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10 mL | Per conoscere la disponibilità, visualizza il carrello | CHF 546.00 |
Informazioni su questo articolo
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
Biological source:
animal (Helix pomatia)
CHF 151.00
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Servizio Tecnico
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Permettici di aiutartibiological source
animal (Helix pomatia)
form
solution
packaging
pkg of 10 mL (10127698001), pkg of 2 mL (10127060001)
manufacturer/tradename
Roche
technique(s)
ELISA: suitable
color
colorless to brown
optimum pH
4.5-5.0
solubility
water: miscible
application(s)
life science and biopharma
sample preparation
storage temp.
2-8°C
General description
βLa β-glucuronidasi/arilsolfatasi da Helix pomatiais è la preparazione enzimatica con attività solfatasica più utilizzata e possiede una specificità molto ampia. È una miscela grezza di enzimi e la sua preparazione non comporta alcun tipo di separazione cromatografica. Questa preparazione possiede attività glucuronidasica e solfatasica. L'idrolisi enzimatica prima del rilevamento è essenziale per raggiungere un'elevata sensibilità durante l'analisi. Dopo l′idrolisi il campione può essere analizzato mediante spettroscopia di massa, gascromatografia, HPLC o saggi immunologici. Per l′analisi antidoping l′attività solfatasica è essenziale, insieme all′attività glucuronidasica, per il rilevamento di tutti i coniugati delle sostanze psicoattive presenti nel campione. La β-glucuronidasi/arilsolfatasi è utilizzata anche per l'idrolisi enzimatica dei glucuronidi e degli esteri del solfato nei fluidi biologici e principalmente nelle urine.
Application
βLa β-glucuronidasi/arilsolfatasi è stata ampiamente utilizzata nella ricerca e nei laboratori analitici per l'idrolisi enzimatica simultanea degli steroidi β-glucuronidi e degli esteri del solfato. L'enzima viene utilizzato durante la preparazione del campione per scindere i glucuronidi e gli esteri del solfato prima dell′analisi mediante GC-MS e HPLC, dei saggi immunologici o di altri metodi analitici, inclusa l′analisi antidoping e l′idrolisi degli steroidi coniugati (glucuronidi) e degli esteri del solfato nelle urine e in altri fluidi corporei.
Biochem/physiol Actions
β-La glucuronidasi/arilsolfatasi mostra un′ampia specificità nei confronti di molti tipi di β-glucuronidi ed esteri del solfato.
Specificità della β-glucuronidasi:
I glicosidi che l′acido β-D-glucuronico forma con una serie di composti contenenti gruppi idrossilici idrolizzano rapidamente in presenza di β-glucuronidasi.
βLa β-glucuronidasi possiede un′elevata specificità sul versante dei carboidrati: non vengono idrolizzati né i α-glucosidi né gli acidi β-glucosiduronici. Tuttavia, la natura del residuo collegato al residuo dell′acido β-glucuronico non ha quasi nessuna importanza.
Attività specifica: 5,5 U/mL a +38 °C con fenolftaleina-β-glucuronide come substrato (4,5 U/mL a +25 °C con 4-nitro-fenil-β-D-glucuronide come substrato = 100.000 unità Fishman/mL a +38 °C con fenolftaleina-β-glucuronide come substrato). 1 unità Fishman rilascia 1 μg di fenolftaleina da fenolftaleina-β-glucuronide in 1 ora a +38 °C.
Specificità dell′arilsolfatasi:
Gli esteri del solfato di molti fenoli sono idrolizzati in presenza di arilsolfatasi. Per esempio, gli steroidi solfati come estronesolfato, 4-nitrofenil idrogeno solfato (Km = 1,8 mM, pH 7,3), 4-nitro-pirocatecolo 2-solfato (Km = 1,25 mM, pH 7,5) e fenolftaleina disolfato.
