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Proteinasa K from Tritirachium album

• Sinónimos: Endopeptidasa K
• Número CAS: 39450-01-6
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.21
• Número CE: 3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00132129
• eCl@ss: 32160703
• Specific activity: ≥30 mAnson units/mg dry wt, ≥40 mAnson units/mg protein

Propiedades

• form: lyophilized solid
• Quality Segment: 400
• specific activity: ≥30 mAnson units/mg dry wt, ≥40 mAnson units/mg protein
• mol wt: 28.93 kDa
• manufacturer/tradename: Calbiochem^®
• storage condition: OK to freeze
• color: white
• solubility: 50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0: soluble
• foreign activity: DNase, none detected (nicking activity with pBR322, incubation for 6 h at 37°C), RNase, none detected (ribonuclease activity with MS2 RNA detected after incubation for 6 h at 37°C)
• shipped in: ambient
• storage temp.: 2-8°C

Descripción

General description

Serine protease that exhibits strong proteolytic activity on a wide variety of denatured and native proteins of high molecular weight. Because of its rapid proteolytic inactivation of endogenous nucleases, it can be used for isolation of mRNA and high molecular weight DNA. Preferentially cleaves bonds next to the carbonyl group of N-substituted hydrophobic, aliphatic, and aromatic amino acids. Inhibited by DFP, Hg²⁺, and PMSF. Not inactivated by metal chelators, sulfhydryl reagents, TLCK, or TPCK.

Application

Útil para la inactivación proteolítica de nucleasas durante el aislamiento de ADN y ARN.

Útil para la inactivación proteolítica de nucleasas durante el aislamiento de ADN y ARN.
Elimina las endotoxinas que se unen a las proteínas catiónicas como la lisozima y la ribonucleasa A.
Se ha comunicado que es útil para el aislamiento de mitocondrias hepáticas, de levadura y de frijol mung
Determinación de la localización de las enzimas en las membranas
Tratamiento de cortes de tejido incluidos en parafina para exponer los sitios de unión de antígenos para el marcado con anticuerpos.
Digestión de proteínas de muestras de tejido cerebral para investigación de los priones en las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET).

Biochem/physiol Actions

La proteinasa K es una serín proteasa estable y muy reactiva. La evidencia procedente de estudios de la estructura cristalina y molecular indica que la enzima pertenece a la familia subtilisina con una tríada catalítica en el sitio activo (ASP³⁹-HIS⁶⁹-ser²²⁴). Es estable en una amplia variedad de entornos: pH, sales amortiguadoras, detergentes (SDS) y temperatura. En presencia de SDS al 0,1 - 0,5 %, la proteinasa K conserva su actividad y digerirá una variedad de proteínas y nucleasas en preparaciones de ADN sin comprometer la integridad del ADN aislado.

Physical form

Lyophilized from calcium acetate

Preparation Note

Following reconstitution, store in the refrigerator (4°C). Stock solutions prepared in 50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0 are stable for up to 1 year at 4°C.

Other Notes

One mAnson unit is defined as the amount of enzyme that will liberate 1.0 µmol of Folin-positive amino acids (calculated as tyrosine) per min at 37°C, pH 7.5.

Watazu, Y., et al. 1993. J. Lab. Clin. Anal. 7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.

Legal Information

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toxicity: Irritant (B)

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palabra de advertencia: Danger
• Códigos de peligro: H315,H319,H334,H335
• Indicaciones de precaución: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos diana: Respiratory system
• Clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Punto de inflamación (°F): Not applicable
• Punto de inflamación (°C): Not applicable