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Merck

TR-1013

Kit di trasfezione mRNA RiboJuice

Sinonimo/i:

RiboJuice

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Informazioni su questo articolo

UNSPSC Code:
12161503
NACRES:
NA.54
eCl@ss:
32161000
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Application

Il reagente per la trasfezione dell′mRNA RiboJuice è formulato specificamente per la veicolazione di specie di RNA di grandi dimensioni in cellule di mammifero con un'elevata efficienza e una bassa tossicità. Se utilizzato con la tecnologia di riprogrammazione a RNA Simplicon, questo reagente per la trasfezione dell'RNA aumenta l'efficienza della riprogrammazione IPS.

Features and Benefits

La trasfezione è il processo che permette di introduzione deliberatamente acidi nucleici nelle cellule per sovraesprimere un gene specifico. Storicamente i plasmidi di DNA sono stati il veicolo di elezione per la trasfezione; tuttavia, di recente la trasfezione mediata da RNA ha guadagnato popolarità in molte applicazioni come la biologia delle cellule staminali, lo sviluppo di vaccini e l'editing del genoma. I vantaggi dei metodi di trasfezione a RNA includono: rapidità di espressione, maggiore efficienza potenziale di trasfezione, capacità di espressione genica multipla, capacità di esprimere in tutti i tipi di cellule senza la necessità di promotori specifici per ogni tipo di cellula, minimo rischio di integrazione genomica e possibilità di analizzare gli effetti della sovraespressione genica in modo transitorio. Recentemente, la trasfezione dell'RNA ha acquisito un maggiore interesse a causa dell'emergere del sistema di editing genico CRISPR/Cas, che si basa sulla trasfezione di un filamento di RNA guida e della proteina CAS9.

Il reagente per la trasfezione dell'mRNA RiboJuice è formulato specificamente per la veicolazione di specie di RNA di grandi dimensioni nelle cellule di mammifero. Il kit è composto da 1) reagente di trasfezione dell'mRNA RiboJuice - una nuova miscela di polimeri cationici/lipidi non liposomiali e 2) reagente di potenziamento dell'mRNA RiboJuice. Entrambi i componenti sono necessari per formare un complesso con l'RNA per una veicolazione efficiente dell'RNA nel citoplasma cellulare. È stato dimostrato che l'mRNA di RiboJuice aumenta con successo l'efficienza della riprogrammazione se usato in combinazione con la tecnologia di riprogrammazione a RNA SIMPLICON® di EMD Millipore (N° Cat. SCR550).

Nota: per assicurarsi trasfezioni riuscite è necessario ottimizzare le condizioni di reazione. Per massimizzare l'efficienza di trasfezione dell'RNA, per ogni tipo di cellula occorre ottimizzare i seguenti parametri : densità cellulare, tailing dell'estremità 3' e capping dell'estremità 5' dell'RNA, livelli di purezza dell'RNA, quantità di RNA, volume dei reagenti RiboJuice, tempi di incubazione della trasfezione, terreni di trasfezione e condizioni di coltura cellulare.

Caratteristiche e vantaggi

  • Maggiore efficienza nella riprogrammazione delle iPSC: aumento di 5 volte della generazione di cellule IPS mediante metodi di riprogrammazione a RNA.
  • Veicolazione dell′RNA ad alta efficienza: consegue la veicolazione dell'RNA ad un'ampia popolazione di cellule assicurando così il successo della sperimentazione.
  • Bassi livelli di tossicità cellulare: tutela la densità cellulare e riduce le distorsioni sperimentali.
  • Compatibilità con il siero: condurre le trasfezioni in presenza di siero elimina la necessità di sostituire il terreno di coltura e tutela la salute delle cellule.
  • Prodotto non di origine animale: Nel processo di produzione di questo prodotto non vengono impiegati ingredienti di origine animale.

Analysis Note

  • La caratterizzazione fisica dei componenti reagenti finalizzata all′identificazione e alla determinazione del grado di purezza viene condotta mediante spettroscopia di massa (MS) ed NMR.
  • Il prodotto viene ispezionato visivamente per garantire che sia limpido e privo di particelle.s.
  • Per la produzione di questo prodotto non vengono impiegati ingredienti di origine animale.
  • Ogni lotto viene testato per l'efficienza di trasfezione dell'RNA mediante un saggio di luciferasi reporter utilizzando cellule CHO-K1. I nanogrammi totali di luciferasi per pozzetto (media dei pozzetti replicati) devono essere superiori a 20 ng per pozzetto in almeno due esperimenti separati.

Other Notes

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati

Legal Information

SIMPLICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany


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Danger

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Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2

Classe di stoccaggio

3 - Flammable liquids

wgk

WGK 1



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