Marcaje y modificación de proteínas

Las proteínas están compuestas de cadenas de polipéptidos y sus funciones biológicas vienen determinadas en parte por el plegamiento correcto, el tamaño y el número de grupos funcionales reactivos presentes a lo largo de la cadena polipeptídica. La capacidad para realizar modificaciones específicas de sitio en las proteínas proporciona a los investigadores la posibilidad de investigar una amplia variedad de propiedades y su función biológica global. Las tecnologías de modificación y marcaje de proteínas abarcan la adición de fluoróforos, biotina y otras moléculas pequeñas, para examinar las interacciones proteína-proteína y el plegamiento de las proteínas para investigar la estructura global de la proteína y su función biológica.

Marcaje fluorescente de proteínas

El descubrimiento y la incorporación generalizada de la proteína verde fluorescente (GFP) es un ejemplo potente de esta tecnología. La GFP y sus moléculas homólogas han tenido un enorme impacto en numerosos campos de estudio y en nuestra comprensión de los procesos biológicos. Por ejemplo, la incorporación de etiquetas fluorescentes en los anticuerpos permite la detección y la cuantificación de complejos proteicos enormemente específicos en los tejidos o la inmovilización direccional de los complejos anticuerpo-proteína para aplicaciones de ELISA y de inmunoelectrotransferencia. Sin embargo, una desventaja significativa de utilizar GFP es que la función de la proteína puede verse alterada por la incorporación de más etiquetas proteicas de este tamaño. Para esquivar esta dificultad, los investigadores pueden utilizar etiquetas fluorescentes más pequeñas que las GFP, como la biotina, o incorporar aminoácidos no naturales que contengan funcionalidad biortogonal.