L5391

Lectin ausBandeiraea simplicifolia (Griffonia simplicifolia)

Isolectin B₄ (BSI-B₄), peroxidase conjugate, lyophilized powder

• Synonym(e): Bandeiraea simplicifolia-Agglutinin, BS-I
• NACRES: NA.32
• UNSPSC Code: 12352202
• Form: lyophilized powder
• Assay: ≥90% protein basis (Warburg-Christian)
• Biological source: Bandieraea simplicifolia

Eigenschaften

• biological source: Bandieraea simplicifolia
• Quality Segment: 200
• conjugate: peroxidase conjugate
• assay: ≥90% protein basis (Warburg-Christian)
• form: lyophilized powder
• potency: <200 μg per mL agglutination activity (using human blood group B erythrocytes)
• peroxidase activity: 40-160 units/mg protein
• composition: Protein, ~95% modified Warburg-Christian
• technique(s): blood typing: suitable, fractionation: suitable
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

Application

General Western Blot Protocol:

• Glycoprotein sample size: 500ng
• Lectin Concentration: 0.1ug/ml

1. Load samples at 500 ng of glycoprotein per lane
2. Run 4-20% Bis-Tris SDS page gel
3. Transfer gel to a PVDF membrane
4. Block membrane for 1 hr at RT with RIPA buffer (R0278 Sigma)
5. Incubate HRP lectin at 0.1ug/ml with RIPA buffer for 2 hours at RT
6. Wash membrane 5 x 5 minutes with 25ml RIPA buffer
7. Detect using chemiluminescent substrate (CPS1-120)

Biochem/physiol Actions

BS-I hat eine hohe Affinität für terminale α-D-Galactosylreste mit einer sekundären Affinität für terminale N-Acetyl-α-D-Galactosaminylreste.

Physical form

Contains sodium citrate buffer salts and calcium chloride

Preparation Note

Prepared from peroxidase type VI using a modification of the method of O′Sullivan, et al. Repurified by affinity chromatography after conjugation.

Analysis Note

Die Agglutinationsaktivität wird in μg/ml ausgedrückt und aus seriellen Verdünnungen einer 1-mg/ml-Lösung, die phosphatgepufferte Kochsalzlösung mit pH-Wert 6.8 enthält, für jedes Lektin, Calcium, Magnesium und Mangan in verschiedenen Konzentrationen bestimmt. Diese Aktivität ist die niedrigste Konzentration, bei der eine 2%-ige Suspension entsprechender Erythrozyten nach einstündiger Inkubation bei 25 °C agglutiniert.

Other Notes

BS-I ist ein tetrameres Lektin und besteht aus den zwei Untereinheiten A und B. Es gibt fünf BS-I-Isolektine mit verschiedenen Untereinheit-Zusammensetzungen: BSI-B₄, BSI-AB₃, BSI-A₂B₂, BSI-A₃B und BSI-A₄. BSI- B₄ ist Blutgruppen-B-spezifisch und hat eine exklusive Affinität für terminale α-D-Galactosylreste, wogegen BSI-A₄ Blutgruppen-A-spezifisch ist und eine hohe Affinität für terminale N-Acetyl-α-D-Galactosaminylreste aufweist.

One unit will form 1 mg purpurogallin in 20 sec from pyrogallol at pH 6.0 at 20 °C.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• Was ist los?: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• PSA (Persönliche Schutzausrüstung): Eyeshields, Gloves, type N95 (US)