Expression et extinction géniques
![Sigma-Aldrich® Advanced Genomics est le premier fournisseur de technologies d'édition et d'extinction géniques, dont CRISPR, Cas9, les ARN guides synthétiques (ARNsg) et les nucléases à doigts de zinc (ZFN pour "Zinc Finger Nucleases").](/deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/images/applications/genomics/turn-it-on/turn-it-on.png "Sigma-Aldrich® Advanced Genomics est le premier fournisseur de technologies d'édition et d'extinction géniques, dont CRISPR, Cas9, les ARN guides synthétiques (ARNsg) et les nucléases à doigts de zinc (ZFN pour "Zinc Finger Nucleases").")
La modulation de l'expression génique est l'une des techniques les plus puissantes que les chercheurs utilisent pour étudier les réseaux génétiques complexes qui régissent les processus biologiques. En particulier, ils ont très souvent recours à des expériences de modulation génique pour identifier des traitements efficaces pour lutter contre les maladies, du cancer aux maladies neurodégénératives et neurodéveloppementales.
De nombreuses technologies permettent de réguler efficacement l'expression génique dans les cellules et tissus. L'interférence par ARN (ARNi ou RNAi) est un mécanisme biologique naturel par lequel de petits ARN interférents (ARNsi) double brin induisent une puissante inhibition ciblée de l'expression génique. SigmaAldrich® Advanced Genomics s'est établi comme un leader dans la mise au point de produits à ARNi commerciaux pour les chercheurs.
Plus récemment, le développement de l'inhibition par CRISPR (CRISPRi) et de l'activation par CRISPR (CRISPRa) a fourni aux chercheurs de nouveaux outils performants qui offrent un panel pratiquement illimité de solutions de régulation de l'expression génique. Grâce à la gamme de produits CRISPR de SigmaAldrich® Advanced Genomics, les chercheurs peuvent réprimer (knock-down), inactiver (knock-out), activer ou surexprimer pratiquement n'importe quel gène avec précision et efficacité.
Articles techniques apparentés
- We offer advanced design and quality synthesis for predesigned siRNA and siRNA libraries using the Rosetta siRNA Design Algorithm to reduce off-target effects and increase RNAi performance. The algorithm utilizes Position-Specific Scoring Matrices (PSSM) and knowledge of the siRNA seed region to predict the most effective and specific siRNA sequences for a target gene of interest.
- One approach to the analysis of gene expression is to measure the concentration of mRNA of a gene. There are several challenges to such analyses, such as the differences in half life between different transcripts, the temporal patterns of transcription and the lack of correlation between mRNA and protein.
- A series of vectors to enable a successful implementation of your RNAi experiments.
- Enzyme Explorer Product Application Index for Superoxide Dismutase offered by us online. Superoxide Dismutase (SOD) catalyzes the reduction of superoxide anions to hydrogen peroxide.
- Firefly luciferase is a widely used bioluminescent reporter for studying gene regulation and function. It is a very sensitive genetic reporter due to the absence of endogenous luciferase activity in mammalian cells or tissues.
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Protocoles apparentés
- Complete protocol for Lentiviral transduction of suspension cells. This protocol describes the use of MISSION TRC shRNA Lentiviral Particles for long term silencing and phenotypic observation of suspension cells.
- FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) provides a method for sorting a mixed population of cells into two or more groups, one cell at a time, based on the specific light scattering and fluorescence of each cell. This method provides fast, objective, and quantitative recording of fluorescent signals from individual cells.
- Method for purification, reverse transcription and quantitative PCR for MicroRNAs using Mysticq reagents
- Experimentally determine the appropriate antibiotic concentration for selecting stable cell lines. This titration protocol can determine the lowest concentration of puromycin needed to efficiently select transduced cells.
- Preparation of the Lentiviral Transduction Particles Using Packaging Plasmid Mix
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Trouver d'autres articles et protocoles
Illustration du mécanisme d'extinction génique médié par un shARN et un ARNsi dans les cellules
L'ARNi : une modulation génique pour élucider les voies génétiques
Les criblages de génomique fonctionnelle font partie intégrante de la recherche sur la découverte. Ils vous aident à décortiquer les mécanismes qui sous-tendent les systèmes biologiques, les voies moléculaires et les maladies. L'utilisation de banques de shARN permet d'étudier ces réseaux d'interactions moléculaires complexes pour obtenir une inactivation fiable, efficace et durable des gènes.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics est le distributeur exclusif des collections TRC1.5 et TRC2 du TRC (The RNAi Consortium). Ces banques de shARN associés à des vecteurs lentiviraux offrent une couverture exceptionnelle et sont disponibles dans plusieurs formats, notamment : génome entier, clones/vecteurs d'ARNi individuels et groupes de familles de gènes.
CRISPRi et CRISPRa : la puissance pour l'inhibition et l'activation géniques
Les méthodes CRISPRi (interférence CRISPR) et CRISPRa (activation CRISPR) se révèlent très efficaces, respectivement pour inactiver et activer les gènes sans modifier la séquence d'ADN sous-jacente. Lorsqu'elles sont utilisées dans des criblages "perte de fonction" (ou LOF pour "Loss of Function") et "gain de fonction" (ou GOF pour "Gain of Function") à grande échelle, elles permettent aux chercheurs d'identifier des voies géniques uniques, mais fonctionnellement apparentées, qui passent souvent inaperçues avec les autres méthodes.
Schémas de CRISPRa avec le complexe SAM (Synergystic Activation Mediator) et de CRISPRi avec le domaine KRAB
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics propose toute une gamme de banques CRISPRi et CRISPRa optimisées pour les expériences d'inactivation et de surexpression géniques. Les banques lentivirales CRISPRi et CRISPRa SAM à échantillons regroupés sont disponibles en version standard ou peuvent être personnalisées selon vos besoins.
- Banques CRISPRi couvrant le génome entier et les régions non codantes
- Banques CRISPRa SAM couvrant le génome entier
Vous vous demandez si la méthode CRISPR est adaptée à vos besoins ? Contactez un expert de Sigma-Aldrich® Advanced Genomics.
Ressources apparentées
Protéines de fusion Cas9-GFP
Brochure sur l'ARNi
Cartographie des vecteurs TRC
FAQ sur les shARN
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