Zellzählung & Zellgesundheit
Die Zellen in der Kultur müssen zur Überwachung der Verdopplungszeit und Quantifizierung vor Versuchen oder Herstellungsprozessen gezählt werden. Kultivierte Zellen müssen routinemäßig nicht nur auf ihre Proliferation, sondern auch auf ihre Viabilität, Zytotoxizität und andere Merkmale der Zellgesundheit überwacht werden. Die Wahl des Assays hängt von der Art der Zellen in der Kultur, der Anwendung in der Studie und dem gewünschten Durchsatz ab. Kultivierte Zellen müssen zwingend quantifiziert oder gezählt werden, bevor sie subkultiviert oder für Transfektionen, genomische Studien, Kryokonservierung oder andere Manipulationen downstream verwendet werden.
Ausgewählte Kategorien
Wir bieten authentifizierte, kontaminationsfreie Zelllinien an, viele davon in Zusammenarbeit mit der ECACC; kritische Tools für die Protein-, Antikörper-, Virus- und Vakzinproduktion.
Entdecken Sie unsere Sammlung validierter humaner Primärzellen von PromoCell®, primärer Blut- und Immunzellen von BioIVT und mehr.
Für ES- und iPS-Zellen qualifizierte Produkte bieten zuverlässige Kulturlösungen, einschließlich Medien und Differenzierungswerkzeuge, für die Stammzellenforschung.
Präzise Zellzahlen: Der Coulter-Handzähler liefert präzise und schnelle Ergebnisse. Setzen Sie in infektiösen Umgebungen auf Einweg-Hämozytometer.
Manuelle Zellzählung
Zellzählkammern wie das Hämozytometer mit Neubauer-Zählnetzen sind gängige Geräte für die manuelle/visuelle Zellzählung. Ein kleines Aliquot der Zellsuspension wird auf die Zählkammer einer präzisionsgeschliffenen Glasplatte mit eingeätztem Liniennetz gegeben, wo es sich durch Kapillarwirkung über das Zählnetz verteilt. Die Zellen werden unter dem Mikroskop sichtbar gemacht und mit einem Handzähler gezählt. Das vordefinierte Volumen der Kammer und das Zählnetz werden zur Berechnung der Zellkonzentration verwendet. Es gibt bildgebende Systeme, durch die der Zählprozess automatisiert wird.
Automatisierte Zellzählung
In vielen Geräten zur automatisierten Zellzählung werden die gleichen Farbstoffe und Prinzipien für die visuelle Zählung wie in der Hämozytometrie verwandt. Im Gegensatz zu automatisierten Zellzählern, die sich auf die Objekterkennung stützen, haben Geräte, die auf dem Coulter-Prinzip basieren, aufgrund ihrer Benutzerfreundlichkeit und Präzision an Popularität gewonnen. Coulter-Zähler pumpen Zellsuspensionen durch einen Sensor, der die Zellen anhand einer Änderung des elektrischen Widerstands erkennt. Dadurch wird eine zuverlässigere Erkennung von Zellen, selbst von kleinen Zellen, und eine hochpräzise Zellzählung möglich. Tragbare Handgeräte (ähnlich einer Pipette) ermöglichen die direkte Zellzählung unter der Zellkulturhaube.
Zellviabilitätsassays
DNA-Synthese: Die Überwachung der aktiven DNA-Synthese in Zellen ist die Grundlage für einige Zellproliferationsassays. Die DNA-Replikation kann durch den Einbau modifizierter Nukleoside gemessen werden, wie z. B. radioaktives 3H-Thymidin oder nicht-radioaktives Bromdesoxyuridin (BrdU), das mit einem Antikörper nachgewiesen wird.
