MAB1501
Anticorps anti-actine, clone C4
ascites fluid, clone C4, Chemicon®
Synonyme(s) :
Anticorps pan-actine
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About This Item
Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41
Source biologique
mouse
Niveau de qualité
Forme d'anticorps
ascites fluid
Type de produit anticorps
primary antibodies
Clone
C4, monoclonal
Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)
all
Fabricant/nom de marque
Chemicon®
Technique(s)
ELISA: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
western blot: suitable
Isotype
IgG2bκ
Numéro d'accès NCBI
Numéro d'accès UniProt
Modification post-traductionnelle de la cible
unmodified
Informations sur le gène
human ... ACTA1(58)
Description générale
Les actines sont des protéines eucaryotes ubiquitaires qui servent d′éléments de base multifonctionnels des microfilaments cytosquelettiques. Ils jouent des rôles critiques dans une vaste gamme de processus cellulaires, notamment la division et la migration des cellules, le remodelage de la chromatine, la régulation transcriptionnelle et le transport vésiculaire. On attribue ces fonctions à la capacité de l′actine de former des filaments, qui peuvent s′assembler et se désassembler rapidement selon les besoins de la cellule. Au moins six types différents d′actine ont été signalés chez les mammifères. Bien que les isoformes d′actine présentent une homologie de séquence globale de 90 %, elles ne sont pas exprimées selon des schémas spatiaux, temporels ou spécifiques des tissus particuliers, et l′homologie n′est que de 50 à 60 % au niveau des 18 résidus N-terminaux. Les formes bêta et gamma, ou actines cytoplasmiques, sont hautement conservées chez les animaux supérieurs et sont majoritairement exprimées dans les cellules non musculaires, où elles contrôlent la structure cellulaire. Exocytose et motilité. Ces protéines sont pratiquement identiques et ne diffèrent que par quatre acides aminés dans la région N-terminale. Les quatre autres isoformes d′actine se trouvent typiquement dans les types de tissus musculaires chez l′adulte. Les actines alpha cardiaques et alpha squelettiques sont exprimées dans les muscles striés cardiaques et squelettiques, respectivement. Les actines alpha et gamma se retrouvent principalement dans les muscles lisses vasculaires et entériques, respectivement. Dans des conditions de liaison au calcium, la bêta-actine présente un comportement plus dynamique que la gamma-actine, avec un taux plus élevé de polymérisation et de dépolymérisation. En outre, la bêta-actine et la gamma-actine peuvent facilement former des copolymères, et le filament ainsi produit présente des taux de polymérisation et de dépolymérisation variables selon le rapport entre les actines bêta et gamma [Lessard, JL.,et al. (1988). Cell Motility Cytoskeleton 10(3); 349-362].
Spécificité
Le MAB1501 est un anticorps pan-actine qui se lie à un épitope dans une région très conservée ; il réagit avec chacune des six isoformes d′actine de vertébrés (Lessard, 1988). Réagit avec les formes d′actine globulaire (G) et filamenteuse (F) et n′interfère pas avec la polymérisation de l′actine pour former des filaments, à un taux allant jusqu′à un anticorps par deux monomères d′actine. Cependant, cet anticorps augmente l′étendue de la polymérisation lorsqu′il est utilisé à un taux plus faible d′anticorps par rapport à l′actine. L′anti-actine ne marque pas que les myotubes, mais aussi les myoblastes et fibroblastes. Même si le clone C4 est un anticorps préparé contre l′actine de muscles de gésier de poulet, il réagit avec les actines de tous les vertébrés ainsi que celles de Dictyostelium discoideum et Physarum polycephalum (Lessard, 1988).
À l′heure actuelle, toutes les espèces animales et tous les types cellulaires connus exprimant une forme d′actine réagissent par immunofluorescence indirecte ou par immunoblotting, y compris l′actine de plante.
Immunogène
Actine de gésier de poulet purifiée (Lessard, 1988).
L′épitope est conservé dans toutes les actines connues.
Application
Catégorie de recherche
Structure cellulaire
Structure cellulaire
Détection fiable et spécifique de l′actine avec l′anticorps anti-actine, clone C4. Cet anticorps monoclonal a fait l′objet de nombreux articles et son utilisation a été validée en ELISA, IC, IF, IH, IH(P) et WB. Cet anticorps monoclonal est également disponible sous forme de conjugué fluorescent.