Attività specifica: 2,6 U/mL a +38 °C con fenolftaleina disolfato come substrato (14 U/mL a +25 °C con 4-nitrofenil solfato come substrato = 800.000 unità Roy/mL a +38 °C con 2-idrossi-5-nitrofenil solfato come substrato). 1 unità Roy rilascia 1 μg di 2-idrossi-5-nitrofenil solfato in 1 ora a +38 °C.
Specificità della β-glucuronidasi:
I glicosidi che l′acido β-D-glucuronico forma con una serie di composti contenenti gruppi idrossilici idrolizzano rapidamente in presenza di β-glucuronidasi.
- Tali composti includono steroidi, come estriolo (Km = 0,42 mM, pH 4,5), androsterone, pregnanediolo, tetraidrocortisone,
- fenoli, come fenolftaleina (Km = 0,39 mM), 4-nitro-fenol, 4-metilumbelliferone,
- farmaci come cloramfenicolo e tetraidrocannabinoli,
- e metaboliti come tiroxina e bilirubina.
βLa β-glucuronidasi possiede un′elevata specificità sul versante dei carboidrati: non vengono idrolizzati né i α-glucosidi né gli acidi β-glucosiduronici. Tuttavia, la natura del residuo collegato al residuo dell′acido β-glucuronico non ha quasi nessuna importanza.
Attività specifica: 5,5 U/mL a +38 °C con fenolftaleina-β-glucuronide come substrato (4,5 U/mL a +25 °C con 4-nitro-fenil-β-D-glucuronide come substrato = 100.000 unità Fishman/mL a +38 °C con fenolftaleina-β-glucuronide come substrato). 1 unità Fishman rilascia 1 μg di fenolftaleina da fenolftaleina-β-glucuronide in 1 ora a +38 °C.
Specificità dell′arilsolfatasi:
Gli esteri del solfato di molti fenoli sono idrolizzati in presenza di arilsolfatasi. Per esempio, gli steroidi solfati come estronesolfato, 4-nitrofenil idrogeno solfato (Km = 1,8 mM, pH 7,3), 4-nitro-pirocatecolo 2-solfato (Km = 1,25 mM, pH 7,5) e fenolftaleina disolfato.
Attività specifica: 2,6 U/mL a +38 °C con fenolftaleina disolfato come substrato (14 U/mL a +25 °C con 4-nitrofenil solfato come substrato = 800.000 unità Roy/mL a +38 °C con 2-idrossi-5-nitrofenil solfato come substrato). 1 unità Roy rilascia 1 μg di 2-idrossi-5-nitrofenil solfato in 1 ora a +38 °C.
Specificità della β-glucuronidasi:
I glicosidi che l′acido β-D-glucuronico forma con una serie di composti contenenti gruppi idrossilici idrolizzano rapidamente in presenza di β-glucuronidasi.
βLa β-glucuronidasi possiede un′elevata specificità sul versante dei carboidrati: non vengono idrolizzati né i α-glucosidi né gli acidi β-glucosiduronici. Tuttavia, la natura del residuo collegato al residuo dell′acido β-glucuronico non ha quasi nessuna importanza.
Specificità dell′arilsolfatasi:
Gli esteri del solfato di molti fenoli sono idrolizzati in presenza di arilsolfatasi. Per esempio, gli steroidi solfati come estronesolfato, 4-nitrofenil idrogeno solfato (Km = 1,8 mM, pH 7,3), 4-nitro-pirocatecolo 2-solfato (Km = 1,25 mM, pH 7,5) e fenolftaleina disolfato.
I glicosidi che l′acido β-D-glucuronico forma con una serie di composti contenenti gruppi idrossilici idrolizzano rapidamente in presenza di β-glucuronidasi.
- Tali composti includono steroidi, come estriolo (Km = 0,42 mM, pH 4,5), androsterone, pregnanediolo, tetraidrocortisone,
- fenoli, come fenolftaleina (Km = 0,39 mM), 4-nitro-fenol, 4-metilumbelliferone,
- farmaci come cloramfenicolo e tetraidrocannabinoli,
- e metaboliti come tiroxina e bilirubina.
