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Anti-Phosphotyrosin-Antikörper, Klon 4G10^®

clone 4G10®, Upstate^®, from mouse

• Synonym(e): Anti-Phosphotyrosin Klon 4G10, Phosphotyrosin-Nachweisantikörper
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G10®, monoclonal
• Species reactivity: vertebrates
• Application: ICC, IHC, IP, WB
• Citations: 26

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G10®, monoclonal
• species reactivity: vertebrates
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pTyr)

Beschreibung

General description

Abhängig von der Molekülmasse des nachzuweisenden tyrosinphosphorylierten Proteins.

Einige der Tyrosinreste können mit einer Phosphatgruppe (phosphoryliert) von Proteinkinasen markiert werden. (In seinem phosphorylierten Zustand wird es als Phosphotyrosin bezeichnet.) Die Tyrosin-Phosphorylierung gilt als einer der wichtigsten Schritte bei der Signaltransduktion und Regulierung der Enzymaktivität.
Die Einführung von Anti-Phosphotyrosin-Antikörpern war ein bedeutendes Ereignis in der Signaltransduktionsforschung. Bevor Anti-Phosphotyrosin-Antikörper verfügbar waren, wurde die Tyrosyl-Phosphorylierung von Proteinen und Enzymen anhand von gefährlichen und zeitaufwändigen radioaktiven Versuchen untersucht. Anti-Phosphotyrosin-Antikörper werden häufig in Western Blots eingesetzt, nachdem die Zielproteine immunpräzipitiert wurden, um die Tyrosyl-Phosphorylierung der Proteine zu messen. Anti-Phosphotyrosin-Antikörper werden auch direkt an Zelllysaten verwendet, um die Gesamtveränderung der Tyrosin-Phosphorylierung als Reaktion auf verschiedene Behandlungen zu untersuchen.

Immunogen

Phosphotyramin-KLH

Application

Der Anti-Phosphotyrosin-Antikörper Klon 4G10 weist Tyrosin-phosphorylierte Proteine in allen Spezies nach. Dieser einzigartige monoklonale Antikörper ist zur Verwendung in der IC, IH, IP und WB validiert und wurde in Hunderten Publikationen erwähnt.

Forschungs-Unterkategorie
Allgemeine posttranslationale Modifikation

Forschungskategorie
Signalisierung

Immunpräzipitation:
Mit 2-4 μg einer früheren Charge wurden die Phosphotyrosin-haltigen Proteine im Lysat einer konfluenten Kultur (10-cm-Petrischale) von Zellen, die eine aktivierte Tyrosinkinase exprimierten, quantitativ immunpräzipitiert. Zur Konservierung von Phosphotyrosin geben Sie: 0,2 mmol/l Natriumorthovanadat zum Lysepuffer hinzu.

Biochem/physiol Actions

Dieser Antikörper erkennt Tyrosin-phosphorylierte Proteine aller Spezies.

Physical form

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG2bκ in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 0,15 mmol/l NaCl mit 0,05 % Natriumazid. Flüssig bei 2–8 ºC.
Monoklonaler IgG2bκ-Mausantikörper, der von der Maus-Hybridom-Zelllinie 4G10 (FOX-NY [NS-1-Derivat] Myelom- x Milzzellen) in vitro hergestellt wurde.

Format: Aufgereinigt

Protein-G-Sepharose-Chromatografie

Preparation Note

Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

HINWEIS: Nicht einfrieren.
Für maximale Produktrückgewinnung das Originalfläschchen vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren. Wenn das Produkt aus Versehen eingefroren und aufgetaut wurde, zentrifugieren Sie es 10 Minuten bei 13,000 x g und 2-8 ºC. Bewahren Sie den Überstand für Ihre Anwendung auf.

Analysis Note

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Art.-Nr. 12-302, EGF-stimuliertes A431-Zelllysat. 2,5 µl 2-Mercaptoethanol/100 µl Lysat zugeben und 5 Minuten einkochen, um das Präparat zu reduzieren. Jede Bahn für Minigele mit 20 µg reduziertem Lysat beladen.

Regelmäßig mit EGF-behandelten humanen A431-Karzinomzellen beurteilt.

Western-Blot-Analyse:
0,5–2 μg/ml dieser Charge wiesen Tyrosin-phosphorylierte Proteine in einem modifizierten RIPA-Lysat aus mit EG behandelten humanen A431-Karzinomzellen nach (Cohen, B., 1990; Druker, B. J.,1989; Kanakura, Y., 1991).

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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