Immunofluorescence indirecte, dilution au 1/100e :
Cellules en culture – fixer au formaldéhyde, traiter au méthanol ou à l′acétone.
Myofibrilles glycérinés – fixer les fibres au formaldéhyde, traiter au méthanol froid. Marquage intense des bandes I et fibres de stress des fibroblastes humains.
Coupes cryostat (6 µm) – congeler rapidement en isopentane, traiter les lames à la gélatine et au formaldéhyde.
Immunoblotting :
Dilution au 1/100e-1/1000e (Otey, 1987) : sur homogénats de muscle séparés par SDS-PAGE, réagit de façon relativement uniforme avec une protéine de 43 kD présente dans les tissus de muscles squelettique, cardiaque, de gésier et d′aorte. Semble réagir avec toutes les isoformes d′actine présentes dans ces préparations et produit une réaction intense avec l′apha-actine des muscles squelettiques, cardiaques et artériels.
Iodation (Lessard, 1979).
Test de liaison ELISA en phase solide :
Une dilution au 1/800e-1/1000e d′un lot précédent a produit une forte réaction avec l′actine cytoplasmique et se lie significativement aux actines de gésier, muscles squelettiques, artériels et cardiaques. Présente également une forte liaison à Dictyostelium discoideum et Physarum polycephalum.
ELISA :
produit une forte réaction avec l′actine cytoplasmique et se lie significativement aux actines de gésier, muscles squelettiques, cardiaques et artériels. Présente également une forte liaison à Dictyostelium discoideum et Physarum polycephalum.
Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées par l′utilisateur final.
Cellules en culture – fixer au formaldéhyde, traiter au méthanol ou à l′acétone.
Myofibrilles glycérinés – fixer les fibres au formaldéhyde, traiter au méthanol froid. Marquage intense des bandes I et fibres de stress des fibroblastes humains.
Coupes cryostat (6 µm) – congeler rapidement en isopentane, traiter les lames à la gélatine et au formaldéhyde.
Immunoblotting :
Dilution au 1/100e-1/1000e (Otey, 1987) : sur homogénats de muscle séparés par SDS-PAGE, réagit de façon relativement uniforme avec une protéine de 43 kD présente dans les tissus de muscles squelettique, cardiaque, de gésier et d′aorte. Semble réagir avec toutes les isoformes d′actine présentes dans ces préparations et produit une réaction intense avec l′apha-actine des muscles squelettiques, cardiaques et artériels.
Iodation (Lessard, 1979).
Test de liaison ELISA en phase solide :
Une dilution au 1/800e-1/1000e d′un lot précédent a produit une forte réaction avec l′actine cytoplasmique et se lie significativement aux actines de gésier, muscles squelettiques, artériels et cardiaques. Présente également une forte liaison à Dictyostelium discoideum et Physarum polycephalum.
ELISA :
produit une forte réaction avec l′actine cytoplasmique et se lie significativement aux actines de gésier, muscles squelettiques, cardiaques et artériels. Présente également une forte liaison à Dictyostelium discoideum et Physarum polycephalum.
Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées par l′utilisateur final.
Sous-domaine de recherche
Signalisation cytosquelettique
Signalisation cytosquelettique
Qualité
Évaluée de routine par western blot sur des lysats de cellules A431.
Analyse par western blot :
Une dilution au 1/500e de ce lot a permis de détecter l′actine dans 10 g de lysats de cellules A431.
Analyse par western blot :
Une dilution au 1/500e de ce lot a permis de détecter l′actine dans 10 g de lysats de cellules A431.
Description de la cible
43 kDa
Liaison
Remplace : 04-1040
Forme physique
Anticorps monoclonal de souris en liquide d′ascite avec azoture de sodium à 0,01 %.
Non purifié
Stockage et stabilité
Stable à -20 °C en aliquotes non dilués jusqu′à 12 mois après la date de réception. Ne pas conserver dans un format dilué. Éviter de congeler/décongeler plusieurs fois.
Remarque sur l'analyse
Contrôle
Lysat total de cellules HeLa.
Lysat total de cellules HeLa.
Autres remarques
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Code de la classe de stockage
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WGK 1
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Not applicable
Point d'éclair (°C)
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