SYBR Green qPCR is utilized to determine the relative silencing effect of specific shRNAs. The term "validated" refers to shRNA sequences that have been tested and confirmed effective in silencing. This validation involves testing in specific cell lines and measuring the mean knockdown level through lentiviral transduction. The evaluation of knockdown is conducted by measuring mRNA transcript levels post-lentiviral transduction with SYBR Green qPCR and comparing these levels to those achieved with the MISSION pLKO.1-puro Control Transduction Particles (SHC001V). For instance, a mean knockdown level of 0.90 indicates a 90% reduction at the mRNA level. Typically, validation does not extend to the protein level, as the primary target of shRNA is mRNA expression, which subsequently influences protein expression.
SHCLND
shRNA MISSION®
Purified DNA
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Informazioni su questo articolo
UNSPSC Code:
41106609
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General description
La nostra vasta offerta di prodotti shRNA comprende oltre 150.000 costrutti di shRNA pre-clonati mirati a oltre 15.000 geni umani e 15.000 geni murini. La libreria è disponibile in: set di famiglie di geni; raccolte di geni correlate a specifiche classi funzionali quali le chinasi e i canali ionici; set di bersagli genetici; set di cloni di shRNA mirati al gene preferito e cloni di shRNA individuali. La nostra piattaforma di produzione di shRNA e lentivirus utilizza laboratori dedicati, dotati di apparecchi robotici e sistemi avanzati per la manipolazione dei liquidi e la gestione delle informazioni di laboratorio (LIMS), per fornire un livello superiore di qualità e assistenza per ogni esigenza di ricerca in ambito RNAi.
Il DNA plasmidico purificato MISSION® TRC shRNA elimina le difficoltà nella preparazione del DNA da ogni struttura. Il DNA può essere usato direttamente per transfezione transitoria o stabile. Inoltri questi plasmidi possono essere combinati con plasmidi di packaging in una linea cellulare di packaging per produrre particelle lentivirali. 1 μg di DNA viene fornito per ciascuna struttura nel set target.
Application
MISSION® shRNA è stato usato:
- nella realizzazione del knockdown
- di ZO-1 (zonula occludens-1) per abbattere l′espressione di LIF (fattore inibitorio della leucemia) nel modello isogeno MCF 10
- per abbattere il fattore nucleare eritroide 2 come 1, nelle β-cellule pancreatiche n MIN6
Other Notes
Per visionare i protocolli e i dati applicativi, visitare sigma.com/shrna.
Legal Information
L′utilizzo di questo prodotto è soggetto a uno o più contratti di licenza.
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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| description Purified DNA | description Bacterial Stock | description Custom Lentiviral Particles | description Lentiviral Particles |
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How is the knockdown measured for validated shRNA clones?
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