βLa β-glucuronidasi possiede un′elevata specificità sul versante dei carboidrati: non vengono idrolizzati né i α-glucosidi né gli acidi β-glucosiduronici. Tuttavia, la natura del residuo collegato al residuo dell′acido β-glucuronico non ha quasi nessuna importanza.
Specificità dell′arilsolfatasi:
Gli esteri del solfato di molti fenoli sono idrolizzati in presenza di arilsolfatasi. Per esempio, gli steroidi solfati come estronesolfato, 4-nitrofenil idrogeno solfato (Km = 1,8 mM, pH 7,3), 4-nitro-pirocatecolo 2-solfato (Km = 1,25 mM, pH 7,5) e fenolftaleina disolfato.
La glucuronidazione è uno dei principi di base del metabolismo. La maggior parte delle sostanze con cui il corpo umano viene a contatto subisce un processo metabolico che include la coniugazione con acido glucuronico da parte delle UDP-glucuronosiltransferasi (UGT). Questo enzima catalizza il trasferimento di un gruppo glucuronilico a diverse molecole biologiche e farmacologicamente attive, sia endogene che esogene. Il glucuronide è in generale più solubile e meno tossico, oltre che più facilmente escreto dal corpo umano rispetto alla molecola originale.
Inoltre, può avere luogo la solfatazione del farmaco o della sostanza chimica per mezzo delle solfotransferasi presenti nel corpo umano. La solfatazione è, in generale, meno prevedibile della glucuronidazione dal momento che esistono molti isoenzimi delle solfotransferasi e vi sono differenze individuali nel rapporto tra glucuronidazione e solfatazione della sostanza.
Inoltre, può avere luogo la solfatazione del farmaco o della sostanza chimica per mezzo delle solfotransferasi presenti nel corpo umano. La solfatazione è, in generale, meno prevedibile della glucuronidazione dal momento che esistono molti isoenzimi delle solfotransferasi e vi sono differenze individuali nel rapporto tra glucuronidazione e solfatazione della sostanza.
Features and Benefits
- Effettua la deconiugazione e il rilevamento dei glucuronidi e degli esteri del solfato.
- Effettua un rapido screening di steroidi, benzodiazepine, cannabinoidi, oppioidi e altri farmaci.
Physical form
Soluzione in soluzione salina, stabilizzata
Preparation Note
Concentrazione di lavoro: In molte applicazioni il prodotto può essere diluito con acqua subito prima dell′uso, oppure impiegato non diluito.
Nota: La presente preparazione di β-glucuronidasi/arilsolfatasi è molto concentrata e per alcune applicazioni deve essere diluita. Inoltre, nella preparazione dei protoplasti si deve individuare empiricamente la concentrazione precisa da usare per un determinato ceppo di lievito.
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): Nota: Porzioni frazionate della preparazione diluita possono essere conservate tra -15 e -25 °C; non devono essere scongelate e ricongelate più di una o due volte e la conservazione a temperature inferiori non ne prolunga la durata oltre quella del prodotto mantenuto a 2-8 °C.
Nota: La presente preparazione di β-glucuronidasi/arilsolfatasi è molto concentrata e per alcune applicazioni deve essere diluita. Inoltre, nella preparazione dei protoplasti si deve individuare empiricamente la concentrazione precisa da usare per un determinato ceppo di lievito.
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): Nota: Porzioni frazionate della preparazione diluita possono essere conservate tra -15 e -25 °C; non devono essere scongelate e ricongelate più di una o due volte e la conservazione a temperature inferiori non ne prolunga la durata oltre quella del prodotto mantenuto a 2-8 °C.
Si raccomanda di evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento (non più di 2 volte).
