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Endonucleasas

Endonucleasas

Las enzimas endonucleasas se utilizan para reducir el nivel de contaminación por ácidos nucleicos en los flujos de trabajo de bioprocesamiento y aplicaciones experimentales mediante la excisión del ADN y el ARN en fragmentos más pequeños. Si bien se dispone de una amplia variedad de endonucleasas de fuentes naturales, estas formulaciones de endonucleasa pueden, sin embargo, plantear un desafío, ya que pueden contener actividad proteasa y contaminantes víricos.

La endonucleasa Benzonase®, una nucleasa producida mediante ingeniería genética a partir de Serratia marcescens, elimina el riesgo de utilizar endonucleasas de origen natural y puede degradar todas las formas de ADN y ARN. Cuando se utiliza en las condiciones de reacción apropiadas, la endonucleasa Benzonase® degradará todas las formas de ADN y ARN (monocatenario, bicatenario, lineal y circular) a oligonucleótidos de aproximadamente tres a cinco pares de bases de longitud. Tiene un nivel excepcionalmente alto de actividad específica sin ninguna actividad proteolítica detectable.

Con algunas plantillas de fabricación, puede ser beneficioso el uso de una concentración salina por encima de los niveles fisiológicos (NaCl 200 mM). La endonucleasa tolerante a la sal Benzonase® permite el uso de concentraciones salinas de NaCl comprendidas entre 200 mM y 1000 mM para la etapa intermedia de lisis y digestión del ADN durante la producción de vectores virus adenoasociados (AAV). Esta nueva incorporación a la cartera Benzonase® es compatible con todos los detergentes probados, incluidos los Deviron®, que son una alternativa al Triton™ X-100.

Obtenga más información sobre las aplicaciones de bioprocesamiento e investigación de la endonucleasa Benzonase®.

Productos de uso experimental
Productos de uso en bioprocesos

Aplicaciones de bioprocesamiento

La endonucleasa Benzonase® es idónea para aplicaciones de bioprocesamiento exigentes. Degrada los ácidos nucleicos muy por debajo del tamaño de fragmento de 200 pares de bases requerido por la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA), se lanza bajo condiciones GMP IPE-PQG, y tiene la documentación química con la FDA, que puede ser citada en las solicitudes de registro.

Es eficaz en una amplia gama de condiciones de funcionamiento y aplicaciones, entre ellas:

  • Purificación de vacunas víricas y vacunas de vectores víricos
  • Purificación de citoterapias y genoterapias
  • Purificación de virus oncolíticos
  • Eliminación del ADN y el ARN de las proteínas y otros productos biológicos
  • Eliminación del ADN de las células huésped

Existen tres versiones de la endonucleasa Benzonase® IPEG PQG GMP para satisfacer diferentes requisitos de fabricación. Todas forman parte del programa Emprove® que facilita la preparación de documentos para la presentación de solicitudes de registro (Tabla 1).

Las endonucleasas Benzonase® se preparan en el sistema de expresión de E. coli W3110 y plantean un riesgo mínimo de contaminación vírica.

  • Endonucleasa Benzonase® mprove® Expert
  • Endonucleasa Benzonase® Safety Plus Emprove® Expert se produce en un medio definido químicamente y en cada lote se analiza la ausencia de virus adventicios y micoplasmas.
  • La endonucleasa tolerante a la sal Benzonase® se produce también en un medio químicamente definido y en cada lote se comprueba la presencia de micoplasmas; tenemos pruebas de virus adventicios a disposición de los interesados.

¿Le interesa recibir una muestra de Benzonase®? Si es así, pulse en el botón siguiente para más información.

Solicitar una muestra


Aplicaciones experimentales

La endonucleasa Benzonase® se puede utilizar para una gran variedad de aplicaciones experimentales, entre ellas:

  • Eliminación del ADN del huésped de muestras de microbioma
  • Mejora de la identificación de taxones microbianos para estudios de microbioma
  • Prevención de aglomerados durante la investigación de vacunas
  • Reducción de la viscosidad del lisado durante los procedimientos de extracción de proteínas recombinantes, lo que mejora el rendimiento de la proteína deseada

Se dispone de una variedad de opciones de endonucleasa Benzonase® de gran pureza y concentración.

La endonucleasa Benzonase® está también disponible en paquetes con reactivos de extracción de proteínas para facilitar aún más los flujos de trabajo.

Información técnica

Tabla 1.Comparación de las ventajas de las endonucleasas Benzonase® Safety Expert, Benzonase® Emprove® Expert y Benzonase® Plus Emprove®.

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Seminario virtual: Business Continuity Management: Principles and Lessons Learned from the Benzonase<sup>®</sup> Success Story

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