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P8044

Sigma-Aldrich

Protéinase K from Tritirachium album

≥3.0 unit/mg solid, lyophilized powder

Synonyme(s) :

Endopeptidase K

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About This Item

Numéro CAS:
39450-01-6
Numéro de classification (Commission des enzymes):
3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
Numéro CE :
254-457-8
Numéro MDL:
MFCD00132129
Code UNSPSC :
12352204
eCl@ss :
32160410
Nomenclature NACRES :
NA.54

Source biologique

maize
microbial (T.album
T. ALBUM)
plant seeds (barley)
soybean
yeast

Niveau de qualité

200

Forme

lyophilized powder

Activité spécifique

≥3.0 unit/mg solid

Poids mol.

28.93 kDa

Composition

Protein, ≥15% biuret

Technique(s)

DNA extraction: suitable

Application(s)

diagnostic assay manufacturing

Température de stockage

−20°C

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Application

Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
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Proteinase K is useful for the proteolytic inactivation of nucleases during the isolation of DNA and RNA. It is used for the removal of endotoxins bound to cationic proteins such as lysozyme and ribonuclease A. It is also useful for the isolation of hepatic, yeast, and mung bean mitochondria and is used to determine enzyme localization on membranes. Furthermore, it is used for the treatment of paraffin embedded tissue sections to expose antigen binding sites and for digestion of proteins from brain tissue samples. Product P8044 is provided as a lyophilized powder.
The enzyme from Sigma has been used to degrade complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase) prior to extraction of ubiquinone from Yarrowia lipolytica. It has been used to examine the effect of Proteinase k on Pythium ultimum. It has also been used to maximize the variety of peptide bonds hydrolyzed in the sediment slurry without autolytic production of amino acids from the enzyme itself.

Actions biochimiques/physiologiques

Proteinase K is highly active towards native proteins. It has a broad specificity and degrades many proteins even in the native state. It mainly cleaves the peptide bond adjacent to the carboxyl group of aliphatic and aromatic amino acids with blocked α-amino groups. The optimum pH is between 7.5-9.0 and the isoelectric point is 8.9. Ca2+ (1-5 mM) is required for activation. Proteinase K is inhibited by diisopropyl fluorophosphate (DFIP), and phenylmethanesulfonyl fluoride (PMSF).
La protéinase K est une sérine protéase très stable et hautement réactive. Des études de cristallographie et de structure moléculaires ont indiqué que cette enzyme appartient à la famille des subtilisines, présentant une triade catalytique au site actif (Asp39-His69-Ser224). Elle est stable dans un vaste éventail d′environnements : pH, sels de tampon, détergents (SDS) et température. En présence de 0,1 à 0,5 % de SDS, la protéinase K reste active et peut digérer diverses protéines et nucléases dans les préparations d′ADN, sans compromettre l′intégrité de l′ADN isolé.

Définition de l'unité

One unit will hydrolyze urea-denatured hemoglobin to produce color equivalent to 1.0 μmole of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).

Pictogrammes

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

H315,H319,H334,H335

Classification des risques

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organes cibles

Respiratory system

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

Certificats d'analyse (COA)

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M.M. Burrell
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Protocoles

Proteinase K Enzymatic Assay

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