SCM133

Solution de dispase II PluriSTEM^®

Dispase-II has proven to be a rapid and effective, yet gentle, agent for separating many tissues and cells grown in vitro.

• Synonyme(s) : Dispase, Dispase 2
• Code UNSPSC : 12352204
• eCl@ss : 32160801
• Nomenclature NACRES : NA.75

Propriétés

• Niveau de qualité: 100
• Forme: liquid
• Fabricant/nom de marque: PluriSTEM^®
• Concentration: 1 mg/mL in sterile DMEM/F-12
• Technique(s): cell culture | mammalian: suitable; cell culture | stem cell: suitable
• Conditions d'expédition: dry ice

Description

Description générale

Les enzymes protéolytiques comme la trypsine, la collagénase et la pronase sont couramment utilisées pour disperser les tissus et les cellules. Cependant, ces enzymes endommagent souvent les cellules, sont instables durant l'incubation, peuvent être hétérogènes et peuvent constituer une source de contamination par des mycoplasmes. La dispase II est employée dans la préparation de cellules provenant d'un vaste éventail de tissus et organes. La dispase II s'est avérée être un agent de dissociation rapide, efficace mais doux pour de nombreux tissus et cellules cultivés in vitro. La dispase est particulièrement adaptée aux procédures de désagrégation et de repiquage des tissus, car elle n'endommage pas les membranes cellulaires.

La dispase II PluriSTEM a été validée en association avec le milieu PluriSTEM pour cellules CSE/CSPi humaines (SCM130) pour la culture et le repiquage des cellules souches embryonnaires et des cellules souches pluripotentes induites humaines.

La dispase II est produite dans Bacillus polymyxa.

Application

Domaine de recherche
Recherche sur les cellules souches

Il revient à l'utilisateur final de déterminer la technique de repiquage optimale. Elle varie en fonction du type de cellule et des conditions de culture.

1. Enduire des plaques à 6 puits avec un produit d'enduction Matrigel dilué au 1/20e (1,5 ml par puits). Incuber toute une nuit entre 2 et 8 ºC ou enduire à température ambiante pendant au moins 30 minutes à 1 heure avant utilisation.
2. Retirer le produit d'enduction Matrigel. Ajouter 2 ml de milieu complet dans chaque puits.
3. Retirer les zones de différenciation au sein de la culture.
4. Aspirer le milieu.
5. Laver avec 2 ml de PBS.
6. Ajouter 1,5 ml de dispase II dans chaque puits. Incuber à 37 ºC pendant 7 minutes.
7. Laver à 2 reprises avec 2 ml de PBS, sans Mg ou Ca.
8. Ajouter 2 ml de milieu complet dans chaque puits, puis détacher les colonies à l'aide d'un grattoir de cellules.
9. Recueillir les cellules détachées dans un tube conique de 15 ml.
10. Centrifuger à 800 t/min pendant 5 minutes.
11. Remettre les cellules en suspension dans un volume approprié de milieu complet. Le rapport est typiquement de 1/5 – 1/6 en fonction de la densité cellulaire. Les cellules devraient être prêtes à être repiquées sous 5-6 jours avec du milieu PluriSTEM pour cellules CSE/CSPi humaines.

Sous-domaine de recherche
Enzymes et biochimie

Qualité

La solution est rouge et exempte de particules. Elle est stérile et convient aux applications de culture cellulaire.

Forme physique

Le produit se présente dans du DMEMF12 stérile à 1 mg/ml. Il a été filtré avec un filtre de 0,2 µm avant congélation.

Le produit se présente dans du DMEMF12 stérile à 1 mg/ml. Il a été filtré avec un filtre de 0,2 µm avant congélation.
La dispase II est produite dans Bacillus polymyxa.

Stockage et stabilité

À conserver à -20 °C pendant 4 mois maximum à compter de la date de réception. Après décongélation, diviser en aliquotes de plus petit volume, et les conserver à -20 ºC. Éviter les congélations/décongélations répétées afin de conserver une activité enzymatique correcte.

Informations légales

PLURISTEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

Sauf indication contraire dans notre catalogue ou toute autre documentation associée au(x) produit(s), nos produits sont uniquement destinés à la recherche et ne sauraient être utilisés à d'autres fins, ce qui inclut, sans s'y limiter, les utilisations commerciales non autorisées, les utilisations diagnostiques in vitro, les utilisations thérapeutiques ex vivo ou in vivo, ou tout type de consommation ou d'application chez l'être humain ou chez l'animal.

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable