N8630

Nucleasi P₁

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

• Sinonimo/i: 3′-fosfoidrolasi, Nucleasi 5′-nucleoside idrolasi, Endonucleasi P₁
• Numero CAS: 54576-84-0
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• Numero CE: 3.1.30.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00131010
• Specific activity: ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)
• Biological source: Penicillium citrinum

Proprietà

• biological source: Penicillium citrinum
• Quality Segment: 200
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)
• secondary activity: ≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase
• mol wt: 42-50 kDa
• packaging: vial of ≥250 units (using RNA substrate)
• technique(s): DNA extraction: suitable, DNA purification: suitable
• suitability: suitable for molecular biology
• application(s): cell analysis
• storage temp.: 2-8°C

Descrizione

General description

La nucleasi P1 è una delle nucleasi specifiche per singolo filamento più note in biologia molecolare. È un′endonucleasi specifica per singolo filamento (di ssDNA o ssRNA). La nucleasi P1 può anche scindere le regioni a singolo filamento degli acidi nucleici a doppio filamento.
La nucleasi P1 da Penicillium citrinum è un′endonucleasi zinco-dipendente che mostra un′aumentata attività in presenza di basse concentrazioni di urea. L′attività selettiva della nucleasi P1 si è rivelata utile negli studi sulla struttura degli acidi nucleici.

Una glicoproteina zinco-dipendente composta da 270 residui di amminoacidi. Massa molecolare: 42-50 kDa.

Application

• La nucleasi P1 consente la scissione del DNA o RNA a singolo filamento in mononucleotidi 5′.
• La nucleasi P1 è utile nella ricerca sul danneggiamento e la modificazione del DNA.
• La nucleasi P1 può essere utilizzata per analizzare la composizione e la struttura delle basi degli acidi nucleici.
• La nucleasi P1 viene utilizzata storicamente per la produzione industriale di mononucleotidi 5′ dall′RNA del lievito.
• La nucleasi P1 può essere utilizzata per rimuovere gli acidi nucleici mediante la purificazione proteica.
• La nucleasi P1 è un reagente importante per lo sviluppo di metodi per lo studio della biosintesi degli amminoacidi e della transamidazione t-RNA dipendenti.
• La nucleasi P1 da Penicillium citrinum è stata utilizzata in uno studio per valutare le strutture cristalline utilizzando il solfato di ammonio o il polietilenglicole 4000 come agente di precipitazione.
• La nucleasi P1 è stata adoperata in uno studio per indagare un metodo per l′analisi di sequenza diretta di 20-25 nucleotidi ricavati dai terminali dell′RNA marcato con gruppo terminale 5′ o 3′.
• La nucleasi P1 è stata utilizzata per migliorare la sensibilità di un metodo di marcatura 32P per il rilevamento degli addotti del DNA.

L′enzima ha una temperatura ottimale di circa 70 °C, ma per una lunga incubazione è preferibile una temperatura inferiore a 60 °C. È stabile entro un range del pH di 5-8.

L′enzima ha una temperatura ottimale di circa 70 °C, ma per una lunga incubazione è preferibile una temperatura inferiore a 60 °C. È stabile entro un range del pH di 5-8.

Biochem/physiol Actions

Catalizza la scissione endonucleolitica non specifica del DNA e dell′RNA a singolo filamento per produrre nucleosidi 5′-fosfato e oligonucleotidi 5′ fosforilati. Non degrada apprezzabilmente gli acidi nucleici a doppio filamento, specialmente in presenza di oltre 400 mM di cloruro di sodio con pH 6,0.

Features and Benefits

La nostra nucleasi P1 altamente attiva è stata testata per l′attività di 3′- e 5′-fosfodiesterasi e per l′attività di 3′-nucleotidasi ed è la nucleasi P1 più attiva del mercato.

Other Notes

3′-5′-fosfodiesterasi: Un′unità libera 1,0 μmole di nucleotidi solubili in acido da RNA in un minuto a pH 5,3 e 37 °C.
3′-nucleotidasi: Un′unità idrolizza 1,0 μmole di ortofosfato da 3′-AMP in un minuto a pH 7,2 e 37 °C.

Informazioni sulla sicurezza

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)