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Centro de referencia de las disoluciones tampón

Elección del tampón biológico adecuado

Elija la disolución tampón en función de sus requisitos de pH, así como del pKa, una medida de la fuerza del ácido que tiene en cuenta el pH, la concentración y la temperatura. También debe considerar los requisitos reguladores o de pureza para su aplicación exacta. Las siguientes tablas le ayudarán a manejarse por la preparación de muchas disoluciones tampón comunes por pH y pKa. 

Además de las tablas siguientes, hemos desarrollado varias calculadoras de recetas de disoluciones tampón para ayudarle en la preparación de las disoluciones tampón.

TBE y TAE para electroforesis en gel tienen recetas ligeramente más complicadas. Podemos ayudarle a elegir la correcta.

¿Qué son los grados de amortiguamiento?

El grado de amortiguamiento indica la calidad y los niveles de impureza apropiados para diferentes usos. Proporcionamos seis grados de amortiguamiento indicados para uso general en el laboratorio, formulación y fabricación farmacéutica final, y aplicaciones intermedias que pueden requerir el análisis de trazas metálicas o materiales de una pureza especificada.

Tabla de intervalos de pH de tampones biológicos seleccionados (25°C, 0,1 M)

Disoluciones tampónIntervalo de pH útilpKa
(a 20 °C)		pKa
(a 25 °C)		pKa
(a 37 °C)		Grado de reactivoGrado certificado BioPerformance
MES5,5 – 6,76,166,105,97M8250M2933
bis-Tris5,8 – 7,2n/a6,506,36B9754B4429
ADA6,0 – 7,26,656,596,46A9883n/a
ACES6,1 – 7,56,886,786,54A9758A3594
PIPES6,1 – 7,56,806,766,66P6757P1851
MOPSO6,2 – 7,6n/a6,906,75M8389n/a
Propano bis- Tris6,3 – 9,5n/a6,8, 9,0n/aB6755B4679
BES6,4 – 7,87,177,096,90B9879B4554
MOPS6,5 – 7,97,287,207,02M1254M3183
TES6,8 – 8,27,507,407,16T1375T5691
HEPES6,8 – 8,27,557,487,31H3375H4034
DIPSO7,0 – 8,2n/a7,607,35n/an/a
MOBS6,9 – 8,3n/a7,60n/aM3295n/a
TAPSO7,0 – 8,2n/a7,607,39T9269n/a
Tris o Trizma®7,0 – 9,08,208,067,72T1503T6066
HEPPSO7,1 – 8,5n/a7,806,66n/an/a
POPSO7,2 – 8,5n/a7,807,63P3405n/a
TEA7,3 – 8,3n/a7,80n/an/an/a
EPPS7,3 – 8,7n/a8,00n/aE9502E0276
Tricina7,4 – 8,88,168,057,80T0377T5816
Gly-Gly7,5 – 8,9n/a8,20n/aG1002G3915
Bicina7,6 – 9,08,358,268,04B3876n/a
HEPBS7,6 – 9,0n/a8,30n/aH6903n/a
TAPS7,7-9,18,498,408,18T5130T5316
AMPD7,8 – 9,7n/a8,80n/aA9754n/a
TABS8,2 – 9,6n/a8,90n/an/an/a
AMPSO8,3 – 9,7n/a9,009,10A6659n/a
CHES8,6 – 10,09,559,499,36C2885n/a
CAPSO8,9 – 10,3n/a9,609,43C2278n/a
AMP9,0 – 10,5n/a9,70n/an/an/a
CAPS9,7 – 11,110,5610,4010,02C2632n/a
CABS10,0 – 11,4n/a10,70n/aC5580n/a

Tabla de preparación del tampón Tris o Trizma® – pH frente a temperatura

PH a temperatura
5 °C25 °C37 °C
7,767,206,91
7,897,307,02
7,977,407,12
8,077,507,22
8,187,607,30
8,267,707,40
8,377,807,52
8,487,907,62
8,588,007,71
8,688,107,80
8,788,207,91
8,888,308,01
8,988,408,10
9,098,508,22
9,188,608,31
9,288,708,42
9,368,808,51
9,478,908,62
9,569,008,70
g/l para una disolución 0,05 M.
HCL de Trizma® Base Trizma®
7,020,67
6,850,80
6,610,97
6,351,18
6,061,39
5,721,66
5,321,97
4,882,30
4,442,65
4,022,97
3,543,34
3,073,70
2,644,03
2,214,36
1,834,65
1,504,90
1,235,13
0,965,32
0,765,47

Tabla de preparación del tampón fosfato – disolución 0,2 M  

Fosfato de potasio 
monobásico anhidro g/l		Fosfato de sodio dibásico heptahidratado g/lpH 23 °C
22,43,495,7
22,084,295,8
21,605,375,9
21,056,606,0
20,408,056,1
19,569,936,2
18,6012,076,3
17,6414,226,4
16,4416,906,5
15,0020,126,6
13,5623,346,7
12,2426,296,8
Fosfato de potasio monobásico
anhidro g/l		Fosfato de sodio
dibásico heptahidratado g/l		pH 23 °C
10,8029,516,9
9,3632,737,0
7,9235,957,1
6,7238,637,2
5,5241,317,3
4,5643,467,4
3,8445,077,5
3,1246,687,6
2,5248,557,7
2,0449,097,8
1,6849,897,9
1,2750,818,0