Other Notes
Glucuronidasi:
Unità standard
L'unità standard dell'attività della β-glucuronidasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio del 4-nitrofenolo dall′acido 4-nitrofenil β-D-glucosiduronico, a una temperatura di +25 °C e a pH 4,5.
Unità di fenolftaleina
L'unità di fenolftaleina dell'attività della β-glucuronidasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio della fenolftaleina dall′acido fenoftaleina β-D-glucosiduronico, a una temperatura di +38 °C.
Circa 4,5 unità standard equivalgono a 5,5 unità di fenolftaleina.
Unità Fishman
L'unità Fishman dell'attività della β-glucuronidasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μg il tasso di rilascio della fenolftaleina dall′acido fenolftaleina β-D-glucosiduronico, a una temperatura di +38 °C.
Una unità standard equivale all′incirca a 22.000 unità Fishman (1 unità di fenolftaleina equivale a 19.000 unità Fishman).
Arilsolfatasi:
Unità standard
L'unità standard dell'attività dell′arilsolfatasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio del 4-nitrofenolo dal 4-nitrofenil solfato, a una temperatura di +25 °C e a pH 6,2.
Unità di fenolftaleina
L'unità di fenolftaleina dell'attività dell′arilsolfatasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio della fenolftaleina dalla fenolftaleina disolfato, a una temperatura di +38 °C e a pH 6,2.
Circa 5,4 unità standard equivalgono a 1 unità di fenolftaleina.
Unità Roy
L'unità Roy dell'attività dell′arilsolfatasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μg il tasso di rilascio del 4-nitropirocatecolo dal 2-idrossi-5-nitrofenil idrogeno solfato (4-nitropirocatecolo 2-solfato), a una temperatura di +38 °C e a pH 6,2.
Una unità standard equivale all′incirca a 57.000 unità Roy (1 unità di fenolftaleina equivale a 308.000 unità Roy).
Unità standard
L'unità standard dell'attività della β-glucuronidasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio del 4-nitrofenolo dall′acido 4-nitrofenil β-D-glucosiduronico, a una temperatura di +25 °C e a pH 4,5.
Unità di fenolftaleina
L'unità di fenolftaleina dell'attività della β-glucuronidasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio della fenolftaleina dall′acido fenoftaleina β-D-glucosiduronico, a una temperatura di +38 °C.
Circa 4,5 unità standard equivalgono a 5,5 unità di fenolftaleina.
Unità Fishman
L'unità Fishman dell'attività della β-glucuronidasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μg il tasso di rilascio della fenolftaleina dall′acido fenolftaleina β-D-glucosiduronico, a una temperatura di +38 °C.
Una unità standard equivale all′incirca a 22.000 unità Fishman (1 unità di fenolftaleina equivale a 19.000 unità Fishman).
Arilsolfatasi:
Unità standard
L'unità standard dell'attività dell′arilsolfatasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio del 4-nitrofenolo dal 4-nitrofenil solfato, a una temperatura di +25 °C e a pH 6,2.
Unità di fenolftaleina
L'unità di fenolftaleina dell'attività dell′arilsolfatasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μM il tasso di rilascio della fenolftaleina dalla fenolftaleina disolfato, a una temperatura di +38 °C e a pH 6,2.
Circa 5,4 unità standard equivalgono a 1 unità di fenolftaleina.
Unità Roy
L'unità Roy dell'attività dell′arilsolfatasi è rappresentata dall'attività enzimatica che aumenta di 1 μg il tasso di rilascio del 4-nitropirocatecolo dal 2-idrossi-5-nitrofenil idrogeno solfato (4-nitropirocatecolo 2-solfato), a una temperatura di +38 °C e a pH 6,2.
Una unità standard equivale all′incirca a 57.000 unità Roy (1 unità di fenolftaleina equivale a 308.000 unità Roy).
Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare in procedure diagnostiche.
EC 3.1.6.1 & 3.2.1.31
Classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
wgk
nwg
flash_point_f
No data available
flash_point_c
No data available
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