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DUO92101

Sigma-Aldrich

Starter Kit Duolink® In Situ rouge - souris/lapin

Synonyme(s) :

in situ Proximity Ligation Assay, Protein Protein Interaction Assay

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About This Item

Code UNSPSC :
41116158
Nomenclature NACRES :
NA.32

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Gamme de produits

Duolink®

Niveau de qualité

Technique(s)

proximity ligation assay: suitable

Fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®; Zeiss Filter set 31)

Adéquation

suitable for fluorescence

Température de stockage

−20°C

Application

L′essai de ligature de proximité (proximity ligation assay, PLA®) Duolink® permet la détection endogène d′interactions protéiques, de modifications post-traductionnelles et de niveaux d′expression de protéines au niveau d′une molécule individuelle dans des échantillons de cellules et de tissu fixés.

Pour utiliser ce produit, suivez le Protocole Duolink® par fluorescence in situ. Des instructions succinctes sont également disponibles.

Rendez-vous sur notre Centre d′information sur les essais PLA Duolink® pour en savoir plus sur la façon de réaliser une expérience avec Duolink®, les applications, la résolution des problèmes, etc.

Pour réaliser une expérience de PLA Duolink® in situ complète, vous vous avez besoin de deux anticorps primaires (validé par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Ce starter kit fournit tous les autres réactifs nécessaires pour 30 réactions de PLA Duolink®, y compris une paire de sondes de PLA (anti-lapin PLUS et anti-souris MOINS), les réactifs de détection par fluorescence rouge, les tampons de lavage et le milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L′analyse se fait sur un équipement d′analyse par immunofluorescence standard.

Spécificité
Le Starter kit Duolink Iin situ rouge - souris/lapin® nécessite un anticorps primaire de souris et un anticorps primaire de lapin. Les réactifs de détection par fluorescence rouge sont souvent utilisés avec un filtre Texas Red®.

Note d′application
Deux anticorps primaires développés dans des espèces différentes sont nécessaires. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d′immunofluorescence (IF), d′immunohistochimie (IHC) ou d′immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses dans la paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n′est requis.

Laissez-nous faire le travail pour vous et découvrez notreProgramme de service sur mesure pour accélérer vos projets Duolink®

Consulter la liste complète des produits Duolink®
Spécificité
Le kit de démarrage Duolink® in situ - rouge - souris/lapin nécessite un anticorps primaire de souris et un anticorps primaire de lapin. Les réactifs de détection par fluorescence rouge sont souvent utilisés avec un filtre pour Texas Red®.

Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.

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Le Starter Kit in situ Duolink® rouge est utilisé dans les essais PLA.[1][2]

Caractéristiques et avantages

  • Aucune surexpression ou manipulation génétique nécessaire
  • Grande spécificité (moins de faux positifs)
  • Sensibilité à une seule molécule du fait de l′amplification par cercle roulant
  • Quantification relative possible
  • Aucun équipement spécial requis
  • Plus rapide et plus simple que la technique FRET
  • Exactitude accrue par rapport à co-IP
  • Résultats prêts à être publiés

Informations légales

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

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Composants de kit également disponibles séparément

Réf. du produit
Description
FDS

  • DUO92002Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)FDS

  • DUO92004Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)FDS

  • DUO92008Duolink® In Situ Detection Reagents RedFDS

  • DUO82049Duolink® In Situ Wash Buffers, FluorescenceFDS

  • DUO82040Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPIFDS

Pictogrammes

Health hazardCorrosionEnvironment

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Classification des risques

Aquatic Chronic 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

Code de la classe de stockage

8A - Combustible corrosive hazardous materials


Certificats d'analyse (COA)

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JNK associated leucine zipper protein functions as a docking platform for Polo like kinase 1 and regulation of the associating transcription factor Forkhead box protein K1.
Ramkumar P, et al.
The Journal of Biological Chemistry (2015)
Targeting CPT1A-mediated fatty acid oxidation sensitizes nasopharyngeal carcinoma to radiation therapy.
Tan Z, et al.
Theranostics, 8(9), 2329-2329 (2018)
New protein?protein interactions of mitochondrial connexin 43 in mouse heart.
Denuc A, et al.
Journal of Cellular and Molecular Medicine, 20(5), 794-803 (2016)
Ivan Duran et al.
Human molecular genetics, 24(7), 1918-1928 (2014-12-17)
Osteogenesis imperfecta (OI) is a genetic disorder that results in low bone mineral density and brittle bones. Most cases result from dominant mutations in the type I procollagen genes, but mutations in a growing number of genes have been identified
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately

Articles

Duolink® proximity ligation assay used to study neuron interactions furthering neuroscience research.

Learn how Proximity Ligation Assay technology works and how the protein-protein interaction control kit can confirm in situ detection of EGF-induced EGFR-HER2 dimerization.

Décryptez la technologie des essais de ligature de proximité et découvrez comment notre kit de contrôle des interactions protéiques permet de confirmer la détection in situ d'une dimérisation EGFR/HER2 induite par l'EGF.

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Protocoles

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

Ce protocole décrit comment réaliser une détection des protéines par immunofluorescence dans les cellules et les tissus.

Contenu apparenté

Protein and nucleic acid interaction reagents and resources for investing protein-RNA, protein-DNA, and protein-protein interactions and associated applications.

Réactifs pour interactions entre protéines et acides nucléiques, ressources permettant d'étudier les interactions protéines/ARN, protéines/ADN et protéines/protéines, et applications associées.

Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay

Questions

1–5 of 5 Questions  
  1. Hello, Is this kit also suitable for flow cytometry-based analysis of the data?

    1 answer
    1. This kit is NOT suitable for flow cytometry. Please see our Duolink® flowPLA Mouse/Rabbit Starter Kits for flow cytometry: DUO94102 (Green), DUO94104 (Far Red), & DUO94105 (Violet).

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  2. Can the Duolink kits be used with a Mouse IgM antibody?

    1 answer
    1. Duolink kits may be compatible with a Mouse IgM antibody, provided that the antibody contains the light chain. The Anti-Mouse MINUS probe specifically interacts with mouse IgG (H+L) and the light chains associated with IgM. Therefore, if the Mouse IgM antibody includes the light chain, it should be suitable for use with the Duolink kits.

      Helpful?

  3. How many reactions can be done with this kit?

    1 answer
    1. The Duolink™ starter kit contains all the components necessary to analyze up to 30 reactions in one single order. Please see the link below to review the full protocol:
      https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/protocol/protein-biology/protein-and-nucleic-acid-interactions/duolink-fluorescence-user-manual#DuolinkPLAFluorescenceProtocol

      Helpful?

  4. I want to study the interaction of two cell surface proteins using PLA kit . My primaries are mouse and rabbit. Does the kit have the two secondary and also all the components that i would require to carry out the assay. Can you advice?

    1 answer
    1. The Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit - DUO92101 contains the Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG, and Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L) secondary antibodies and everything needed to conduct the PLA assay.

      Helpful?

  5. What is the expiry date of the kit contents?

    1 answer
    1. This product is not assigned an expiration date or recommended retest date. Products with no expiration date or recommended retest date should be routinely inspected by customers to ensure they perform as expected. These products are also subject to a one-year warranty from the date of shipment.

      For more information, you may access the "Product Dating Information" document under "ADDITIONAL USEFUL DOCUMENTS ABOUT OUR PRODUCTS" at the bottom of the Quality Services page with this link: https://www.sigmaaldrich.com/life-science/quality-and-regulatory-management/quality-services.

      Helpful?

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