Preparación del tampón ácido cítrico – Na2HPO4, pH 2,6-7,61

Ácido cítrico monohidratado, C6H8O7• H2O, PM 210,14; 0,1 M contiene 21,01 g/l. NA2HPO4, PM 141,98; 0,2 M contiene 28,40 g/l o Na2HPO4• 2H2O, PM 178,05; 0,2 M contiene 35,61 g/l.

x ml ácido cítrico-0,1 M y ml Na2HPO4-0,2 M mezclado

pHx ml ácido cítrico-0,1 My ml Na2HPO4-0,2 M
2,689,1010,90
2,884,1515,85
3,079,4520,55
3,275,3024,70
3,471,5028,50
3,667,8032,20
3,864,5035,50
4,061,4538,55
4,258,6041,40
4,455,9044,10
4,653,2546,75
4,850,7049,30
5,048,5051,50
5,246,4053,60
5,444,2555,75
5,642,0058,00
5,839,5560,45
6,036,8563,15
6,233,9066,10
6,430,7569,25
6,627,2572,75
6,822,7577,25
7,017,6582,35
7,213,0586,95
7,49,1590,85
7,66,3593,65

Preparación del tampón ácido cítrico – citrato de sodio, pH 3,0-6,21

Ácido cítrico monohidratado, C6H8O7• H2O, PM 210,14; 0,1 M contiene 21,01 g/l. Citrato trisódico dihidratado, C6H5O7Na3 • 2H2O, PM 294,12; 0,1 M contiene 29,41 g/l.

x ml ácido cítrico-0,1 M y ml citrato de trisodio-0,1 M mezclado

pHx ml ácido cítrico-0,1 My ml citrato de trisodio-0,1 M
3,082,018,0
3,277,522,5
3,473,027,0
3,668,531,5
3,863,536,5
4,059,041,0
4,254,046,0
4,449,550,5
4,644,555,5
4,840,060,0
5,035,065,0
5,230,569,5
5,425,574,5
5,621,079,0
5,816,084,0
6,011,588,5
6,28,092,0

Preparación del tampón acetato de sodio – ácido acético, pH 3,7-5,61

Acetato de sodio trihidratado, CH3COONA • 3H2O, PM 136,09; 0,2 M contiene 27,22 g/l.

x mL 0,2 M-NaOAc y ml 0,2 M-HOAc mezclado

pH, 18 °Cx ml NaOAc- 0,2 My ml HOAc - 0,2 M
3,710,090,0
3,812,088,0
4,018,082,0
4,226,573,5
4,437,063,0
4,649,051,0
4,859,041,0
5,070,030,0
5,279,021,0
5,486,014,0
5,691,09,0

Preparación del tampón Na2HPO4 – NaH2PO4, pH 5,8-8,0 a 25 °C1

Na2HPO4 • 2H2O, PM 178,05; 0,2 M contiene 35,61 g/l. Na2HPO4 • 12H2O, PM 358,22; 0,2 M contiene 71,64 g/l. NaH2PO4 • H2O, PM 138,01; 0,2 M contiene 27,6 g/l. NaH2PO4 • 2H2O, PM 156,03; 0,2 M contiene 31,21 g/l.

x ml 0,2 M-Na2HPO4 y ml 0,2 M-NaH2PO4; diluido hasta 100 ml con H2O

pH, 25 °Cx ml Na2HPO4-0,2 My mL NaH2PO4-0,2 M
5,84,046,0
6,06,1543,85
6,29,2540,75
6,413,2536,75
6,618,7531,25
6,824,525,5
7,030,519,5
7,236,014,0
7,440,59,5
7,643,56,5
7,845,754,25
8,047,352,65

Preparación del tampón imidazol (glioxalina) – HCl– pH 6,2-7,8 a 25 °C1

Imidazol, C3H4N2, PM 68,08

25 ml 0,2 M-imidazol (13,62 g/l), x ml 0,2 M-HCl, diluido hasta 100 mlL con H2O

pH, 25 °Cx ml HCl- 0,2 M
6,221,45
6,419,9
6,617,75
6,815,2
7,012,15
7,29,3
7,46,8
7,64,65
7,83,0

Preparación del tampón carbonato de sodio – bicarbonato de sodio, pH 9,2-10,81

Na2CO3 • 10H2O, PM 286,2; 0,1 M contiene 28,62 g/l. NaHCO3, PM 84,0; 0,1 M contiene 8,40 g/l.

x ml 0,1 M-Na2CO3 e y ml 0,1 M-Na2HCO3 mezclado

20 °C37 °C  
x ml Na2CO3-0,1 My ml Na2HCO3-0,1 M  
9,28,81090
9,49,12080
9,59,43070
9,89,54060
9,99,75050
10,19,96040
10,310,17030
10,510,38020
10,810,69010

Fórmulas y ecuaciones para preparación de disoluciones tampón

Porcentaje por peso (p/v)

(% tampón deseado / 100) x volumen final del tampón (ml) = g de material de partida necesario.

Disoluciones molares

molaridad deseada x peso de la fórmula x volumen final de la disolución (l) = gramos necesarios

Ecuación de Henderson-Hasselbach

pH de Henderson

Método

1.
Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..
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