T6199

Anticorps monoclonal anti-α-tubuline, souris

clone DM1A, purified from hybridoma cell culture

• Synonyme(s) : Anticorps monoclonal anti-α-tubuline
• Code UNSPSC : 12352203
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 200
• Conjugué: unconjugated
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: DM1A, monoclonal
• Forme: buffered aqueous solution
• Poids mol.: antigen ~50 kDa
• Espèces réactives: yeast, mouse, amphibian, human, rat, chicken, fungi, bovine
• Conditionnement: antibody small pack of 25 μL
• Validation améliorée: independent ( Antibodies); Learn more about Antibody Enhanced Validation
• Concentration: ~1 mg/mL
• Technique(s): immunocytochemistry: 0.5-1 μg/mL using cultured chicken fibroblasts (CFB); immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; microarray: suitable; western blot: 0.5-1 μg/mL using total tissue extract from chicken gizzard
• Isotype: IgG1
• Numéro d'accès UniProt: P68366
• Application(s): research pathology
• Conditions d'expédition: dry ice
• Température de stockage: −20°C
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified
• Informations sur le gène: human ... TUBA4A(7277) ; mouse ... Tuba1a(22142) ; rat ... Tuba1a(64158)

Description

Description générale

L'anticorps monoclonal de souris anti-α-tubuline (isotype IgG1 de souris) provient de l'hybridome DM1A produit par la fusion de cellules de myélome de souris (NS1) et de splénocytes de souris BALB/c immunisées avec de la tubuline de cerveau de poulet purifiée. L'isotype est déterminé par immunodiffusion double à l'aide de réactifs d'isotypage d'anticorps monoclonaux de souris (référence ISO2).

La tubuline est le principal constituant des microtubules. Cette structure intracellulaire cylindrique et filamenteuse est présente dans la quasi-totalité des cellules eucaryotes. Les microtubules sont des éléments structuraux et mobiles qui jouent un rôle dans la mitose, le transport intracellulaire, le mouvement flagellaire et le cytosquelette. La tubuline est un hétérodimère constitué d'α-tubuline et de β-tubuline. Ces sous-unités ont un poids moléculaire d'environ 50 kDa et une très forte homologie. Plusieurs autres tubulines ont été identifiées en plus de l'α-tubuline et de la β-tubuline, portant à sept le nombre total de classes de tubulines différentes. La plupart de ces tubulines ont des localisations cellulaires différentes et possèdent un ensemble de fonctions émergentes diverses et variées. Quatre des sept membres de la famille des tubulines ont été identifiés récemment : la δ-tubuline, la ξ-tubuline, l'η-tubuline et l'ε-tubuline. L'η-tubuline et l'ε-tubuline ont été découvertes lors de recherches dans des bases de données. Les systèmes de microtubules contiennent au moins trois isoformes de l'α-tubuline. Deux de ces isoformes sont codés par deux gènes de l'α-tubuline qui sont transcrits et qui codent des protéines extrêmement similaires. Le troisième est créé par une modification post-traductionnelle. Au moins trois modifications des sous-unités de la tubuline ont été décrites : la phosphorylation de la β-tubuline cérébrale, l'élimination de la tyrosine carboxy-terminale sur l'α-tubuline de tissus de vertébrés, et l'acétylation du groupement aminé d'une ou plusieurs lysines de l'α-tubuline.

Le gène de l'α-tubuline, également appelée tubuline α 4a (TUBA4A), se situe sur le chromosome humain 2q35. Ce gène code un membre de la famille des α-tubulines constitué de 448 acides aminés. La sous-unité α de la tubuline a un poids moléculaire de 50 000 Da.

Les anticorps monoclonaux reconnaissant l'α-tubuline ainsi que ceux dirigés contre d'autres types de tubulines (isotypes I + II de la β-tubuline, isotype III de la β-tubuline, tubuline tyrosinée et forme acétylée de l'α-tubuline) constituent un outil spécifique qui se révèle utile pour l'étude de la distribution intracellulaire de la tubuline et des aspects statiques et dynamiques du cytosquelette.

Spécificité

Cet anticorps est spécifique pour l′α-tubuline dans les analyses par immunoblotting et peut être utilisé pour déterminer la localisation de l′α-tubuline dans les cellules en culture ou les coupes de tissus. Cet anticorps présente une forte réaction sur des fibroblastes de poulet.

L'anticorps monoclonal de souris anti-α-tubuline reconnaît un épitope situé au niveau de l'extrémité C-terminale de l'isoforme de l'α-tubuline (acides aminés 426 à 430) dans divers organismes (chez l'homme, le bovin, la souris et le poulet, par exemple).

Immunogène

microtubules du cerveau d′embryons de poulet.

Application

L'anticorps monoclonal de souris anti-α-tubuline a également été utilisé dans des analyses par immunocytofluorescence et par western blotting.

Actions biochimiques/physiologiques

Un lien a été établi entre une mutation du gène de l'α-tubuline 4a (TUBA4A) et la sclérose latérale amyotrophique (SLA).

L'α-tubuline ou tubuline α 4A (TUBA4A) joue un rôle clé dans la division et la croissance cellulaires. Elle intervient aussi dans de nombreux processus cellulaires tels que la motilité et la signalisation cellulaires ou le maintien de la forme des cellules. Une mutation du gène TUBA4A est associée au développement de divers types de cancers tels que le cancer de la cavité buccale, le cancer du sein, le cancer du rectum, le cancer du poumon et le cancer de la prostate. Par ailleurs, une modification de la protéine TUBA4A entraîne une sclérose latérale amyotrophique (SLA) sporadique.

Forme physique

Solution dans un tampon phosphate salin 0,01 M (pH 7,4) contenant 1 % de BSA et de l'azide de sodium 15 mM.

Notes préparatoires

Stockage et stabilité : À conserver entre 2 °C et 8 °C pendant un mois maximum. Pour un stockage prolongé, congeler à -20 °C en aliquotes de travail. Il est déconseillé de procéder à des congélations/décongélations répétées du produit ou de le stocker dans un congélateur "sans givre". Si une légère turbidité apparaît lors d'un stockage prolongé, clarifier la solution par centrifugation avant utilisation. Toute dilution de travail non utilisée dans les 12 heures doit être jetée.

Autres remarques

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Pour de meilleurs résultats avec des techniques et des préparations différentes, il est recommandé de déterminer les dilutions de travail optimales par titrage.

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