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Merck

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SCT152

Doppio saggio della luciferasi di lucciola/Renilla

Flash-type dual luciferase assay that allows measurement of both Firefly and Renilla luciferase activity in the same sample with high sensitivity and linearity.

Sinonimo/i:

Firefly Luciferase Assay, Dual Luciferase Assay, Bioluminescent Assay

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NACRES:
NA.54
UNSPSC Code:
12352207

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technique(s)

cell based assay: suitable

detection method

chemiluminescent

shipped in

ambient

storage temp.

-65 to -96°C

General description

La luciferasi di lucciola è una proteina reporter molto usata per studiare la regolazione e la funzione genica e per lo screening di farmaci. Si tratta di un reporter genico molto sensibile, data l′assenza di attività luciferasica endogena nelle cellule o nei tessuti di mammifero. La luciferasi di Renilla è stata utilizzata come gene reporter per studiare la regolazione e la funzione dei geni in vitro e in vivo. Viene comunemente utilizzato in saggi multipli di reporter trascrizionali o come controllo di normalizzazione della trasfezione per i saggi della luciferasi di lucciola.

Il doppio saggio per la luciferasi di lucciola/Renilla consente di misurare l'attività della luciferasi di lucciola e di Renilla nello stesso campione con elevata sensibilità e linearità. L'attività della luciferasi di lucciola viene misurata per prima, quindi viene aggiunto il tampone per il saggio della luciferasi di Renilla 2.0 per inattivare l'attività della luciferasi di lucciola e misurare allo stesso tempo l'attività della luciferasi di Renilla. Il tampone di saggio della luciferasi di Renilla 2.0 inattiva la luciferasi di lucciola al livello delle cellule non trasfettate, consentendo la misurazione sequenziale dell'attività della luciferasi di lucciola e della luciferasi di Renilla nello stesso campione. Si tratta di un test di tipo istantaneo che richiede la misurazione della luminescenza subito dopo l'aggiunta dei reagenti di rivelazione al campione di luciferasi. Il segnale di lucciola decade in circa 12 minuti, mentre quello di Renilla in circa 2 minuti, anche se ciò può variare a seconda dei livelli enzimatici.

Application

Categoria della ricerca
Segnalazione cellulare
Saggio della luciferasi di lucciola
Sottocategoria di ricerca
Colorante per cellule vive
Test a doppia luciferasi di tipo flash che consente di misurare l'attività della luciferasi di lucciola e di Renilla nello stesso campione con elevata sensibilità e linearità.

Physical form

Liquido

Preparation Note

Conservare il kit per il doppio saggio della luciferasi di lucciola/Renilla a -80 °C. I tamponi per il saggio di lucciola e di Renilla sono stabili a -80 °C per almeno sei mesi dalla data di ricevimento. Gli altri componenti del sono stabili a -20 °C o a temperature inferiori per almeno sei mesi dalla data di ricevimento. I componenti del kit e le soluzioni stock di D-luciferina e di celenterazina Aquaphile in acqua sono stabili per almeno 5 cicli di congelamento/scongelamento.

Other Notes

1) Tampone di lisi passivo 2.0 1X (CS224514): 15 mL

2) Tampone di saggio della luciferasi di lucciola 2.0 (CS224591): 15 mL

3) D-luciferina (CS224551): 3 x 1 mg

4) Tampone di saggio della luciferasi di Renilla 2.0 (CS224580): 15 mL

5) Celenterazina Aquaphile (CS224581): 3 x 200 µg

Disclaimer

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

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cell based assay: suitable

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cell based assay: suitable

storage temp.

-65 to -96°C

storage temp.

-65 to -96°C

storage temp.

-10 to -25°C

storage temp.

-65 to -96°C

shipped in

ambient

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ambient

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ambient

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ambient

detection method

chemiluminescent

detection method

chemiluminescent

detection method

chemiluminescent

detection method

chemiluminescent


Classe di stoccaggio

10 - Combustible liquids



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Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. What volume of reagent, how many assays from one kit, what plates are needed and how is assay run? - very little information currently on webpage.

    1 answer
    1. The SCT152 kit is sufficient for approximately 150 reactions. Here is the data sheet: https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/815/113/sct152ds.pdf

      Helpful?

  2. How many reactions is it designed for?

    1 answer
    1. This kit includes a several components, including 3 x 200 ug Aquaphile Coelenterazine. Each 200 ug vial is sufficient to perform 50 tests when used as directed. Please see the link below to review the kit protocol:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/815/113/sct152ds.pdf

      Helpful?

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