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ABC1442

Anti-KRAS Antibody

rabbit polyclonal

Synonym(e):

GTPase KRas, isoform 2A, c-K-ras, isoform 2A, K-Ras4A, c-Ki-ras, isoform 2A, K-Ras 2, isoform 2A, Ki-Ras, isoform 2A

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.43
Clone:
polyclonal
Species reactivity:
human
Application:
WB
Citations:
4
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Produktname

Anti-K-Ras4A-Antikörper, Isoform-spezifisch, from rabbit, purified by affinity chromatography

biological source

rabbit

Quality Segment

antibody form

affinity isolated antibody

antibody product type

primary antibodies

clone

polyclonal

purified by

affinity chromatography

species reactivity

human

technique(s)

western blot: suitable

NCBI accession no.

UniProt accession no.

shipped in

ambient

target post-translational modification

unmodified

Gene Information

human ... KRAS(3845)

General description

21,66 kDa (Pro-Form, Aminosäuren 1–189) und 21,17 kDa (reif, Aminosäuren 2–186) berechnet.
Die GTPase KRas (UniProt P01116; auch bekannt als c-K-ras, c-Ki-ras, K-Ras 2, Ki-Ras) wird beim Menschen durch das KRAS-Gen (auch bekannt als KRAS2, RASK2) kodiert (Gen-ID: 3845). Ras-Proteine sind kleine GTPasen, die zelluläre Signalwege für Wachstum, Proliferation und Differenzierung steuern. Säugetiergenome beherbergen drei Ras-Gene (HRAS, NRAS und KRAS), die für vier GTPasen kodieren, von denen zwei (K-Ras4A und K-Ras4B) vom KRAS-Gen über zwei alternative vierte Exons transkribiert werden. Ras-Proteine weisen eine nahezu identische Sequenzhomologie in der von den Exons 1–3 kodierten Sequenz auf (Aminosäuren 1–165), während sie in ihrer C-terminalen 24-Aminosäuren hypervariablen Region (HVR), die von Exon 4 kodiert wird, divergieren. Die ersten 165 Aminosäuren bilden die katalytische G-Domäne, die die GDP/GTP-Bindung und die Assoziation mit Effektoren, Austauschfaktoren und GTPase-aktivierenden Proteinen (GAPs) vermittelt, während das C-terminale HVR für die Lokalisierung der Ras-Membran benötigt wird, ein Prozess, der für die Funktion von Ras notwendig ist. Zusätzlich zur Entfernung des Initiator-Methionins (Met1) werden die Ras-Proteine posttranslational durch Farnesylierung von Cys186 modifiziert, gefolgt von einer proteolytischen Abspaltung der drei Aminosäuren am C-terminalen Ende (Aminosäuren 187–189) und Carboxylmethylierung des neu gebildeten C-terminalen Prenylcysteins. H-Ras, N-Ras und K-Ras4A sind darüber hinaus an einem oder mehreren Cysteinresten in der Nähe des C-Terminus palmitoyliert (Cys181/Cys184 in H-Ras, Cys181 in N- und K-Ras), während K-Ras4B keine Palmitoylierungsstelle aufweist. Die Palmitoylierung ist für die Ausrichtung von H- und N-Ras auf die Plasmamembran (PM) erforderlich, während K-Ras4A und K-Ras4B eine Reihe von Lysinen enthalten, die eine polybasische Region (PBR) bilden, die in der Lage ist, über eine elektrostatische Wechselwirkung mit dem inneren Fiederblatt der PM zu interagieren.

Immunogen

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz nahe des C-Terminus von menschlichem K-Ras4A entspricht.

Application

Erkennen Sie K-Ras4A mit diesem polyklonalen Kaninchen-Antikörper gegen K-Ras4A, Best.-Nr. ABC1442, validiert für die Verwendung im Western Blotting.
Forschungskategorie
Apoptose & Krebs
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies rekombinantes K-Ras4A, aber nicht K-Ras4B, H-Ras oder N-Ras nach (Tsai, F.D., et al. (2015)). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 112(3): 779-784).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies das Vorhandensein von K-Ras4A in Gesamt-Ras-Immunpräzipitaten aus Kolorektalkarzinom- (HCT116, HT29 und CaCo-2) und T24-Urothelkarzinom-Zelllysaten unter Verwendung eines pan-Ras-mAbs (Best.-Nr. OP40), Klon RAS 10, nach (Tsai, F.D., et al. (2015)). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 112(3): 779-784).

Biochem/physiol Actions

Dieser polyklonale Kaninchen-Antikörper wies spezifisch rekombinantes K-Ras4A, aber nicht K-Ras4B, H-Ras oder N-Ras nach (Tsai, F.D., et al. (2015). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 112(3): 779-784), indem sie auf eine Sequenz im C-terminalen Bereich abzielen, die nur in der gespleißten Isoform K-Ras4A (Isoform 2A) vorkommt und nicht in der gespleißten Isoform K-Ras4B (Isoform 2B).

Physical form

Affinitätsgereinigt.
Aufgereinigter polyklonaler Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Preparation Note

Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot in HEK293-Zelllysat.

Western-Blot-Analyse: Eine 1:5.000-Verdünnung dieses Antikörpers wies exogen exprimiertes K-Ras4A GFP-Fusionsprotein in 20 µg Lysat von transfizierten HEK293-Zellen nach.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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antibody form

affinity isolated antibody

antibody form

affinity isolated antibody

antibody form

purified immunoglobulin

antibody form

purified immunoglobulin

biological source

rabbit

biological source

rabbit

biological source

mouse

biological source

mouse

species reactivity

human

species reactivity

rat, mouse, human

species reactivity

human

species reactivity

human

UniProt accession no.

P01116

UniProt accession no.

P01116

UniProt accession no.

P01116

UniProt accession no.

P01116

Gene Information

human ... KRAS(3845)

Gene Information

human ... KRAS(3845)

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human ... KRAS(3845)

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human ... KRAS(3845)


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Questions

  1. Could you explain why the antibody recognizes a band at 45kD instead of the expected 21kD? Also, do you have any proof that the antibody is specific?

    1 answer
    1. The western blot (WB) data displayed is for a recombinant protein of K-ras4A, which also has a GFP tag. The addition of the tag results in the protein being significantly larger (~45kD) than the wildtype or non-tagged protein. The linked article presents testing data of endogenous cell lines using this antibody to detect the protein at the expected size, thus indicating the specificity of the antibody.

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