07-579
Anticorpo anti-REST
Upstate®, from rabbit
Sinonimo/i:
Neural-restrictive silencer factor, RE1-silencing transcription factor, X2 box repressor, neuron restrictive silencer factor, repressor binding to the X2 box
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Informazioni su questo articolo
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Conjugate:
unconjugated
Clone:
polyclonal
Application:
WB
Citations:
123
Servizio Tecnico
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Permettici di aiutartibiological source
rabbit
Quality Segment
conjugate
unconjugated
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
species reactivity
human
manufacturer/tradename
Upstate®
technique(s)
western blot: suitable
isotype
IgG
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
wet ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... REST(5978)
mouse ... Rest(19712)
rat ... Rest(83618)
General description
Circa 160 kDa, osservato; 121,87 kDa, calcolato. In alcuni lisati possono essere osservate bande non caratterizzate.
Il fattore di trascrizione RE1-silencing (UniProt: Q13127; noto anche come REST, repressore a restrizione neurale, X2 box repressor) è codificato dal gene REST (detto anche NRSF, XBR) (Gene ID: 5978). REST è un repressore di trascrizione che agisce legando una sequenza di DNA detta silenziatore a restrizione neurale (NRSE). L′espressione di questa proteina è ubiquitaria ed è particolarmente abbondante nei tessuti del compartimento linfocitario tra i quali milza, timo, linfociti di sangue periferico e ovaie. Si trova anche nelle cellule progenitrici neurali indifferenziate e si ritiene che agisca quale regolatore negativo master sulla neurogenesi. L′espressione di REST è descritta come dipendente dal ciclo-cellulare e risulta ridotta nella fase G2. Questa proteina è implicata nel mantenimento dello stato di quiescenza delle cellule staminali neurali adulte di cui previene una prematura differenziazione in neuroni maturi. REST riduce l′espressione dei geni neurali associandosi a due corepressori distinti, SIN3A e RCOR1, che, a loro volta reclutano una istone deacetilasi ai promotori di geni regolati da REST. REST media la repressione anche reclutando il complesso BHC ai siti RE1/NRSE, che agisce deacetilando e demetilando siti specifici degli istoni e agendo come modificatori dell'organizzazione della cromatina. Mutazioni a carico del gene REST possono determinare il tumore di Wilms, un cancro renale pediatrico dovuto alla moltiplicazione incontrollata di cellule epiteliali, stromali e staminali renali. (Rif.: Mahamdallie, SS., et al. (2015). Nat. Genet. 47(12); 1471-1474; Huang, Z., et al. (2011). Nat. Cell Biol. 13(2); 142-152).
Immunogen
Frammento ricombinante con tag GST corrispondente a 297 amminoacidi della regione C-terminale del fattore di trascrizione RE1-silencing (REST) umano.
Application
Aggiornamento - La proteina Rest è glicosilata. Da http://amsdottorato.cib.unibo.it/687/
Dal Riassunto:
"È stato infine analizzato il pattern di glicosilazione della proteina REST, partendo dall'osservazione che il peso molecolare calcolato sulla sequenza di REST è di circa 116 kDa, ma all'analisi di Western blotting questo fattore di trascrizione risulta avere un peso molecolare apparente diverso (vedere la Tabella 1.1): tale differenza potrebbe essere spiegata dalle modificazioni post-traduzionali delle proteine, come la glicosilazione. Infatti, recentemente, diversi studi hanno sottolineato l'importanza della O-glicosilazione nella modulazione del silenziamento della trascrizione, nella fosforilazione delle proteine, nella degradazione delle proteine da parte del proteasoma e nelle interazioni proteina–proteina [Julenius et al., 2005; Zachara and Hart, 2006]. Analisi di deglicosilazione hanno dimostrato che, nelle cellule SH-SY5Y e HEK293, la proteina REST è O-glicosilata e non N-glicosilata. Inoltre, utilizzando numerose combinazioni di enzimi di deglicosilazione, è possibile ipotizzare la presenza di residui di Gal-β(1-3)-GalNAc sulla proteina REST endogena, mentre residui di galattosio β(1-4)-linked possono essere presenti sulla proteina REST ricombinante espressa nelle cellule HEK293. Tuttavia, il processo di O-glicosilazione produce un'enorme quantità di strutture chimiche e i monosaccaridi devono essere idrolizzati sequenzialmente da una serie di esoglicosidasi. Sono necessari ulteriori esperimenti per caratterizzare tutte le modificazioni post-traduzionali del fattore di trascrizione REST." In particolare, l'autrice dimostra che la proteina REST nelle cellule SH-SY5Y migra a 200 kDa.
