CSTVRS
shRNA MISSION®
Custom Lentiviral Particles
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Acerca de este artículo
UNSPSC Code:
41106609
Technique(s):
capture ELISA: 106 VP/mL using p24
Quality Segment
form
liquid
technique(s)
capture ELISA: 106 VP/mL using p24
shipped in
dry ice
storage temp.
−70°C
General description
Nuestra completa oferta de productos shRNA (horquillas pequeñas de ARN) constan de más de 150 000 constructos de shRNA preclonados dirigidos a más de 15 000 genes humanos y 15 000 genes de ratón. Disponemos de una genoteca compuesta por conjuntos de familias de genes: colecciones de genes relacionadas con clases funcionales específicas, como las cinasas y los canales iónicos; conjuntos de genes específicos, conjuntos de clones de shRNA que se dirigen a su gen favorito; y clones de shRNA individuales. En nuestras plataformas de fabricación de shRNA y lentivirus se utilizan laboratorios específicos con sistemas robóticos de última generación, sistemas de manejo de la información del laboratorio (LIMS) y de manipulación de líquidos para proporcionar calidad y servicios superiores para sus requisitos de investigación con ARN de interferencia.
Proporcionamos soluciones innovadoras para investigación académica, investigación en biotecnología y descubrimiento de medicamentos. Nuestros excelentes sistemas, equipo y personal proporcionan las herramientas de mayor calidad que usted precisa.
Clonación personalizada - Ahora con TurboGFP™
Puede haber ocasiones en las que seleccionar fármacos clásicos para líneas celulares estables o semiestables no es ni posible ni deseable. Además, pueden requerirse métodos ortogonales de selección de la puromicina para la expresión de shRNA múltiples o la expresión de shRNA concomitante con expresión transgénica
Ahora ofrecemos vectores que contienen tGFP como una solución a estos problemas. Este vector conserva todos los demás elementos del vector pLKO.1, pero el gen de resistencia a la puromicina ha sido sustituido por TurboGFP. Nuestro equipo de bioproducción MISSION personalizará el vector con una secuencia shRNA del TRC o con la secuencia de shRNA que usted prefiera. Con TurboGFP en el vector, las técnicas de análisis mediante citometría de flujo (FACS) y de microscopia de fluorescencia permiten una estimación rápida de la eficiencia de la transducción y una selección automática y rápida de las poblaciones celulares que expresen de forma estable el shRNA. La selección por GFP proporciona un método ortogonal cuando las células expresan ya establemente resistencia a la puromicina. Además, ofrecemos también pLKO.1-puro-CMV-tGFP. Con este vector, podrá elegir entre selección de GFP y de puromicina, todo con el vector de expresión de shRNA.
Para la selección por una segunda clase de antibióticos, ofrecemos vectores que contienen el gen de resistencia a la neomicina. Estos dos vectores son pLKO.1-hPGK-Neo y pLKO.1-CMV-Neo. Pueden encontrarse integrantes shRNA estables mediante selección en G418 (referencia A1720). Como ocurre con la puromicina, habrá que generar un perfil citotóxico para su línea celular concreta. Como ejemplo, vea el protocolo de la puromicina pero utilice G418 en vez de puromicina. Como punto de partida, se ha utilizado 1 mg/ml de G418 para la selección de constructos de shRNA en células A549.
El servicio consta de clonación, secuenciación, preparación del ADN (500 ng) y preparación de lentivirus (200 μl a 1 × 106 VP/ml, valor mínimo a través del ensayo p24). Las preparaciones vírica y de ADN estarán disponibles en 4-6 semanas desde el momento en el que se realice el pedido. Para hacer el pedido, visite nuestra página de servicios personalizados de shRNA o póngase en contacto con su representante de ventas.
Partículas lentivirales a gran escala y elevada concentración
Disponemos de una plataforma de fabricación versátil para la producción vírica de gran rendimiento o a gran escala de la mayoría de los vectores lentivirales basados en el VIH-1. El formato estándar de la colección de shRNA del TRC MISSION es de 200 μl de un valor mínimo de 1 × 106 VP/ml (a través del ensayo p24). Pueden producirse mayores volúmenes de cualquier clon, conjunto específico o control con la misma especificación de cantidad mínima o en cantidades superiores. Nuestra opción de mayor valor es 109 VP/ml. También nos adaptamos a la preparación vírica a gran escala y de valor elevado utilizando los clones que nos envíen ustedes (deben ser compatibles con nuestro sistema). Nuestros procesos robustos y optimizados le ahorrarán tiempo y reducirán la variabilidad en sus experimentos de transducción. Para conocer los precios o enviar una solicitud de presupuesto para su proyecto específico, utilice nuestro formulario de envío de solicitud MISSION personalizado.
