BGALD-RO

β-Galactose-Dehydrogenase

from Pseudomonas fluorescens

• Synonym(e): D-Galactose-Dehydrogenase, D-Galactose:NAD+ 1-Oxidoreduktase
• UNSPSC Code: 12352204
• EG-Nummer: 1.1.1.48 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Specific activity: ~5 units/mg protein (At 25 °C with D-galactose as the substrate; standardized with BSA.)
• Biological source: Pseudomonas fluorescens
• Recombinant: expressed in E. coli

Eigenschaften

• biological source: Pseudomonas fluorescens
• recombinant: expressed in E. coli
• form: suspension
• specific activity: ~5 units/mg protein (At 25 °C with D-galactose as the substrate; standardized with BSA.)
• mol wt: 64,000 Da
• packaging: pkg of 1 mL (10104973001 [1 mg]), pkg of 1 mL (10104981001 [5 mg])
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): activity assay: suitable
• color: white
• optimum pH: 8.4 (0.1 M in Tris buffer)
• pH range: 4.6-9.2
• solubility: water: soluble
• suitability: suitable for enzyme test
• UniProt accession no.: (T1WEA6 · T1WEA6_PSEFL)
• foreign activity: ADH <0.01%, LDH <0.5%, NADH oxidase <0.1%, galactosidase <0.01%
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

β-Galactose-Dehydrogenase spielt eine entscheidende Rolle beim Galaktosestoffwechsel, indem sie die Pyridin-Nukleotid-abhängige Dehydrierung von β-D-Galactopyranose katalysiert und NADH und D-Galactono-1,5-Lacton ergibt. D-Galactose-Dehydrogenase von P. fluorescens ist ein Mitglied der Familie der Oxidoreductasen. Sie besteht aus zwei identischen Untereinheiten und hat ein Molekulargewicht von 64.000. Zusätzlich enthält das Enzym zwei Bindungsstellen.

Application

β-Galactose-Dehydrogenase wird als Reporter-Enzym in Neuraminidase (NA) kinetischen Parametern für die natürlichen Substrate 6′-Sialyl-N-acetyllactosamin (6SLN) und 3′-Sialyl-N-acetyllactosamin (3SLN) verwendet.

Biochem/physiol Actions

Galactose-Dehydrogenase oxidiert D-Galactose [K_m = 0,7 mM (30 °C, pH 9,1); relative Rate = 1,00], L-Arabinose (relative Rate = 0,47), D-Fucose (relative Rate = 1,05), 2-Desoxy-D-Galactose (relative Rate = 0,27), 2-Amino-2-Desoxy-D-Galactose [Galactosamin], (relative Rate = 0,02; pH 8,6).
Galactose Dehydrogenase oxidiert jedoch nicht L-Galactose, D-Arabinose, D-Glucose, L-Fucose, D-Ribose, D-Xylose, D-Glucuronsäure, D-Galacturonsäure oder D-Galactose-6-Phosphat. Das Enzym verwendet entweder NAD (K_m = 0,24 mM; relative Rate = 1.0) oder NADP (K_m = 2,3 mM; relative Rate = 0,32).

Physical form

Suspension in 3,2 M Ammoniumsulfatlösung, 1 mM EDTA, pH-Wert ca. 6

Analysis Note

Verunreinigungen: <0,01 % ADH, <0,01 % ?-Galactosidase, <0,1 % NADH-Oxidase, <0,5 % LDH

Other Notes

Eine Einheit Galactose-Dehydrogenase oxidiert 1 mol β-D-Galactose in einer Minute bei +25 °C und einem pH-Wert von 8,6.
Der Qualitätskontroll-Assay erzeugt 1 mol NADH pro mol oxidierter Galactose.

Galactose-Dehydrogenase von Pseudomonas fluorescens (MG 64.000 D) ist ein Dimer mit Untereinheiten gleicher Größe (MG der Untereinheit = 32.000 D).

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
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