P1512

Thermolysin from Geobacillus stearothermophilus

Type X, lyophilized powder, 30-350 units/mg protein (E1%/280)

• Synonym(e): Protease aus Bacillus thermoproteolyticus rokko, Thermophilic-bacterial protease
• CAS-Nummer: 9073-78-3
• UNSPSC Code: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• EC Number: 232-973-4
• NACRES: NA.54
• MDL number: MFCD00165549
• EG-Nummer: 3.4.24.27 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: 30-350 units/mg protein (E1%/280)
• Biological source: Geobacillus stearothermophilus

Eigenschaften

• biological source: Geobacillus stearothermophilus
• Quality Segment: 300
• type: Type X
• form: lyophilized powder
• specific activity: 30-350 units/mg protein (E1%/280)
• mol wt: 34.6 kDa by amino acid sequence
• purified by: crystallization
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Thermolysin is a protease that has specificity different from other proteases available for sequence investigations.

Application

Thermolysin has been shown to have a prosequeence that acts as an intramolecular chaperone in vivo. It has also been used in a study to investigate the effects of sodium chloride on thermal stability and catalytic activity.

Thermolysin is also commonly used for the commercial synthesis of N-(benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester, the precursor for the artificial sweetener aspartame.

Eine thermostabile (thermophile) extrazelluläre Metallendopeptidase mit vier Calciumionen. Kofaktoren sind Zink und Calcium. Hydrolysiert Proteinbindungen an der N-terminalen Seite von hydrophoben Aminosäureresten. Der optimale pH-Wert beträgt 8,0 und die optimale Temperatur für Aktivität beträgt 70 °C. Beachtliche Stabilität bei einem pH-Wert von 5 bis 9,5. Thermolysin weist eine geringe Spaltungsspezifizität auf, weshalb es eine Reihe von kurzen Fragmenten erzeugt, die sich zur Sequenzierung eignen. Bevorzugte Spaltung: X-Spaltung-Y-Z, wobei X = eine beliebige Aminosäure; Y = Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala und Z = eine beliebige Aminosäure außer Pro. Eine Spaltung am N-Terminus von Leu wird gegenüber einer Spaltung am N-Terminus von Phe bevorzugt, die gegenüber den anderen bevorzugt wird. Wird häufig verwendet, um eine eingeschränkte Proteolyse für das Peptid-Mapping und Untersuchungen der Proteinstruktur und konformationellen Veränderungen durchzuführen.

Non-specific Protease Activity Assay Video

Physical form

lyophilized powder containing calcium and sodium acetate buffer salts

Preparation Note

The pH optimum is 8.0 and the optimal temperature for activity is 70 °C. Considerably stable from pH 5 to 9.5. Thermolysin has a low cleavage specificity, therefore, it produces a number of short fragments that are suitable for sequencing. Preferential cleavage: X-cleavage-Y-Z where X=any amino acid; Y=Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala and Z is any amino acid other than Pro. Cleavage N-terminal to Leu is preferred over cleavage of N-terminal to Phe which is preferred over the others.

Analysis Note

Contains many extraneous enzymes.

Other Notes

One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).

Sicherheitshinweise

• Signalwort: Danger
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• PSA (Persönliche Schutzausrüstung): dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
• Zielorgane: Respiratory system
• Piktogramme: GHS08,GHS07
• Gefahrencodes: H315,H319,H334,H335
• Sicherheitshinweise: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Was ist los?: WGK 1