Clonación personalizada - Ahora con TurboGFP™
Puede haber ocasiones en las que seleccionar fármacos clásicos para líneas celulares estables o semiestables no es ni posible ni deseable. Además, pueden requerirse métodos ortogonales de selección de la puromicina para la expresión de shRNA múltiples o la expresión de shRNA concomitante con expresión transgénica
Ahora ofrecemos vectores que contienen tGFP como una solución a estos problemas. Este vector conserva todos los demás elementos del vector pLKO.1, pero el gen de resistencia a la puromicina ha sido sustituido por TurboGFP. Nuestro equipo de bioproducción MISSION personalizará el vector con una secuencia shRNA del TRC o con la secuencia de shRNA que usted prefiera. Con TurboGFP en el vector, las técnicas de análisis mediante citometría de flujo (FACS) y de microscopia de fluorescencia permiten una estimación rápida de la eficiencia de la transducción y una selección automática y rápida de las poblaciones celulares que expresen de forma estable el shRNA. La selección por GFP proporciona un método ortogonal cuando las células expresan ya establemente resistencia a la puromicina. Además, ofrecemos también pLKO.1-puro-CMV-tGFP. Con este vector, podrá elegir entre selección de GFP y de puromicina, todo con el vector de expresión de shRNA.
Para la selección por una segunda clase de antibióticos, ofrecemos vectores que contienen el gen de resistencia a la neomicina. Estos dos vectores son pLKO.1-hPGK-Neo y pLKO.1-CMV-Neo. Pueden encontrarse integrantes shRNA estables mediante selección en G418 (referencia A1720). Como ocurre con la puromicina, habrá que generar un perfil citotóxico para su línea celular concreta. Como ejemplo, vea el protocolo de la puromicina pero utilice G418 en vez de puromicina. Como punto de partida, se ha utilizado 1 mg/ml de G418 para la selección de constructos de shRNA en células A549.
El servicio consta de clonación, secuenciación, preparación del ADN (500 ng) y preparación de lentivirus (200 μl a 1 × 106 VP/ml, valor mínimo a través del ensayo p24). Las preparaciones vírica y de ADN estarán disponibles en 4-6 semanas desde el momento en el que se realice el pedido. Para hacer el pedido, visite nuestra página de servicios personalizados de shRNA o póngase en contacto con su representante de ventas.
Partículas lentivirales a gran escala y elevada concentración
Disponemos de una plataforma de fabricación versátil para la producción vírica de gran rendimiento o a gran escala de la mayoría de los vectores lentivirales basados en el VIH-1. El formato estándar de la colección de shRNA del TRC MISSION es de 200 μl de un valor mínimo de 1 × 106 VP/ml (a través del ensayo p24). Pueden producirse mayores volúmenes de cualquier clon, conjunto específico o control con la misma especificación de cantidad mínima o en cantidades superiores. Nuestra opción de mayor valor es 109 VP/ml. También nos adaptamos a la preparación vírica a gran escala y de valor elevado utilizando los clones que nos envíen ustedes (deben ser compatibles con nuestro sistema). Nuestros procesos robustos y optimizados le ahorrarán tiempo y reducirán la variabilidad en sus experimentos de transducción. Para conocer los precios o enviar una solicitud de presupuesto para su proyecto específico, utilice nuestro formulario de envío de solicitud MISSION personalizado.
Other Notes
Para solicitar cualquiera de nuestros servicios de shRNA personalizados puede visitar custom shRNA services o enviarnos un correo electrónico a [email protected].
Para ver los protocolos y los datos de aplicación, visite sigma.com/shrna.
Legal Information
La utilización de este producto está sujeta a uno o más acuerdos de licencia.
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TurboGFP is a trademark of Evrogen Co.
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Clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
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Not applicable
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Not applicable
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