Stoffwechselaktivität: Kalorimetrische Assays, mit denen die Stoffwechselaktivität gemessen wird, eignen sich für die Analyse von Zellproliferation, Zellviabilität und Zytotoxizität. Die Reduktion von Tetrazoliumsalzen wie MTT, XTT und WST-1 zu farbigen Formazanverbindungen erfolgt nur in stoffwechselaktiven Zellen. Das Vorhandensein von ATP ist ebenfalls ein Indikator für Stoffwechselaktivität. Beim Leuchtkäfer-Luciferase-Reporterassay wird ATP, das von sich teilenden Zellen produziert wird, zur Oxidation von D-Luciferin verwendet, das ein biolumineszentes Licht als Messwert erzeugt.
Ausschluss durch Farbstoffe: Die Trypanblau-Färbung wird üblicherweise zur Zählung lebensfähiger Zellen verwendet. Diese Methode beruht auf dem Prinzip, dass lebende Zellen den Farbstoff nicht aufnehmen, während tote Zellen den Farbstoff aufnehmen und unter dem Mikroskop blau erscheinen.
Fluoreszierende Zellviabilitätsassays: Die 5(6)-Carboxyfluorescein-Diacetat-N-Succinimidylester (CFSE)-Markierung ist ein beliebtes Verfahren zur Messung der Anzahl der abgeschlossenen Zellteilungszyklen in einer Zellpopulation. Ein anderer membranpermeabler Farbstoff, Calcein-AM, ist selbst nicht fluoreszierend, gibt aber eine starke grüne Fluoreszenz ab, sobald er in einer viablen Zelle hydrolysiert wird. Im Gegensatz dazu kann der Kernfarbstoff Propidiumiodid (PI) den Kern nur erreichen, wenn er die beschädigte Membran toter Zellen passiert. Da sowohl Calcein als auch PI-DNA mit 490 nm Licht angeregt werden können, ist ein gleichzeitiges Monitoring von lebenden und toten Zellen mit einem Fluoreszenzmikroskop mit Einzelanregung möglich.
Besuchen Sie unsere Dokumentensuche, wo Sie Datenblätter, Zertifikate und technische Dokumentation finden.
Zugehörige Artikel
- Scepter™ Cell Counter is a portable device which brings consistency in cell counting right to the culture hood in less than 30 seconds.
- Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
- Scepter™ counting is 7 to 10 times faster than hemocytometry-and also faster than other automated counters. Learn more about how this amazing technology works
- Detect mycoplasma contamination in cell culture through the PCR, DNA stain, or culture tests. Discover mycoplasma prevention, elimination, and detection kits.
- Alle anzeigen (16)
Zugehörige Protokolle
- TLC separation relies on capillary forces to transport substances on a stationary phase after mobile phase transport.
- Powdered black pepper tested for pierine content follows USP guidelines using HPTLC and HPLC for dietary supplements.
- HPTLC was used to analyze caffeine in coffee. Filtration of coffee through a PTFE syringe filter was the only sample preparation. Quantitation was conducted with a TLC scanner.
- Silica gel G 254 plates are suitable for analysis of Dextromethorphan following the European pharmacopeia monograph.
- MTT-Assayprotokoll für die Messung von Zellviabilität, Zellproliferation und Zytotoxizität. Anwendungshinweise für die MTT Reagenzvorbereitung und Beispiele für Anwendungen.
- Alle anzeigen (13)
Mehr Artikel und Protokolle finden
Wie wir weiterhelfen können
Sollten Sie Fragen haben, reichen Sie bitte eine Anfrage beim Kundensupport
ein oder sprechen Sie mit unserem Kundenservice:
E-Mail custserv@sial.com
oder telefonisch unter +1 (800) 244-1173
Weitere Unterstützung
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Rechner & Apps
Web-Toolbox - wissenschaftliche Forschungstools und Informationsquellen für die Bereiche analytische Chemie, Life Science, chemische Synthese und Materialwissenschaft.
- Customer Support Request
Customer support including help with orders, products, accounts, and website technical issues.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Um weiterzulesen, melden Sie sich bitte an oder erstellen ein Konto.
Sie haben kein Konto?