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NA0410

GenElute™ HP Plasmid Maxiprep (Endotoxinfrei) Kit

sufficient for 25 preparations

Nachhaltigkeitsmerkmale

Synonym(e):

GenElute, GenElute Plasmid (Endotoxinfrei) Kit

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Über diesen Artikel

NACRES:
NA.52
UNSPSC Code:
41105501

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sufficient for 25 preparations

Quality Segment

greener alternative product characteristics

Designing Safer Chemicals
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sustainability

Sustainability features

technique(s)

DNA extraction: suitable

test parameters

sample volume: 150 mL bacterial culture

greener alternative category

storage temp.

15-25°C

General description

Das GenElute HP Plasmid Maxiprep (Endotoxinfrei) Kit bietet eine einfache und kosteneffektive Methode für die Isolierung von endotoxinfreier Plasmid-DNA aus rekombinanten E. coli-Kulturen. In dem Kit kommt ein Vakuumformat mit einer Filtersäule für die schnelle Klärung des Bakterienlysats zur Anwendung und eine Kieselgelsäule dient zum Capturing der Plasmid-DNA. Eine firmeneigene Lösung sorgt dafür, dass Plasmid-DNA an eine Bindungssäule bindet, wohingegen die Adsorption von Endotoxinen verhindert wird. Mit dieser Technologie können Anwender konstante Endotoxinkonzentrationen von weniger als 0,1 Endotoxineinheiten pro μg Plasmid-DNA erreichen.

Hochwertige endotoxinfreie DNA ist für die direkte Verwendung in den anspruchsvollsten Anwendungen bereit, einschließlich der Transfektion endotoxinempfindlicher Zellen.

Application

Das GenElute™ HP Plasmid Maxiprep (Endotoxinfrei) Kit wurde zur Isolierung von Plasmiden aus Schweineleber und aus kompetenten Escherichia-coli-Zellen verwendet.

Biochem/physiol Actions

Eine rekombinante Übernacht-E. coli-Kultur wird durch Zentrifugation geerntet und einer modifizierten alkalischen Lyse mit SDS unterzogen. Das Lysat wird durch Filtration geklärt. Anschließend wird die Bindungslösung hinzugegeben, die für endotoxinfreie Plasmidpräparationen optimiert wurde. Die Plasmid-DNA wird dann an das Kieselgel gebunden, wohingegen die Adsorption von Endotoxinen verhindert wird. Durch zwei Waschschritte werden Verunreinigungen entfernt. Schließlich wird die gebundene DNA in endotoxinfreies Wasser eluiert. Die gewonnene Plasmid-DNA liegt überwiegend in der Supercoiled-Form vor. Der Gehalt an genomischer DNA und RNA liegt unterhalb der Konzentration, die durch Agarose-Gelelektrophore mit Ethidiumbromidfärbung nachweisbar ist.

Features and Benefits

  • Bis zu 1,2 mg Plasmid-DNA mit hoher Kopienzahl mit Endotoxinkonzentrationen von ≤0,1 EU/μg
  • Vom Zellpellet bis zum gereinigten Plasmid in nur 35 Minuten.
  • Praktisches Vakuumformat

Other Notes

Weitere Informationen finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/genelutehp.

Legal Information

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

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NA0310PLX15NA0400
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sufficient for 25 preparations

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sufficient for 25 purifications

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sufficient for 15 purifications

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sufficient for 10 preparations

technique(s)

DNA extraction: suitable

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DNA purification: suitable

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DNA purification: suitable

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DNA extraction: suitable

usage

sufficient for 25 preparations

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Aligned,

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Greener Alternative Product

sustainability

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Kit-Komponenten auch einzeln erhältlich

Produkt-Nr.
Beschreibung
SDB & Preisangaben

  • Red Vac Cap 5
    SDB

  • Column Preparation Solution 2
    SDB

  • Wash Solution 1
    SDB

  • Neutralization Solution EF
    SDB

  • Wash Solution 2
    SDB

  • E-Toxate™ Water, endotoxin, free
    SDB

  • Lysis Solution
    SDB

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Signalwort

Danger

Hazard Classifications

Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 3 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Zielorgane

Central nervous system

Lagerklasse

3 - Flammable liquids

Flammpunkt (°F)

77.0 °F - closed cup

Flammpunkt (°C)

25 °C - closed cup

Was ist los?

WGK 3



Hier finden Sie alle aktuellen Versionen:

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Questions

1–6 of 6 Questions  
  1. Do the binding columns fit on other manufacturers’ manifolds?

    1 answer
    1. Yes. The columns fit on all standard vacuum manifolds.

      Helpful?

  2. Is plasmid DNA isolated with this kit suitable for use in transfection?

    1 answer
    1. Yes. However, if you are currently required to use an endofree plasmid purification kit, we recommend using the GenElute HP Endotoxin-free Kit.

      Helpful?

  3. Which format gives a better yield, vacuum or spin?

    1 answer
    1. There is no difference in plasmid recovery when using either format.

      Helpful?

  4. How long does it take to isolate plasmid using the vacuum format?

    1 answer
    1. A midiprep or maxiprep requires only 30 minutes to complete.

      Helpful?

  5. How do the GenElute HP Plasmid Kits differ from other plasmid purification systems?

    1 answer
    1. The GenElute HP Plasmid Kits are much faster than other commercially available kits. A filter syringe is used for preparing the cleared lysate, which replaces a lengthy centrifugation step. These kits also offer the option of using a vacuum or spin purification format rather than a gravity drip to bind, wash and elute the plasmid. In addition, samples are eluted in Tris buffer so there are no alcohol precipitations required.

      Helpful?

  6. What is the expected yield of plasmid DNA that you can isolate from these kits?

    1 answer
    1. Yields can reach as high as 350 mg for a midiprep and 1.2 mg for a maxiprep. As with any protocol, lower yields can be expected with low copy plasmids.

      Helpful?

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