr. 17-305) wurden mit Acetyl-Histon H3 (Lys18) (1:10.000-Verdünnung) untersucht.
Der Pfeil zeigt Acetyl-Histon H3 (Lys18) (17 kDa).

Dot Blot:
Daten einer repräsentativen Charge.
40 ng und 4 ng Histonpeptide mit verschiedenen Modifikationen (siehe Tabelle 1) wurden auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper (1:5000-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG von der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert. Es wird eine Aufnahme von einer 60-Sekunden-Belichtung gezeigt.
Verwenden Sie diesen Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper (polyklonaler Kaninchen-Antikörper), der in ChIP und WB validiert wurde, um Acetyl-Histon-H3(Lys18), auch als H3K18Ac, Histon H3 (Acetyl K18) bekannt, nachzuweisen.

Qualität

Regelmäßig mittels Immunblot an Säureextrakten aus mit Natriumbutyrat behandelten HeLa-Zellen beurteilt

Zielbeschreibung

17 kDa

Verlinkung

Ersetzt: 04-1107

Physikalische Form

100 μl Kaninchenserum mit 0,05 % Natriumazid und 30 % Glycerin.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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Inducible activation of Cre recombinase in adult mice causes gastric epithelial atrophy, metaplasia and regenerative changes in the absence of "floxed" alleles.
Huh WJ, Mysorekar IU, Mills JC
American Journal of Physiology: Gastrointestinal and Liver Physiology null
Paola Y Bertucci et al.
Nucleic acids research, 41(12), 6072-6086 (2013-05-04)
Steroid receptors were classically described for regulating transcription by binding to target gene promoters. However, genome-wide studies reveal that steroid receptors-binding sites are mainly located at intragenic regions. To determine the role of these sites, we examined the effect of
Nucleosome competition reveals processive acetylation by the SAGA HAT module.
Ringel, AE; Cieniewicz, AM; Taverna, SD; Wolberger, C
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null
Jason S Patzlaff et al.
Experimental cell research, 316(13), 2123-2135 (2010-05-11)
Histone acetylation is a key modification that regulates chromatin accessibility. Here we show that treatment with butyrate or other histone deacetylase (HDAC) inhibitors does not induce histone hyperacetylation in metaphase-arrested HeLa cells. When compared to similarly treated interphase cells, acetylation
H2B- and H3-specific histone deacetylases are required for DNA methylation in Neurospora crassa.
Smith, KM; Dobosy, JR; Reifsnyder, JE; Rountree, MR; Anderson, DC; Green, GR; Selker, EU
Genetics null

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