Once isolated, organoids are cultured in specialized media embedded in a rich extracellular matrix (ECM) basement membrane extract hydrogel such as Growth Factor Reduced Matrigel. Media is replenished every other day and cells are passaged once per week (7-12 days) before cells become too large or necrotic. Cells can be passaged in either small clump fragments or as single cells using mechanical dissociation/enzyme-free passaging reagents. Depending on organoid type and confluency, split ratios of roughly 1:3-1:4 can be used when passaging organoids. For sensitive organoid types, ROCKi (Y27632) (SCM075) can be added during passaging to help in promoting cell viability.
SCM105
3dGRO® L-WRN konditionierter Medienzusatz
3dGRO® L-WRN Conditioned Media Supplement
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Synonym(e):
Conditioned Media
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Über diesen Artikel
NACRES:
NA.71
UNSPSC Code:
12352207
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liquid
manufacturer/tradename
Millipore
technique(s)
cell based assay: suitable
color
clear red
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
Application
Aussehen (Farbe): klare, rote Flüssigkeit
Endotoxin: <2 EU/ml
Sterilitätsprüfung: Kein Wachstum / entspricht
Die Medien werden auf ihre Funktion beim Fördern des Wachstums humaner Darmorganoide geprüft
Die Medien werden mittels ELISA auf ihren Wachstumsfaktorengehalt geprüft
Endotoxin: <2 EU/ml
Sterilitätsprüfung: Kein Wachstum / entspricht
Die Medien werden auf ihre Funktion beim Fördern des Wachstums humaner Darmorganoide geprüft
Die Medien werden mittels ELISA auf ihren Wachstumsfaktorengehalt geprüft
Der 3dGRO® L-WRN konditionierter Medienzusatz ist eine Formulierung auf der Grundlage von DMEM/F-12 PLUS Medium und enthält die 3 Wachstumsfaktoren Wnt3a, R-Spondin-3 und Noggin. Diese Faktoren wirken im Wnt-Signalweg, der eine wesentliche Rolle beim Erhalten der Proliferation von LGR5+-Kryptenstammzellen innerhalb von Organoiden spielt. Die Wnt-Aktivierung ist daher wesentlich für das In-vitro-Wachstum von humanen Darmorganoiden. Das L-WRN konditionierte Medium wird verbreitet als Komponente des Nährmediums zur Unterstützung des Wachstums von humanen Darmorganoiden, einschließlich 3dGRO® gastrointestinale Organoid-Biobank (SCC310–SCC367), verwendet. Anwendungen für L-WRN konditioniertes Medium sind unter anderem die Erweiterung von humanen Darmorganoiden und anderen epithelialen Organoidzelltypen.
Hinweis: Das Produkt wird mit einer 2X-Konzentration bereitgestellt (siehe Datenblatt für ein vollständiges Organoidmedienrezept).
Quelle
Der 3dGRO® L-WRN konditionierte Medienzusatz wird aus der Mauszelllinie L-M(TK-), die Maus-Wnt3a, -R-Spondin-3 und -Noggin sezerniert, gewonnen. Das L-WRN konditionierte Medium kann Spuren von Maus-DNA enthalten.
Hinweis: Das Produkt wird mit einer 2X-Konzentration bereitgestellt (siehe Datenblatt für ein vollständiges Organoidmedienrezept).
Quelle
Der 3dGRO® L-WRN konditionierte Medienzusatz wird aus der Mauszelllinie L-M(TK-), die Maus-Wnt3a, -R-Spondin-3 und -Noggin sezerniert, gewonnen. Das L-WRN konditionierte Medium kann Spuren von Maus-DNA enthalten.
Features and Benefits
Der L-WRN konditionierte Medienzusatz enthält die drei Wachstumsfaktoren Wnt3a (W), R-Spondin-3 (R) und Noggin (N) für Organoidkulturen.
Preparation Note
Der 3dGRO® L-WRN konditionierte Medienzusatz sollte bei -20 °C gelagert werden. Wenn Sie für den Gebrauch bereit sind, tauen Sie das L-WRN konditionierte Medium über Nacht bei 2–8 °C im Dunkeln auf. Das aufgetaute Medium ist zwei Wochen haltbar, wenn es bei 2–8 C gelagert wird. Wenn die Medien nicht innerhalb von zwei Wochen verwendet werden, aliquotieren Sie ungebrauchte Medien und lagern Sie bei -20 °C. Nach dem Auftauen von erneut eingefrorenen Aliquoten dürfen Medien nicht wieder eingefroren werden.
Legal Information
3dGRO is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
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| technique(s) cell based assay: suitable | technique(s) cell based assay: suitable | technique(s) cell based assay: suitable | technique(s) cell based assay: suitable |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. -10 to -25°C |
| shipped in ambient | shipped in ambient | shipped in ambient | shipped in ambient |
| manufacturer/tradename Millipore | manufacturer/tradename Millipore | manufacturer/tradename Millipore | manufacturer/tradename - |
| form liquid | form lyophilized | form lyophilized | form - |
| color clear red | color off-white | color yellow | color - |
Lagerklasse
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 1
Zulassungslistungen
Zulassungslistungen werden hauptsächlich für chemische Produkte erstellt. Für nicht-chemische Produkte können hier nur begrenzte Angaben gemacht werden. Kein Eintrag bedeutet, dass keine der Komponenten gelistet ist. Es liegt in der Verantwortung des Benutzers, die sichere und legale Verwendung des Produkts zu gewährleisten.
64-17-5
CAS No.
Analysenzertifikate (COA)
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How are organoids cultured?
1 answer-
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How Do you Extract RNA/DNA from Organoids in Cultured in Matrigel?
1 answer-
Traditional DNA/RNA isolation kits can be used to prepare genomic material for sequencing (RNA-seq, scRNA-seq, WGS, CHIP-seq etc). For some applications with large organoids, tissue specific DNA/RNA extraction kits are recommended. TRI Reagent (T9424) can be added to the dissociated organoids before RNA extraction and can be stored at -80 °C until future use.
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How do you stain organoids with antibodies?
1 answer-
Organoids can be stained with antibodies for immunocytochemical (ICC)/Immunohistochemical (IHC) analysis using either whole-mount or paraffin embedding/sectioning techniques. It is critical to use antibodies prequalified for organoid analysis.
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Is there a version of this product without Wnt3a, i.e., only with Noggin and R-spondin-3 ? Can you buy Noggin conditioned media separately?
1 answer-
There are no such conditioning medias available as you describe. The only other organoid conditioned media is product 3dGRO™ R-Spondin-1 Conditioned Media Supplement, this is product SCM104: https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/mm/scm104.
We recommend contacting our Sales team who can assist you with further possible options of a custom product. Please navigate to the link https://www.sigmaaldrich.com/support/customer-support, click on "Quotes" under the Orders Section, and provide the required information. Thank you.
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