LIBTM-RO

Mélange Liberase^™ TM de qualité "recherche"

medium Thermolysin concentration

• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.28

Propriétés

• Niveau de qualité: 100
• Forme: lyophilized
• Conditionnement: pkg of 10 mg (05401119001 [2 x 5 mg]); pkg of 100 mg (05401127001 [2 x 50 mg])
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Paramètres: 35-37 °C optimum reaction temp.
• Technique(s): single cell analysis: suitable; tissue processing: suitable
• Couleur: white
• pH optimal: 7.4
• Solubilité: water: soluble
• Adéquation: suitable for flow cytometry
• Application(s): life science and biopharma; sample preparation
• Activité étrangère: Endotoxin 1 EU/mg
• Conditions d'expédition: dry ice
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Le mélange Liberase TM de qualité "recherche" contient de la collagénase I et de la collagénase II de grande pureté. Ces deux isoformes de la collagénase, mélangées selon un rapport précis, sont associées à une concentration intermédiaire de thermolysine, une protéase neutre non clostridienne.

Application

Le mélange Liberase^™ (Thermolysin Medium) de qualité "recherche" est utilisé pour la dissociation d'un grand nombre de types de tissus différents, étape dans laquelle le mélange enzymatique doit avoir une grande pureté pour garantir une viabilité et un rendement cellulaires élevés. La quantité des sous-produits bactériens, comme les endotoxines, est divisée par un facteur pouvant aller jusqu'à plusieurs milliers.

Caractéristiques et avantages

• Optimisez la viabilité et le rendement des cellules isolées :avec un mélange enzymatique à plus faible activité de clostripaïne et de trypsine et une teneur réduite en endotoxines.
• Bénéficiez d'un mélange enzymatique avec une activité spécifique supérieure : résultant de la grande pureté des collagénases I et II (déterminée par HPLC).
• Obtenez une meilleure reproductibilité expérimentale : grâce à une plus grande uniformité entre les lots.
• Améliorez la sécurité : avec une enzyme exempte de matières premières issues de tissus de mammifères ou d'oiseaux.

Notes préparatoires

Stabilisants : calcium
Concentration de travail du mélange enzymatique Liberase de qualité "recherche"

Les enzymes Liberase ont une activité spécifique nettement supérieure à celle des collagénases traditionnelles. Cela signifie que la concentration de travail des Enzymes purifiées Liberase de qualité "recherche", exprimée en mg/ml, est inférieure à celle des collagénases classiques.
Si votre application ne figure pas dans la liste, commencez avec une concentration de 0,08–0,28 unités Wünsch/ml. L'objectif est de déterminer la concentration de départ en mélange enzymatique Liberase de qualité "recherche" la mieux adaptée à vos besoins. Il s'agit d'un point de départ, la concentration finale pouvant varier en raison des différences entre les méthodes et les lots de collagénase traditionnelle.

Concentration de travail en collagénase

Multipliez la concentration de travail en collagénase obtenue précédemment (en mg/ml) par son activité spécifique (en unités Wünsch/mg, déterminée ci-dessus) pour obtenir une concentration en unités Wünsch/ml. Pour connaître la quantité de mélange enzymatique Liberase de qualité "recherche" à utiliser, commencez par multiplier votre concentration de travail en collagénase (en unités Wünsch/ml) par le volume total de votre solution enzymatique de travail de façon à connaître l'activité collagénase totale dont vous avez besoin (en unités Wünsch). Divisez cette valeur par la concentration de la solution mère de mélange Liberase de qualité "recherche" (voir "Reconstitution et stockage »). Cela vous donne le nombre de millilitres de solution mère de mélange enzymatique Liberase de qualité "recherche" à ajouter à votre solution enzymatique de travail.
Conditions de stockage (solution de travail) : Conservez la solution mère non utilisée sous forme d'aliquotes à usage unique entre -15 et -25 °C.

Remarque : Éviter les congélations et décongélations répétées !

Reconstitution

Reconstituez l'enzyme lyophilisée dans de l'eau stérile pour préparation injectable ou dans un tampon de dissociation tissulaire. N'ajoutez pas de sérum ou d'autres composés, tels que de l'albumine ou des inhibiteurs de protéase, au tampon de dissociation. La stabilité enzymatique diminue lorsque la concentration et la température augmentent (4 °C). Veillez donc à éviter ces conditions.

Reconstituez la totalité du flacon. Ne divisez pas le lyophilisat en aliquotes. L'introduction d'humidité dans le flacon provoque une baisse de l'activité enzymatique.

Placez le flacon sur de la glace pour réhydrater l'enzyme lyophilisée.

Agitez doucement le flacon à une température de 2 à 8 °C jusqu'à dissolution complète de l'enzyme (max. 30 min).

En fonction du type de tampon de dissociation tissulaire utilisé pour dissoudre le Mélange enzymatique purifié de qualité "recherche" Liberase, une légère précipitation peut se produire ; le précipité se dissout facilement dans la solution de travail diluée et n'influe en rien sur l'activité enzymatique.

Utilisez une aliquote de la solution mère pour préparer la solution de travail.

Volume de reconstitution

2 ml (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 10 ml (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg )

Collagénase (en unités Wünsch/ml)

13 (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 26 (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)

Concentration totale en collagénase [mg/ml]

2,5 (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 5,0 (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)

Stockage et stabilité

Conserver le récipient bien fermé dans un endroit sec et bien ventilé.

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

Liberase is a trademark of Roche

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS07,GHS08
• Mention d'avertissement: Danger
• Mentions de danger: H315 - H319 - H334 - H335
• Conseils de prudence: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Classification des risques: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organes cibles: Respiratory system
• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash