M9692

Anti-MAP-Kinase, aktivierter monoklonaler (Diphosphoryliertes ERK-1&2)-Antikörper der Maus

clone MAPK-YT, purified from hybridoma cell culture

• Synonym(e): Anti-DP-ERK aus mouse
• NACRES: NA.44
• UNSPSC Code: 12352203
• Conjugate: unconjugated
• Clone: MAPK-YT, monoclonal
• Application: ARR, ELISA (i), ICC, IHC (p), IP, WB
• Citations: 110

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 200
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: MAPK-YT, monoclonal
• form: buffered aqueous solution
• mol wt: antigen ERK-1 44 kDa, antigen ERK-2 42 kDa
• species reactivity: human, Caenorhabditis elegans, Xenopus, Drosophila, hamster, rat, bovine, mouse, yeast
• packaging: antibody small pack of 25 μL
• concentration: 1.5-2 mg/mL
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, indirect ELISA: suitable, microarray: suitable, western blot: 0.5-1 μg/mL using a whole cell extract of RAT-1 cells treated with vanadate and H₂O₂.
• isotype: IgG1
• UniProt accession no.: P28482
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... MAPK1(5594), MAPK3(5595) ; mouse ... Mapk1(26413), Mapk3(26417) ; rat ... Mapk1(116590), Mapk3(50689)

Beschreibung

General description

Mitogen-aktivierte Proteinkinase (MAPK) ist auch als extrazelluläre Signal-regulierte Kinase (ERK) bekannt. Sie existiert in zwei Isoformen, nämlich ERK1 (MAPK3) und ERK2 (MAPK1). ERK2 ist auf dem menschlichen Chromosom 22q11.2 lokalisiert. ERK1 ist auf dem menschlichen Chromosom 16p11.2 lokalisiert.
Anti-MAP-Kinase, aktivierter (diphosphoryliertes ERK-1&2) monoklonaler Antikörper der Maus (Maus IgG1-Isotyp) wird aus dem MAPK-YT-Hybridom gewonnenen, das durch die Fusion von Myelomzellen der Maus (NS1) mit Splenozyten aus BALB/c-Mäusen, die mit einem synthetischen phosphorylierten Peptid, das Aminosäuren, die der phosphorylierten Form der ERK-Aktivierungsschleife entsprechen, und das an KLH konjugiert ist, erzeugt wird. Der Isotyp wird mittels Doppeldiffusions-Immunassay unter Anwendung von monoklonalen Mausantikörper-Isotypisierungsreagenzien (Produktnr. ISO-2) bestimmt.

Immunogen

Synthetisches Peptid HTGFLpTEpYVAT, das der phosphorylierten Form der ERK-Aktivierungsschleife entspricht.

Application

Der Antikörper kann in Immunblotting-Anwendungen bei einer Arbeitskonzentration von 0,5–1,0 μg/ml in kultivierten Zellen sowie in Gewebeextrakten eingesetzt werden. Eine Arbeitsverdünnung von 1:80–1:100 eignet sich für die Immunhistochemie (Formalin- und Formaldehyd-fixierte Schnitte). Der Antikörper kann auch für Immunzytochemie, Immunpräzipitation, indirekten ELISA und Protein-Mikroarrays genutzt werden.
Monoklonaler Anti-MAP-Kinase (diphosphorylierte ERK-1&2)-Antikörper der Maus wird zum Nachweis von Folgendem eingesetzt:

• ERK1/2 in Kardiomyozyten mittels Immunfluoreszenzmikroskopie
• ERK1/2 in menschlichen Eosinophilen mittels Western Blot
• ERK in menschlichen bronchialen Epithelzellen mittels Proteinarray
• ERK-Proteine in menschlichen Leberzellliinien mittels Immunfluoreszenz-Assay und Western-Blot-Analyse
• ERK1/2 in menschlichen embryonalen Nierenzellen mittels Immunpräzipitation

Biochem/physiol Actions

Der Antikörper reagiert spezifisch mit der diphosphorylierten Form von MAP-Kinase (ERK-1 und ERK-2). Er erkennt weder die nicht phosphorylierte noch die monophosphorylierte Form von MAP-Kinase oder die diphosphorylierten Formen von JNK und p38-MAP-Kinase. Das vom Antikörper erkannte Epitop enthält die phosphorylierten Threonin- und Tyrosin-Reste mit der Regulierungsstelle von aktiver MAP-Kinase.

Die Enzym-Superfamilie der Mitogen-aktivierten Proteinkinasen (MAPK) ist an weitverbreiteten Signalwegen beteiligt. Mitglieder dieser Familie sind unter anderem die ERK1/2- (extrazelluläre Signal-regulierte Proteinkinase, auch p42/p44-MAPK genannt), JNK- und p38-MAPK-Unterfamilien. Dies sind die terminalen Enzyme in einer Signalkaskade, in der jede Kinase das nächste Glied in der Sequenz phosphoryliert und aktiviert. Die Phosphorylierung von Tyrosin und Threonin ist für die vollständige Aktivierung aller MAPK essenziell. An der Aktivierung der ERK-Kaskade sind verschiedene Kinasen beteiligt. Diese Kaskade wird durch die kleine GTPase Ras, die durch ihre Stimulierung die Aktivierung der Raf1-Kinase auslöst, eingeleitet. Raf1 führt die Übertragung fort, indem sie MEK aktiviert. Aktivierte MEK scheint die einzige Kinase zu sein, die ERK spezifisch phosphorylieren und aktivieren kann. ERK scheint ein wichtiges regulierendes Molekül zu sein, das regulatorische Ziele im Zytosol (Phospholipase A2, PLA2), die in Substrate des Kerns (ELK1) translozieren und diese phosphorylieren, phosphorylieren kann. Die Aktivierung der ERK-Kaskade vermittelt und reguliert die Signalübertragungswege als Reaktion auf Stress und mitogene Signale, und ist wesentlich für die Entwicklung und Differenzierung, Lernen, Erinnerung und Überleben.
Monoklonaler Anti-MAP-Kinase-Antikörper, aktiviert (diphosphorylierte ERK-1 und ERK-2) ist spezifisch für die aktive, zweifach phosphorylierte Form der MAP-Kinase (ERK-1 und ERK-2, 44 kDa bzw. 42 kDa). Das vom Antikörper erkannte Epitop enthält die phosphorylierten Threonin- und Tyrosin-Reste mit der Regulierungsstelle von aktiver MAP-Kinase (Thr¹⁸³ und Tyr¹⁸⁵ in ERK-2). Er erkennt weder die nicht phosphorylierte noch die monophosphorylierte Form des MAP-Kinase-Moleküls oder die diphosphorylierte Form von Jun-Kinase (JNK) und p38-MAP-Kinase.
Die durch MAPK vermittelten Signalwege werden mit der Pathogenese von neurodegenerativen Störungen und Krebs in Verbindung gebracht. Das Entfernen des ERK1-Genlocus wird mit DiGeorge-Syndrom (DGS) und velokardiofazialem Syndrom (VCFS) sowie angeborenen Herzfehlern in Verbindung gebracht. Umordnungen des MAPK3-Genlocus können zu der Pathogenese von Autismus-Spektrum-Störungen und Schizophrenie beitragen.

Monoklonaler Anti-MAP-Kinase-Antikörper, aktiviert (diphosphorylierte ERK-1&2) ist spezifisch für die aktive, zweifach phosphorylierte Form der MAP-Kinase (ERK-1 und ERK-2, 44 kDa bzw. 42 kDa). Eine Reaktivität mit Mensch, Rind, Ratte, Maus, Hamster, Xenopus, Drosophila, Spodoptera frugiperda, C. elegans und Hefe wurde festgestellt.

Physical form

Lösung in phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH-Wert 7,4, mit 15 mM Natriumazid.

Preparation Note

Für regelmäßige Verwendung bei 2–8 °C bis zu 1 Monat aufbewahren. Zur Langzeitlagerung in Arbeitsaliquoten bei -20 °C einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen oder die Aufbewahrung in frostfreien Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eintritt, die Lösung vor der Verwendung durch Zentrifugieren klären. Nicht verwendete Arbeitsverdünnungen sollten nach 12 Stunden entsorgt werden.

Disclaimer

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Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
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• ppe: Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)