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Merck

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ENDOARGS-RO

Roche

Endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage

from Pseudomonas fragi

Synonyme(s) :

protéase

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A propos de cet article

UNSPSC Code:
12352204
Numéro CE :
NACRES:
NA.54
Specific activity:
≥20000 units/mg protein
Assay:
≥90% (SDS-PAGE)
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assay

≥90% (SDS-PAGE)

form

lyophilized

specific activity

≥20000 units/mg protein

mol wt

27 kDa

packaging

pkg of 2 μg (11420488001), pkg of 3 × 2 μg (11054589001)

manufacturer/tradename

Roche

optimum pH

7.0-8.0

pH range

6.5-9.0

storage temp.

2-8°C

General description

Pseudomonas fragi de type sauvage sécrète une métalloprotéase qui clive les liaisons peptidiques du côté N-terminal des petits acides aminés hydrophiles. Une forme mutée de cette souche produit l′endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage, qui est isolée sous forme de protéase hautement purifiée et spécifique.

Application

L′endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage est utilisée pour les analyses de structure et de séquence des protéines.[1][2]

Biochem/physiol Actions

L′endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage est une métalloprotéase. Dans un tampon phosphate, acétate ou Tris à pH 6,0-8,5, elle clive spécifiquement les liaisons peptidiques du côté N-terminal des résidus d′acide aspartique et cystéique. Si la cystéine est réduite ou alkylée, seules les liaisons -↓-Asp-X sont clivées.
La spécificité de l′endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage est vérifiée en utilisant le glucagon comme substrat. Des concentrations élevées d′endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage (1 partie d′enzyme pour 10 parties de glucagon, au poids) sont incubées pour détecter toute trace d′impuretés comme les protéases contaminantes.
Inactivation à la chaleur : La réaction de la protéase est arrêtée en faisant bouillir pendant 5 minutes.

Preparation Note

Concentration de travail : 2 μg /50 μl d′eau bidistillée
Un flacon (= 2 μg d′enzyme) est dissout dans 50 μl d′eau bidistillée, pour produire un tampon Tris-HCl de concentration 10 mM et pH 7,5.
Solution de travail : Le solvant recommandé est l′eau bidistillée.
Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25 °C
Une solution dans de l′eau bidistillée est stable pendant une semaine au maximum entre 2 et 8 °C ou pendant un mois entre -15 et -25 °C ; éviter de décongeler plusieurs fois.
L′endoprotéinase Asp-N de qualité séquençage lyophilisée est reconstituée dans 50 μl d′eau bidistillée. Cela produit un tampon Tris-HCl de concentration 10 mM et pH 7,5. Pour éviter l′autolyse, la température d′incubation ne doit pas dépasser 37 °C.

Other Notes

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

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ENDOGLUS-ROENDOLYSS-RO324708
assay

≥90% (SDS-PAGE)

assay

-

assay

-

assay

≥90% (SDS-PAGE)

specific activity

≥20000 units/mg protein

specific activity

≥15 units/mg protein

specific activity

≥200 units/mg protein (at 25 °C, with Chromozym PL)

specific activity

≥20,000 units/mg protein

form

lyophilized

form

lyophilized (salt-free)

form

lyophilized

form

lyophilized solid

optimum pH

7.0-8.0

optimum pH

4.0-7.8

optimum pH

8.5-8.8

optimum pH

-

storage temp.

2-8°C

storage temp.

2-8°C

storage temp.

2-8°C

storage temp.

2-8°C

mol wt

27 kDa

mol wt

Mr 27 kDa

mol wt

33 kDa by SDS-PAGE (reducing)

mol wt

-


Classe de stockage

11 - Combustible Solids

flash_point_f

does not flash

flash_point_c

does not flash

wgk

WGK 3



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