COLLB-RO
Roche
Collagenase B
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Clostridium histolyticum
Qualitätsniveau
Sterilität
non-sterile
Form
lyophilized
Verpackung
pkg of 100 mg (11088807001)
pkg of 2.5 g (11088831001)
pkg of 500 mg (11088815001)
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
0.5-2.5 mg/mL
Optimaler pH-Wert
6.0-8.0
Anwendung(en)
sample preparation
Lagertemp.
2-8°C
Allgemeine Beschreibung
Collagenase B wird mittels Filtration, Ammoniumsulfat-Fällung, Dialyse und Lyophilisierung aus Clostridium histolyticum-Kulturen hergestellt. Collagenase aus Clostridium histolyticum ist ein collagenolytisches Enzym. Sie tritt mit collagenartigen Substanzen in Wechselwirkung und ist verantwortlich für die Zersetzung von Collagen in kleine Peptide. Sie findet breite Anwendung bei der Disaggregation zahlreicher Gewebetypen (z. B. Lunge, Herz, Muskel, Knochen, Fettgewebe, Leber, Niere, Knorpel, Brustdrüse, Plazenta, Blutgefäße, Gehirn, Tumore, Nabelschnur) und bei der Herstellung von Einzelzellsuspensionen zur Etablierung primärer Zellkultursysteme. Collagenase B wird empfohlen, wenn Ausbeute und Viabilität wichtig sind.
Spezifität
Collagenase baut natives Collagen ab. Clostripain, trypsinähnliche Enzyme und neutrale Proteasen bauen ebenfalls andere Proteine ab.
Anwendung
Clostridium-Collagenase von Roche wird zur Präparation von Zellen aus vielen Gewebetypen verwendet, darunter Leberzellen, Fettzellen, Pankreasinselzellen, Epithelzellen, Muskelzellen, Endothelzellen usw. Es sollte jedoch bei jeder Enzymcharge empirisch ermittelt werden, ob sie für den Aufschluss eines bestimmten Gewebes geeignet ist.
Collagenase B wird zur Präparation von Zellen aus Maus-Aorten und Darmkrebsgewebe verwendet.
Collagenase B wird zur Präparation von Zellen aus Maus-Aorten und Darmkrebsgewebe verwendet.
Spezifikationen
Enzymaktivität:
Collagenaseaktivität: >0,15 Einheiten/mg (nach Wünsch) (+25 °C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Kontaminierende Enzymaktivitäten: Trypsin, Clostripain und gesamtproteolytische Aktivität
Collagenase B hat eine normale bis hohe Collagenaseaktivität und eine überdurchschnittlich hohe Clostripainaktivität (üblicherweise >10 Einheiten/mg).
Inhibitoren:
Collagenase-Inhibitoren: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-Mercaptoethanol
Collagenase wird durch Serum nicht gehemmt.
Clostripain-Inhibitoren: TLCK
Trypsin-Inhibitoren: Aprotinin, Trypsin-Inhibitor (Eiklar, Sojabohnen), Serum
Collagenaseaktivität: >0,15 Einheiten/mg (nach Wünsch) (+25 °C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Kontaminierende Enzymaktivitäten: Trypsin, Clostripain und gesamtproteolytische Aktivität
Collagenase B hat eine normale bis hohe Collagenaseaktivität und eine überdurchschnittlich hohe Clostripainaktivität (üblicherweise >10 Einheiten/mg).
Inhibitoren:
Collagenase-Inhibitoren: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-Mercaptoethanol
Collagenase wird durch Serum nicht gehemmt.
Clostripain-Inhibitoren: TLCK
Trypsin-Inhibitoren: Aprotinin, Trypsin-Inhibitor (Eiklar, Sojabohnen), Serum
Einheitendefinition
Collagenase von Roche wird in Wünsch-Einheiten (1 μmol Produkt wird pro Minute bei +25 °C mit Wünsch-Substrat gebildet) getestet.
Die Collagenaseaktivität wird häufig in Mandl-Einheiten angegeben (1 μmol Leucin wird in 5 Stunden bei +37 °C aus Collagen freigesetzt).
Leider gibt es keinen gemeinsamen Umrechnungsfaktor für die beiden Einheiten der Aktivität, da die Mandl-Einheit teilweise von der Konzentration der kontaminierenden Proteasen im Collagenasepräparat abhängt, die eine undefinierbare Variable darstellt. Eine reinere Collagenasezubereitung ergäbe somit eine geringere spezifische Aktivität in Mandl-Einheiten als eine Rohzubereitung. Für Clostridium-Zubereitungen sind üblicherweise Umrechnungsfaktoren von ca. 1:1800 angegeben (z. B. enthielt eine bestimmte Charge Clostridium-Collagenase ca. 0,15 Wünsch-Einheiten/mg und 250 Mandl-Einheiten/mg).
Die Collagenaseaktivität wird häufig in Mandl-Einheiten angegeben (1 μmol Leucin wird in 5 Stunden bei +37 °C aus Collagen freigesetzt).
Leider gibt es keinen gemeinsamen Umrechnungsfaktor für die beiden Einheiten der Aktivität, da die Mandl-Einheit teilweise von der Konzentration der kontaminierenden Proteasen im Collagenasepräparat abhängt, die eine undefinierbare Variable darstellt. Eine reinere Collagenasezubereitung ergäbe somit eine geringere spezifische Aktivität in Mandl-Einheiten als eine Rohzubereitung. Für Clostridium-Zubereitungen sind üblicherweise Umrechnungsfaktoren von ca. 1:1800 angegeben (z. B. enthielt eine bestimmte Charge Clostridium-Collagenase ca. 0,15 Wünsch-Einheiten/mg und 250 Mandl-Einheiten/mg).
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Ca2+
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2,5 mg/ml
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Roche empfiehlt, nur die Lyophilisatmenge zu rekonstituieren, die für die sofortige Anwendung benötigt wird. Die rekonstituierte Lösung kann bei -15 bis -25 °C bis zu einer Woche aufbewahrt werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden, da die Aktivität nach der Rekonstituierung abnimmt.
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2,5 mg/ml
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Roche empfiehlt, nur die Lyophilisatmenge zu rekonstituieren, die für die sofortige Anwendung benötigt wird. Die rekonstituierte Lösung kann bei -15 bis -25 °C bis zu einer Woche aufbewahrt werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden, da die Aktivität nach der Rekonstituierung abnimmt.
Rekonstituierung
Rekonstituierung in jeder ausgeglichenen Salzlösung (z. B. HBSS)
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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