04-789

Anti-Phospho-Histon H3(Thr11)-Antikörper, Klon MC83, Kaninchen, monoklonal

culture supernatant, clone MC83, Upstate^®

• Synonym(e): H3T11P, Histone H3 (phospho T11)
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: culture supernatant
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: MC83, monoclonal
• Speziesreaktivität: human
• Hersteller/Markenname: Upstate^®
• Methode(n): inhibition assay: suitable (peptide); multiplexing: suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_003493
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q16695
• Versandbedingung: dry ice
• Posttranslationale Modifikation Target: phosphorylation (pThr11)
• Angaben zum Gen: human ... H3C1(8350)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Histone sind hochkonservierte Proteine und dienen bei der Organisation von Zellkern-DNA zu Chromatin als Strukturgerüst. Die vier Haupt-Histone, H2A, H2B, H3 und H4, bilden ein Oktamer (jeweils 2 Moleküle). Histone werden posttranslational durch die Wirkung von Enzymen sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma modifiziert. Diese Modifikationen, zu denen Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinylierung gehören, treten überwiegend an N-terminalen und C-terminalen Enden auf, die sich über das Nukleosom-Kernteilchen hinaus erstrecken. Die Phosphorylierung an Ser10, Ser28 und Thr11 von Histon H3 korreliert eng mit der Chromosomenkondensation, sowohl während der Mitose als auch der Meiose. Bei Säugetieren ist die Phosphorylierung der Thr11-Modifikation auf den Zentromerbereich beschränkt, während die Phosphorylierung von Thr11 in Pflanzenzellen über die gesamte Länge der kondensierten Chromosomen verteilt ist. Die mitosespezifische Phosphorylierung von Histon H3 an Thr11 wird durch Dlk/ZIP-Kinase vermittelt.

Spezifität

Aufgrund der Sequenzhomologie ist eine weitreichende artenübergreifende Kreuzreaktivität zu erwarten. In manchen Lysaten kann eine zusätzliche, nicht identifizierte Bande bei ~40 kDa auftreten.

Erkennt Histon H3, das an Thr11 phosphoryliert ist, Molekülmasse 17 kDa.

Immunogen

Peptid, das …KS[pT]G… enthält, wobei pT dem Phospho-Threonin an Position 11 des humanen Histon H3 entspricht

Anwendung

Der Anti-Phospho-Histon-H3(Thr11)-Antikörper Klon MC83 ist ein monoklonaler Antikörper aus Kaninchen für den Nachweis von Phospho-Histon H3 (Thr11), auch bekannt als H3T11P, Histon H3 (Phospho T11), und wurde in WB, PIA, Mplex validiert.

Forschungs-Unterkategorie
Histone

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Immunblot-Analyse:
Eine 1:500- bis 1:2000-Verdünnung dieser Charge wies phosphoryliertes Histon H3 in säureextrahierten Proteinen von mitotischen HeLa-Zellen, die mit Colcemid behandelt wurden, nach, aber nicht in nichtmodifiziertem rekombinantem Histon H3 (Katalognr. 14-494).

Western-Blot-Analyse:
Eine 1:5000-Verdünnung einer vorherigen Charge wies phosphoryliertes Histon H3 in säureextrahierten Proteinen aus mitotischen HeLa-Zellen nach, die mit Colcemid behandelt wurden, aber nicht in nichtmodifiziertem, rekombinantem Histon H3 (Katalognr. 14-494).


Multiplex:
Beadlyte Histon-Peptid-Spezifitätsassay: Eine 1:1000-1:50.000-Verdünnung einer vorherigen Charge wurde mit Histon H3-Peptiden, die verschiedene Modifikationen enthalten und an Luminex-Mikrosphären konjugiert sind, inkubiert. Nur das Peptid, das Phospho-Threonin 11 enthielt, wurde
nachgewiesen (Abb. C).

Peptidhemmungsanalyse: 1 μmol/l Histon H3-Peptid, das Phospho-threonin 11 enthielt, hob den Nachweis von Histon H3 durch Anti-Phospho-Histon H3 (Thr11), Klon MC83 bei der Immunblot-Analyse von Säureextrakten von
mit Colcemid behandelten HeLa-Zellen auf (Abb. D, Bahn 4).

Qualität

Routinemäßig mittels Immunblot-Analyse beurteilt.

Zielbeschreibung

17 kDa

Verlinkung

Ersetzt: MABE468

Physikalische Form

Kulturüberstand in 0,05 % Natriumazid

Lagerung und Haltbarkeit

Ab Empfangsdatum bei -20 °C 1 Jahr haltbar.
Für eine maximale Rückgewinnung des Produkts das Fläschchen vor dem Entfernen des Deckels zentrifugieren.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
HeLa-Säuren-Extrakte

Rechtliche Hinweise

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

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