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Système pour PCR GC-RICH

sufficient for ≤50 reactions, pkg of 100 U, optimum reaction temp. 72 °C

• Synonyme(s) : Système pour PCR GC-RICH, riche en GC | PCR
• Code UNSPSC : 41106300

Propriétés

• Utilisation: sufficient for ≤50 reactions
• Niveau de qualité: 100
• Conditionnement: pkg of 100 U
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Paramètres: 72 °C optimum reaction temp.
• Technique(s): PCR: suitable
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Le Système pour PCR GC-RICH est constitué d′un mélange enzymatique associant de l′ADN Taq polymérase thermostable et de l′ADN Tgo polymérase, une enzyme thermostable présentant une activité de correction (3′-5′ exonucléase). Le mélange de polymérases surpasse à lui seul l′ADN Taq polymérase en termes de rendement, de fidélité et de spécificité, en plus de sa capacité à amplifier les fragments faisant jusqu′à 5 kb de long. Le Tampon réactionnel pour PCR GC-RICH, associé à la Solution de résolution GC-RICH incluse séparément, permet d′amplifier de manière extrêmement efficace les matrices complexes telles que les cibles riches en GC. Il est recommandé de procéder à un clonage TA. Le mélange enzymatique produit davantage de fragments à extrémités franches que l′ADN Taq polymérase. La majorité des produits possèdent des extrémités sortantes A. Utilisez 2 U pour une PCR standard de 50 μl.

Contenu

• Mélange enzymatique GC-RICH, dans un tampon de conservation
• Tampon réactionnel GC-RICH, concentré 5x, avec MgCl2 7,5 mM et DMSO
• Solution de résolution GC-RICH, 5 M
• Solution mère de MgCl2, 25 mM
• Eau, de qualité « PCR »

Application

Le Système pour PCR GC-RICH a été utilisé dans l′analyse semi‐quantitative, le génotypage, la récupération et le clonage d′une séquence à haute teneur en GC d′un gène candidat.

Le Système pour PCR GC-RICH, constitué d′un mélange d′ADN Taq polymérase et d′une polymérase de correction, permet d′amplifier les matrices qui sont difficiles voire impossibles à amplifier avec d′autres polymérases ou mélanges de polymérases. La capacité de traitement accrue du mélange, combinée à la Solution de résolution GC-RICH unique en son genre, permet d′obtenir de très belles performances, tout particulièrement avec les matrices problématiques.
Le Système pour PCR GC-RICH peut également être utilisé dans les applications de PCR standard ; il fournit alors de meilleurs résultats (rendement et exactitude accrus) que l′ADN Taq polymérase seule.

Avantages du Système pour PCR GC-RICH :

• Facilité d′accès aux matrices difficiles à amplifier, notamment les cibles riches en GC et les séquences répétitives.
• Fourniture des réactifs, de la Solution de résolution GC-RICH et de l′eau de qualité « PCR ».
• Amplification de fragments d′ADN allant jusqu′à 5 kb.

Caractéristiques et avantages

Le Système pour PCR GC-RICH est un mélange constitué d′ADN Taq polymérase et d′une polymérase de correction permettant d′amplifier les longs fragments d′acides nucléiques. La Solution GC-RICH permet d′amplifier tous les types de produits de PCR difficiles à amplifier.
L′ajout du tampon contenant du magnésium joint au coffret aboutit à une concentration finale de MgCl2 de 1,5 mM.

Le mélange constitué d′ADN Taq polymérase et d′une polymérase de correction permet d′amplifier les matrices difficiles. Sa capacité de traitement accrue, combinée à la Solution de résolution GC-RICH unique en son genre, permet d′obtenir de très belles performances.

• PCR
• Matrices difficiles à amplifier allant jusqu′à 5 kb.

Utilisez le Système pour PCR GC-RICH, dNTPack avec le Mélange de nucléotides pour PCR prêt à l′emploi.

Conditionnement

1 kit constitué de 5 éléments

Qualité

La fonction du Système pour PCR GC-RICH est testée en amplifiant un fragment génomique d′ApoE humaine de 284 pb selon les protocoles du Système pour PCR GC-RICH.

Définition de l'unité

Activité volumique : 2 U/μl

Notes préparatoires

Concentration de travail : Concentration enzymatique
La concentration enzymatique optimale varie de 0,5 à 5 U par réaction. Pour une PCR standard de 50 μl, nous vous recommandons d′utiliser 2 U du mélange enzymatique.

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

L'utilisation de ce produit est protégée par le brevet américain n° 6 127 155 et les revendications des brevets correspondants en dehors des États-Unis.  L′achat de ce produit inclut une immunité limitée et non transférable contre les poursuites dans le cadre des revendications des brevets susmentionnés concernant l′utilisation de cette seule quantité de produit pour les propres recherches internes de l′acheteur.  Aucun droit en vertu d′une autre revendication de brevet et aucun droit d′assurer des services commerciaux de toute nature que ce soit, notamment, mais sans caractère limitatif, la communication des résultats des activités de l'acheteur contre rémunération ou une autre considération commerciale, n'est transmis expressément, par implication ou par préclusion.  Ce produit est réservé aux activités de recherche. Les utilisations diagnostiques humaines et vétérinaires protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l′octroi d′une autre licence par Roche.  Toutes les utilisations autres que la recherche interne et les utilisations diagnostiques humaines et vétérinaires protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l′octroi d′une autre licence par Thermo Fisher Scientific. Pour de plus amples informations sur l′achat de licences auprès de Roche, contactez le service d'attribution des licences : Roche Molecular Systems, Inc., Licensing Department, 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA ou de Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Allemagne.  Pour de plus amples informations sur l′achat de licences auprès de Thermo Fisher Scientific, contactez le service d'attribution des licences : Thermo Fisher Scientific, Licensing Department, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, Californie 92008, USA.

Composants de kit seuls

• GC-RICH Enzyme Mix, in storage buffer
• GC-RICH PCR Reaction Buffer, with 7.5 mM MgCl₂ and DMSO 5x concentrated
• GC-RICH Resolution Solution 5 M
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• Water, PCR Grade

Informations sur la sécurité

• Mentions de danger: H412
• Conseils de prudence: P273 - P501
• Classification des risques: Aquatic Chronic 3
• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 2
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash