MAB1692
Anticorpo anti-distrofina, dominio mid rod, clone 6D3
culture supernatant, clone 6D3, Chemicon®
Sinonimo/i:
Anti-BMD, Anti-CMD3B, Anti-DXS142, Anti-DXS164, Anti-DXS206, Anti-DXS230, Anti-DXS239, Anti-DXS268, Anti-DXS269, Anti-DXS270, Anti-DXS272, Anti-MRX85
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
culture supernatant
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
6D3, monoclonal
Reattività contro le specie
mouse, canine, human, rabbit, rat
Produttore/marchio commerciale
Chemicon®
tecniche
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG2a
N° accesso NCBI
N° accesso UniProt
Condizioni di spedizione
dry ice
modifica post-traduzionali bersaglio
unmodified
Informazioni sul gene
human ... DMD(1756)
Specificità
Dominio centrale (detto mid rod, compreso tra gli amminoacidi 1181 e 1388) della distrofina umana. Reagisce anche con la distrofina di muscolo scheletrico, cardiaco e liscio di topo, ratto, coniglio e cane normali. Non sono state testate altre specie animali. Sui blot reagisce con l′isoforma cerebrale. Assenza di reattività con tessuto di topo distrofici mdx o pazienti con distrofia muscolare di Duchenne (DMD)/distrofia muscolare di Becker (DMB) portatori di una delezione genica che cancella il sito di legame all′anticorpo. Nessuna reattività con la distrofina di pollo.
DISTRIBUZIONE DELLA COLORAZIONE: in microscopia ottica si osserva una rima di marcatura continua alla periferia delle fibre muscolari.
In microscopia elettronica con oro si osserva marcatura in prossimità della faccia citoplasmatica del sarcolemma.
Al saggio di Western blotting si osserva una forte banda doppia a circa 400 kDa, oltre a metaboliti di massa molecolare più bassa.
DISTRIBUZIONE DELLA COLORAZIONE: in microscopia ottica si osserva una rima di marcatura continua alla periferia delle fibre muscolari.
In microscopia elettronica con oro si osserva marcatura in prossimità della faccia citoplasmatica del sarcolemma.
Al saggio di Western blotting si osserva una forte banda doppia a circa 400 kDa, oltre a metaboliti di massa molecolare più bassa.
Immunogeno
Epitopo: dominio mid rod
Proteina batterica di fusione (Cell (1987) 51:919-928).
Applicazioni
Categoria di ricerca
Metabolismo
Metabolismo
Immunoistochimica (solo su tessuto fresco congelato, non fissato): usare
non diluito - 1:20. Non raccomandato per l′uso su tessuto incluso in paraffina.
Microscopia elettronica con oro (fissazione leggera con formaldeide al 2% + glutaraldeide allo 0,001% per 1 ora; saccarosio 2,3 M come crioprotettore): usare non diluito. Incubazione di 90 minuti a 25°C.
Western blotting: diluire a 1:100-1:250.
Sarà cura dell′utente finale stabilire le diluizioni di lavoro ottimali.
Protocollo per l′uso di MAB1692 in immunoistochimica
1) Congelare dei blocchetti di muscolo in isopentano raffreddato in azoto liquido.
2) Tagliare sezioni di spessore da 4 μm a 10 μm e lasciarle asciugare all′aria deponendole su vetrini rivestiti di gelatina allo 0,5% contenente allume di cromo allo 0,05%.
3) I vetrini sono conservabili a -70°C avvolti nella pellicola trasparente fino al momento dell′uso. Se si usano sezioni conservate, lasciarle equilibrare a temperatura ambiente prima di togliere la pellicola trasparente e procedere con la reazione.
4) Applicare sulle sezioni (non fissate) un′aliquota da 50 μL di anticorpo primario. Incubare per 1 ora a temperatura ambiente o a 37°C.
5) Lavare le sezioni 3 volte x 10 minuti in tampone fosfato salino.
6) Applicare un′aliquota da 50 μL di anticorpo secondario marcato. Incubare per 60 minuti a 25°C.
7) Lavare le sezioni 3 volte x 10 minuti in tampone fosfato salino.
8) Montare le sezioni fluorescenti usando l′apposito mezzo acquoso per montare i vetrini oppure visualizzare il marcatore perossidasi (DAB). Disidratare, chiarificare e montare le sezioni marcate con perossidasi in caso le preparazioni siano permanenti.
non diluito - 1:20. Non raccomandato per l′uso su tessuto incluso in paraffina.
Microscopia elettronica con oro (fissazione leggera con formaldeide al 2% + glutaraldeide allo 0,001% per 1 ora; saccarosio 2,3 M come crioprotettore): usare non diluito. Incubazione di 90 minuti a 25°C.
Western blotting: diluire a 1:100-1:250.
Sarà cura dell′utente finale stabilire le diluizioni di lavoro ottimali.
Protocollo per l′uso di MAB1692 in immunoistochimica
1) Congelare dei blocchetti di muscolo in isopentano raffreddato in azoto liquido.
2) Tagliare sezioni di spessore da 4 μm a 10 μm e lasciarle asciugare all′aria deponendole su vetrini rivestiti di gelatina allo 0,5% contenente allume di cromo allo 0,05%.
3) I vetrini sono conservabili a -70°C avvolti nella pellicola trasparente fino al momento dell′uso. Se si usano sezioni conservate, lasciarle equilibrare a temperatura ambiente prima di togliere la pellicola trasparente e procedere con la reazione.
4) Applicare sulle sezioni (non fissate) un′aliquota da 50 μL di anticorpo primario. Incubare per 1 ora a temperatura ambiente o a 37°C.
5) Lavare le sezioni 3 volte x 10 minuti in tampone fosfato salino.
6) Applicare un′aliquota da 50 μL di anticorpo secondario marcato. Incubare per 60 minuti a 25°C.
7) Lavare le sezioni 3 volte x 10 minuti in tampone fosfato salino.
8) Montare le sezioni fluorescenti usando l′apposito mezzo acquoso per montare i vetrini oppure visualizzare il marcatore perossidasi (DAB). Disidratare, chiarificare e montare le sezioni marcate con perossidasi in caso le preparazioni siano permanenti.
Questo anticorpo anti-distrofina, dominio mid rod, clone 6D3, è convalidato per l′uso nei saggi di WB e IH per la rivelazione della distrofina.
Sottocategoria di ricerca
Fisiologia del muscolo
Fisiologia del muscolo
Stato fisico
Surnatante di coltura, liquido in PBS con BSA all′1%, contenente azoturo di sodio 15 mM.
Stoccaggio e stabilità
Conservare a -20°C per un massimo di un anno in comode aliquote non diluite. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento.
Risultati analitici
Controllo
CONTROLLO POSITIVO: Muscolo striato umano o di ratto normale sottoposto a congelamento rapido.
CONTROLLO POSITIVO: Muscolo striato umano o di ratto normale sottoposto a congelamento rapido.
Note legali
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Esclusione di responsabilità
Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.
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Raccomandato
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 2
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
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