Dal Riassunto:
"È stato infine analizzato il pattern di glicosilazione della proteina REST, partendo dall'osservazione che il peso molecolare calcolato sulla sequenza di REST è di circa 116 kDa, ma all'analisi di Western blotting questo fattore di trascrizione risulta avere un peso molecolare apparente diverso (vedere la Tabella 1.1): tale differenza potrebbe essere spiegata dalle modificazioni post-traduzionali delle proteine, come la glicosilazione. Infatti, recentemente, diversi studi hanno sottolineato l'importanza della O-glicosilazione nella modulazione del silenziamento della trascrizione, nella fosforilazione delle proteine, nella degradazione delle proteine da parte del proteasoma e nelle interazioni proteina–proteina [Julenius et al., 2005; Zachara and Hart, 2006]. Analisi di deglicosilazione hanno dimostrato che, nelle cellule SH-SY5Y e HEK293, la proteina REST è O-glicosilata e non N-glicosilata. Inoltre, utilizzando numerose combinazioni di enzimi di deglicosilazione, è possibile ipotizzare la presenza di residui di Gal-β(1-3)-GalNAc sulla proteina REST endogena, mentre residui di galattosio β(1-4)-linked possono essere presenti sulla proteina REST ricombinante espressa nelle cellule HEK293. Tuttavia, il processo di O-glicosilazione produce un'enorme quantità di strutture chimiche e i monosaccaridi devono essere idrolizzati sequenzialmente da una serie di esoglicosidasi. Sono necessari ulteriori esperimenti per caratterizzare tutte le modificazioni post-traduzionali del fattore di trascrizione REST." In particolare, l'autrice dimostra che la proteina REST nelle cellule SH-SY5Y migra a 200 kDa.
Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare
Epigenetica & funzione nucleare
L′anticorpo anti-REST, N° Cat. 07-579, è un anticorpo policlonale di coniglio in grado di rivelare la proteina REST, testato per scopi di Western blotting.
Sottocategoria di ricerca
Fattori di trascrizione
Fattori di trascrizione
Biochem/physiol Actions
Questo anticorpo policlonale di coniglio riconosce il fattore di trascrizione RE1-silencing (REST) ed è diretto contro un epitopo che si trova nella regione C-terminale.
Physical form
Anticorpo policlonale di coniglio purificato, in tampone contenente tampone fosfato 0,014 M, pH 7,6, NaCl 0,175 M, con azoturo di sodio 0,07% e glicerolo 30%.
Formato: purificato
Purificazione con proteina A
Preparation Note
Conservare a una temperatura compresa tra -10°C e -25°C. Raccomandazioni per la manipolazione: una volta ricevuto il prodotto, prima di rimuovere il tappo, centrifugare il flaconcino e mescolare delicatamente la soluzione. Suddividere in aliquote in provette per microcentrifuga e conservare a -20°C. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento che potrebbero danneggiare le IgG e compromettere le prestazioni del prodotto.
Analysis Note
Controllo
Controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-309, estratto nucleare di cellule HeLa. Aggiungere un egual volume di Laemmli sample buffer riducente a 10 μL di estratto e fare bollire per 5 minuti per ottenere una preparazione ridotta. Caricare 20 μg di estratto ridotto per corsia di minigel.
Controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-309, estratto nucleare di cellule HeLa. Aggiungere un egual volume di Laemmli sample buffer riducente a 10 μL di estratto e fare bollire per 5 minuti per ottenere una preparazione ridotta. Caricare 20 μg di estratto ridotto per corsia di minigel.
Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule HEK293.Western blotting: una diluizione 1:1.000 di questo anticorpo ha rilevato la proteina REST in un lisato di cellule HEK293.
Other Notes
Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.
Legal Information
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
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Classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Certificati d'analisi (COA)
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